近些年來(lái),紅鰭東方純{Takifugu rubripes)作為重要的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),由于其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、蛋白質(zhì)含量高以及營(yíng)養(yǎng)含量豐富等優(yōu)點(diǎn),而素有“魚(yú)類(lèi)之王”的美稱(chēng)。地理位置多分布于黃海、渤海和日本海域。是一種可以進(jìn)行養(yǎng)殖的鲀科魚(yú)類(lèi)中的優(yōu)良品種。然而隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,各種疾病所造成的傷害也就越來(lái)越大,從而導(dǎo)致大量化學(xué)的藥物的濫用,其后果是藥物殘留、病蟲(chóng)害的耐藥性和大片海域藥物的擴(kuò)散直接影響食品安全和環(huán)境公共衛(wèi)生安全。因此迫切需要研制出對(duì)環(huán)境無(wú)污染、不具有耐藥性的藥物。同時(shí)對(duì)紅鰭東方鮑免疫機(jī)制的研究,期望在疾病爆發(fā)時(shí),也可以通過(guò)免疫機(jī)制進(jìn)行防御。刺激隱核蟲(chóng)�。–ryptocaryon irritans Brown 1951）作為養(yǎng)殖紅鰭東方鮑的主要寄生蟲(chóng)病,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,關(guān)于防治刺激隱核蟲(chóng)病的方法主要是通過(guò)化學(xué)藥物進(jìn)行防治,但是給魚(yú)體本身和環(huán)境都造成很大的副作用。本實(shí)驗(yàn)主要是通過(guò)對(duì)刺激隱核蟲(chóng)的觀察和從中草藥方面進(jìn)行篩選,從而得到最有效殺滅刺激隱核蟲(chóng)的中草藥。同時(shí)也了解到當(dāng)紅鰭東方魷感染刺激隱核蟲(chóng)時(shí),其免疫系統(tǒng)發(fā)揮著重要作用,因此對(duì)免疫反應(yīng)中最直接起到作用的... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 刺激隱核蟲(chóng)的流行病學(xué)及防治措施
        1.1.1 刺激隱核蟲(chóng)病原學(xué)
        1.1.2 刺激隱核蟲(chóng)生活史
        1.1.3 刺激隱核蟲(chóng)的宿主及發(fā)病特征
        1.1.4 刺激隱核蟲(chóng)的危害及防治
            1.1.4.1 “白點(diǎn)病”的危害
            1.1.4.2 刺激隱核蟲(chóng)的防治措施
    1.2 魚(yú)類(lèi)免疫系統(tǒng)的研究進(jìn)展
        1.2.1 魚(yú)類(lèi)的免疫器官和組織
        1.2.2 魚(yú)類(lèi)的非特異性免疫應(yīng)答
        1.2.3 魚(yú)類(lèi)的特異性免疫應(yīng)答
            1.2.3.1 淋巴細(xì)胞
            1.2.3.2 免疫球蛋白（Ig）
    1.3 本實(shí)驗(yàn)研究的目的及意義
2 刺激隱核蟲(chóng)病的防治研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 刺激隱核蟲(chóng)滋養(yǎng)體的收集、包囊和幼蟲(chóng)的培養(yǎng)以及形態(tài)學(xué)觀察
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)用中草藥
        2.1.3 中草藥藥液制備
        2.1.4 中草藥殺滅滋養(yǎng)體、幼蟲(chóng)
        2.1.5 溫度和鹽度對(duì)包囊破裂、幼蟲(chóng)脫包產(chǎn)出的影響
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 癥狀及蟲(chóng)體形態(tài)
        2.2.2 中草藥對(duì)滋養(yǎng)體殺滅效果
        2.2.3 中草藥對(duì)幼蟲(chóng)殺滅效果
        2.2.4 溫度、鹽度對(duì)包囊破裂幼蟲(chóng)產(chǎn)出的影響
    2.3 討論
3 紅鰭東方鲀免疫球蛋白的純化及特性分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)用魚(yú)
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 紅鰭東方鲀血清制備
        3.2.2 飽和硫酸銨粗提IgM
        3.2.3 層析
            3.2.3.1 HiTrap IgM Purification Column親和層析
            3.2.3.2 HiTrap Protein A Sepharose Column親和層析
            3.2.3.3 HiTrap DEAE Sepharose Fast Flow Column離子交換層析
        3.2.4 濃縮
        3.2.5 純度分析
        3.2.6 分子量測(cè)定
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 飽和硫酸銨粗提純化IgM的結(jié)果
        3.3.2 SDS-PAGE電泳分析的結(jié)果
        3.3.3 紅鰭東方鲀血清蛋白濃度
        3.3.4 紅鰭東方鲀與其他4種海水魚(yú)的igM的比較
    3.4 討論
4 紅鰭東方純免疫球蛋白IgM多克隆抗體的制備及其與其他4種海水魚(yú)類(lèi)的免疫交叉反應(yīng)
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.2 主要試劑
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 鼠抗血清IgM的制備
        4.2.2 鼠抗紅鰭東方鲀血清IgM效價(jià)的測(cè)定
        4.2.3 鼠抗血清IgM的Western Blot檢測(cè)
        4.2.4 鼠抗血清IgM交叉反應(yīng)檢測(cè)
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 鼠抗紅鰭東方鲀IgM血清效價(jià)
        4.3.2 鼠抗IgM血清的Western Blot檢測(cè)
        4.3.3 鼠抗IgM血清交叉反應(yīng)檢測(cè)
    4.4 討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
碩士期間發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中草藥防治寄生性魚(yú)病的研究進(jìn)展[J]. 胡梁及,朱盛山,張雄飛,鐘娜娜,吳思平,彭亮,黃娟萍,蔡延渠.  中國(guó)獸藥雜志. 2014(09)
[2]草魚(yú)IgM的純化、標(biāo)記及檢測(cè)方法的建立[J]. 田園園,葉星,張莉莉.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(04)
[3]龍膽石斑刺激隱核蟲(chóng)病防治技術(shù)研究[J]. 王大鵬,何安尤,謝達(dá)祥,李長(zhǎng)伙,陳曉漢.  水產(chǎn)科技情報(bào). 2013(01)
[4]斜帶石斑魚(yú)TLR3基因的克隆及其在刺激隱核蟲(chóng)感染時(shí)的表達(dá)分析[J]. 喬瑋,李言偉,李安興.  水生生物學(xué)報(bào). 2012(03)
[5]大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)病繼發(fā)細(xì)菌感染致死原因的研究[J]. 劉振勇,林小金,謝友佺,吳寧江,范希軍.  福建水產(chǎn). 2012(01)
[6]養(yǎng)殖大菱鲆隱核蟲(chóng)病及其治療[J]. 王印庚,劉志偉,林春媛,陳霞,王玲,李華.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2011(07)
[7]花鱸免疫球蛋白的分離純化及部分特性分析[J]. 許娜娜,錢(qián)冬,趙海泉.  中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2011(01)
[8]刺激隱核蟲(chóng)生活史的觀察[J]. 劉振勇,謝友佺.  福建水產(chǎn). 2010(01)
[9]20種中草藥殺滅離體小瓜蟲(chóng)的藥效研究[J]. 鉏超,張其中,羅芬.  淡水漁業(yè). 2010(01)
[10]草魚(yú)血清IgM蛋白的純化及抗血清的制備[J]. 丁煒東,曹麗萍,曹哲明.  水生生物學(xué)報(bào). 2010(01)

博士論文
[1]牙鲆免疫球蛋白單克隆抗體的研制及其在牙鲆淋巴囊腫病研究中的應(yīng)用[D]. 李強(qiáng).中國(guó)海洋大學(xué) 2007

碩士論文
[1]主要經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)血清免疫球蛋白的共同表位研究[D]. 鄭惠.福建農(nóng)林大學(xué) 2012



本文編號(hào)：2937316