發(fā)布時(shí)間：2020-12-12 02:26

　　異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）因具有個(gè)頭大、生長(zhǎng)快、肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富等優(yōu)點(diǎn)而受到人民群眾的喜愛,其產(chǎn)量持續(xù)增長(zhǎng),帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。然而,大規(guī)模病害的爆發(fā)阻礙了異育銀鯽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,其中病害主要有寄生蟲病、細(xì)菌性疾病、真菌性疾病、病毒性疾病等。2012年來(lái),異育銀鯽養(yǎng)殖區(qū)爆發(fā)了大規(guī)�！蚌w出血病”,該病死亡率極高,造成重大經(jīng)濟(jì)損失,經(jīng)鑒定引起這種疾病的是鯉皰疹病毒Ⅱ型（CyHV-2）。CyHV-2最早于1992年在日本的金魚中被發(fā)現(xiàn),因其是第二個(gè)從鯉科魚中分離出的病毒,國(guó)際病毒系統(tǒng)分類與命名委員會(huì)命名其為鯉皰疹病毒Ⅱ型（cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2）,因其可造成鯽魚造血組織器官壞死,因此,又稱該病毒為“皰疹病毒性造血器官壞死癥病毒”,（Herpes viral haematopoietic necrosis virus,HVHNV）。鯉科魚皰疹病毒目前分為三個(gè)型,分別為鯉痘瘡病毒（Carp pox herpesvirus,Cyprinid herpesvirus,CyHV-1）;鯉皰疹病毒 Ⅱ 型（CyHV-2）... 

【文章來(lái)源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１用于提取病毒液的病魚組織ＰＣＲ結(jié)果

??染ＣｙＨＶ－２，檢測(cè)結(jié)果如圖２．１所示，４條病魚的腎組織皆為陽(yáng)性。因此這些病??魚提取的病毒液可以放心用于人工回感。??Ｍ?１?２３４５６７８９?Ｍ??１＞Ｐ?ｂｐ??２０００?２０００??ｚｓｏ??ｉｕｕ?ｌｏｏ??圖２．１用于提取病毒液的病魚組織ＰＣＲ結(jié)果。Ｍ：ＤＬ２０００ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１－４：用于提取病毒??液的４條病魚的腎組織；６為陰性對(duì)照；９為陽(yáng)性對(duì)照：５、７、８為空白對(duì)照。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｔｉｓｓｕｅ?ＤＮＡ?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｄｉｓｅａｓｅｄ?ｆｉｓｈ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｅｘｔｒａｃｔ?ｔｈｅ?ｓｉｃｋ?ｐｏｉｓｏｎ．?Ｍ：??ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?Ｍ：?ｋｉｄｎｅｙ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｏｆ?４?ｓｉｃｋ?ｆｉｓｈ；?６：?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?９：?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；??５、７、８：?ｂｌａｎｋ?ｃｏｎｔｒｏｌ．??２．３．２疾病感染癥狀??與正常魚相比，回感的魚出現(xiàn)行動(dòng)緩慢、離群獨(dú)游等反應(yīng)。從第二天開始魚??出現(xiàn)了輕微病癥，第三天開始出現(xiàn)死亡，都出現(xiàn)典型的病癥，如圖２．２所示：鰭??基部有出血點(diǎn)、尾鰭末端發(fā)白、眼球突出、解剖可見魚鰾上有出血點(diǎn)等，第七天??９９°／�；馗恤~死亡。??圖２．２異育銀鯽人工感染鯉皰疹病毒ＩＩ型后的疾病癥狀和健康魚的對(duì)比。Ａ：感染３天后有??１８??

２．３．４熒光定量ＰＣＲ標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制??將獲取的ＤＮＡ模板測(cè)定濃度后，１０倍梯度稀釋，分別以６．０７ｘ１?〇８？６．０７ｘ１０２??ｃｏｐｉｅｓ／Ｌ為模板，進(jìn)行熒光定量ＰＣＲ檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見表２．３和圖２．４，計(jì)算并??得出標(biāo)準(zhǔn)曲線：ｙ?＝?－３．６３９９?ｘ?＋３６．９４１，Ｒ２＝?０．９９９８。??表２．３熒光定量ＰＣＲ標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制相關(guān)數(shù)值??Ｔａｂｌｅ?２．３?Ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｖａｌｕｅｓ?ａｂｏｕｔ?ｔｈｅ?ｄｒａｗｉｎｇ?ｏｆ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ＰＣＲ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ??拷貝數(shù)?ｌｏｇｌＯ?重復(fù)數(shù)?ＣＴ平均值??１９??


本文編號(hào)：2911679