本研究主要分為三個部分:1.對暴露于原油水溶物中的鯽魚受精卵和仔魚進行觀察,研究原油水溶性成分對胚胎的死亡率、胚胎發(fā)育、仔魚死亡率、仔魚發(fā)育及仔魚活動能力的影響;2.以短時間(1~7d)暴露于原油水溶物中的鯽魚為研究對象,測定其肝臟、鰓中抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量,研究原油水溶物對鯽魚的肝臟、鰓中的抗氧化系統(tǒng)的影響;3.以長時間(28d)暴露于原油水溶物中的鯽魚為研究對象,研究原油水溶物對鯽魚血清生化指標的影響。主要結果如下:試驗一、原油水溶物對鯽魚受精卵和仔魚的影響將人工授精獲得的方正銀鯽(Carassius auratus gibelio)受精卵(受精2 h)暴露于體積百分濃度分別為4.50、9.90、15.00mg/L的大慶原油水溶物培養(yǎng),研究其孵化率、出膜時間及仔魚發(fā)育狀況等。結果表明,原油水溶物對仔魚的影響大于對胚胎的影響。原油水溶性成分并不直接造成胚胎死亡,各濃度組之間胚胎死亡率總體上無明顯差異,試驗組仔魚出膜時間相對于對照組有提前趨勢。在暴露在原油水溶物的條件下,仔魚存在發(fā)育缺陷、畸形、心率減緩、體色著色減弱、活動能力下降等問題,甚至造成死亡。隨著原油水溶物濃度的提高,上述現象的發(fā)生及死亡率逐漸增加。試驗二、原油水溶物對肝臟和鰓抗氧化系統(tǒng)的影響以成年鯽魚為研究對象,在0.03、0.30、3.00 mg/L的原油水溶物暴露條件下(以石油類物質的質量濃度計),研究原油水溶性組分對鯽魚的肝臟和鰓的抗氧化系統(tǒng)的影響。當暴露時間為1d時,實驗組鯽魚肝臟中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽轉移酶(GST)和谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活性受到誘導,隨原油水溶物濃度的升高誘導效應變強。隨暴露時間延長到7d,3.00mg/L實驗組中肝臟和鰓中的上述抗氧化酶均表現為抑制,說明3.00mg/L濃度原油水溶物會影響鯽魚肝臟和鰓的抗氧化能力。鰓中的超氧化物歧化酶活性變化與肝臟一致,但是鰓中的GST、GPX活性與肝臟不一致,可能與兩種器官的結構和功能有關。鯽魚肝臟和鰓中的過氧化氫酶(CAT)活性變化趨勢一致,呈現先抑制降低后誘導升高的趨勢。鯽魚肝臟和鰓中的丙二醛(MDA)含量先降低后升高,說明1d的原油水溶物暴露會引起鯽魚肝臟產生抗氧化應激反應,造成抗氧化酶活性升高,暴露時間延長,氧化損傷程度升高。試驗三、原油水溶物對鯽魚血液生理生化指標的影響以成年鯽魚為研究對象,在0.03、0.30、3.00、15.00mg/L的原油水溶物暴露的條件下,研究原油水溶物對鯽魚血清生化指標的影響。經過28d原油水溶液暴露,實驗組鯽魚血清中的總蛋白含量高于對照組。當原油水溶物濃度≥0.30mg/L時,血清中的總蛋白含量顯著高于對照組,各實驗組鯽魚血清中的球蛋白的變化趨勢與總蛋白相似,含量均高于對照組。然而,實驗組血清中的白蛋白含量和A/G值均明顯低于對照組,特別是當原油水溶物濃度≥0.30mg/L時。當原油水溶物濃度≥0.30mg/L時,實驗組鯽魚血清中的谷草轉氨酶(GOT)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)活性均明顯升高。當鯽魚在原油水溶物中(≥0.30mg/L)暴露超過14d是,其血清中抗氧化酶活性受到抑制,MDA含量升高。
【學位單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2016
【中圖分類】：X503.22;S917.4
【部分圖文】：

圖 2-1 孵出后各濃度組每 24 h 死亡仔魚數g.2-1 Death number of larvae every 24h with different experimental concentrations incubation出膜時間濃度組首個仔魚出膜均發(fā)生在受精 53 h 時，故在首個出膜時間點上區(qū)別。受精后 53-60 h 間每小時出膜仔魚數如圖 2 所示。由圖 2 可見是在首個仔魚出膜的第 2-3 小時出現孵出高峰，但試驗組孵出仔魚的對照組；根據觀察，在首個仔魚出膜的第 16 小時，0、4.50、9.90、15孵出約 70、90、87、84 ind，試驗組脫膜仔魚數超過一半，僅對照組低于半數�？偠灾囼灲M所需的平均孵化時間短于對照組。

圖 2-1 孵出后各濃度組每 24 h 死亡仔魚數ig.2-1 Death number of larvae every 24h with different experimental concentrations aincubation出膜時間濃度組首個仔魚出膜均發(fā)生在受精 53 h 時，故在首個出膜時間點上區(qū)別。受精后 53-60 h 間每小時出膜仔魚數如圖 2 所示。由圖 2 可見是在首個仔魚出膜的第 2-3 小時出現孵出高峰，但試驗組孵出仔魚的對照組；根據觀察，在首個仔魚出膜的第 16 小時，0、4.50、9.90、15孵出約 70、90、87、84 ind，試驗組脫膜仔魚數超過一半，僅對照組低于半數�？偠灾囼灲M所需的平均孵化時間短于對照組。

(a)正常仔魚 （b）體軸彎曲、未形成功能性鰾（c）（d）卵黃囊和心包囊水b) healthy larva （d）larva with curved body axis and without functional swim b（c）（d） larva with yolk sac oedema and pericardia oedema圖 2-3 大慶原油水溶物對方正銀鯽仔魚的影響.2-3 Effects of exposure to oil water-soluble matters on fry of Carassius auratus gib魚活動能力據觀察，試驗組仔魚有上下翻滾、沖撞跳躍、倒立、狂游、側臥于象出現，而對照組仔魚相對于實驗組則活動平穩(wěn)，較為舒緩。各組48、72、96、120h 活動能力如圖 5。結果顯示，15.00mg/L 濃度組開始時很強的運動能力，但隨著時間的推移，其活動能力逐漸下降；4.50、9活動能力呈現為先上升后下降的特點，均是在孵出 72h 后達到最大對照組仔魚活動能力隨著時間推移而逐漸增強。

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本文編號：2824792