【摘要】：長牡蠣(Crassostrea gigas)是我國乃至全世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的一種經(jīng)濟貝類,也是世界最重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。目前我國長牡蠣育苗所用親本都是未經(jīng)遺傳改良的野生群體,導致了長牡蠣生長性狀退化、品質(zhì)下降,也制約了長牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的健康、持續(xù)發(fā)展。因此,培育出生長快、抗逆性高的長牡蠣新品系是選擇育種計劃的主要任務,也是解決這些問題最有效的途徑之一。本研究構(gòu)建了兩組長牡蠣微衛(wèi)星五重PCR體系并用于家系鑒定。首次測量了長牡蠣的閉殼肌拉力,選擇部分因子交配設計構(gòu)建長牡蠣家系,采用家系混合養(yǎng)殖的方式來獲得實驗材料。運用ASReml R軟件的混合線性模型和約束極大似然法(REML)估算生長相關性狀的遺傳力,遺傳相關,表型相關和基因型-環(huán)境互作(Genotype×Environment,G×E)效應,為長牡蠣進一步選育、種質(zhì)改良和新品種培育提供基礎數(shù)據(jù)和理論參考。1、長牡蠣微衛(wèi)星多重PCR體系構(gòu)建及其在家系鑒定中的應用篩選多態(tài)性高、特異性好、片段大小適中的10個長牡蠣微衛(wèi)星位點進行優(yōu)化組合,根據(jù)擴增片段大小及同一熒光不重疊原則構(gòu)建了兩組五重pcr體系。運用cervus3.0軟件對0527組27個長牡蠣全同胞家系的643個子代和0612組27個全同胞家系382個子代分別進行親權鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用兩組微衛(wèi)星五重pcr鑒別時,在0527組和0612組的鑒定成功率均為100%;只用第一組微衛(wèi)星五重pcr,可以將0527組96%的子代和0612組96%的子代鑒定到親本;只用第二組微衛(wèi)星五重pcr,可以將0527組97%的子代和0612組95%的子代鑒定到親本。本研究中篩選出的兩組微衛(wèi)星五重pcr體系在兩組家系中的鑒定效率均較高,可以快速有效地將子代個體鑒定至所屬父母本,在長牡蠣家系鑒定中具有很好的應用價值。2、長牡蠣生長相關經(jīng)濟性狀遺傳參數(shù)估計長牡蠣的殼長(shelllength,sl),殼高(shellheight,sh),殼寬(shellwidth,sw),濕重(wetweight,ww),肉重(meatweight,mw),閉殼肌重(adductormuscleweight,amw)和閉殼肌拉力(shell-closingstrength,ss)七個性狀的遺傳力分別為0.24±0.09,0.11±0.07,0.35±0.15,0.37±0.16,0.31±0.14,0.36±0.14和0.25±0.13。各性狀的遺傳力均位于0.11-0.37,除sw外,其它性狀的遺傳力均為中-高遺傳力。各性狀間的遺傳相關和表型相關均呈現(xiàn)正相關:遺傳相關值位于0.53-0.99,均屬于中-高相關;但各性狀間的表型相關的差異較大,其變化范圍為0.10-0.81。由于sl的遺傳力較高,可以通過較易測量的SL的選育從而達到濕重和肉重指標的選育。同時,通過對SS的選育也可間接完成對閉殼肌重的選育。3、長牡蠣生長相關經(jīng)濟性狀G×E互作效應分析對于SH,SL,MW和AMW,其兩環(huán)境間的遺傳相關均屬于高度相關,表明這些性狀在崆峒島(KTD)和乳山(RS)的G×E互作效應較弱。而WW和SS指標存在顯著性差異,并且兩指標的遺傳相關都小于0.8,這說明在RS和KTD兩個養(yǎng)殖環(huán)境下這兩個性狀都具有較強的G×E互作效應,但是SW的估測結(jié)果存在較大的標準誤。因此,對于WW和AMW,可針對不同的養(yǎng)殖海域制定各自海域的育種計劃,以提高該性狀在相應海域中的育種進程。
【學位授予單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S917.4
【圖文】：

2.1 五重 PCR 的優(yōu)化設計的引物組合經(jīng)過篩選優(yōu)化后獲得了兩組微衛(wèi)星五重 PCR 體系。兩組五重 PCR 反應體系 25μL 包括:模板 DNA 1.0 μL (30 ng), 10 × PCRBuffer 2.5 μL, 25 mmol/LMgCl22.0 μL, 10 mmol/LdNTPs 0.5 μL, 10 mmol/L 引物每對各 0.2 μL, 5 U/μLTaq DNA 聚合酶 0.2 μL,純水 17.8 μL。兩組五重 PCR 反應程序均為: 95°C 預變性 3 min； 95°C 變性 30 s,退火溫度 60 °C 30s, 72 °C 延伸 30 s，循環(huán) 10 次；95 °C變性 30 s,退火溫度 55 °C30 s， 72 °C 延伸 30 s, 循環(huán) 20 次；最后 72 °C 延伸 6 min； 4 °C 保存。各體系的引物組合、引物濃度詳見表 1-3、表 1-4。部分微衛(wèi)星五重 PCR的毛細管電泳結(jié)果如圖 1-1。

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本文編號：2803067