【摘要】：伴隨TCR信號(hào)通路激活的T細(xì)胞激活的過程十分復(fù)雜,關(guān)于硬骨魚TCR信號(hào)通路的相關(guān)研究并不十分清楚。TCR信號(hào)通路最開始的啟動(dòng)依靠于一系列TCR共受體分子(比如CD4/8,CD3和CD45)和一系列胞內(nèi)酪氨酸激酶(比如Lck,ZAP70和Fyn)之間的相互作用。刺激隱核蟲是一種會(huì)使海水魚類患上白點(diǎn)病給海水養(yǎng)殖帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失的纖毛類寄生蟲。該寄生蟲會(huì)感染魚類的腮和皮膚,被認(rèn)為是研究魚類鰓和皮膚粘膜免疫的較好模型。我們之前的研究顯示局部粘膜組織的抗體應(yīng)答對(duì)魚類抵抗寄生蟲有重要的作用。然而在刺激隱核蟲感染魚類后,關(guān)于TCR信號(hào)通路如何激活T細(xì)胞并進(jìn)一步幫助B細(xì)胞激活產(chǎn)生抗體應(yīng)答的機(jī)制仍然不清楚。在本研究中,我們克隆了石斑魚TCR共受體EcCD3e(537bp)和三個(gè)激酶,包括EcLck(1512bp),EcFyn(1605bp)和EcZAP70(1893bp)。同源比對(duì)顯示它們?nèi)慷己图t鰭東方渶(Takifugu rubripes)有很高的同源性(EcCD3e 41%,EcLck 88%,EcFyn 98%和EcZAP70 93%),相關(guān)的功能結(jié)構(gòu)域也是保守的。健康石斑魚的組織分布顯示這四個(gè)基因在胸腺中都有很高的表達(dá)量,有趣的是它們?cè)谄つw,腮和中腸這些粘膜免疫組織中表達(dá)量相對(duì)較高。同時(shí)我們鑒定了刺激隱核蟲感染石斑魚后,三個(gè)TCR共受體(EcCD4-1,EcCD3e和EcCD45)和三個(gè)激酶(EcLck,EcFyn和EcZAP70)在皮膚,腮,頭腎,脾臟四個(gè)組織8個(gè)時(shí)間點(diǎn)(0,6 h,12 h,24 h,2 d,3 d,5 d,7 d)的表達(dá)情況。所有的六個(gè)基因在皮膚的大部分時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量都呈現(xiàn)顯著上調(diào),這表明在皮膚組織可能發(fā)生了本地T細(xì)胞的激活以支持本地抗體應(yīng)答。在脾臟中,相比于三個(gè)TCR共受體沒有明顯變化的表達(dá)量,三個(gè)激酶的表達(dá)量發(fā)生了顯著地上調(diào),并且三個(gè)激酶在脾臟中的上調(diào)要比頭腎還高,這表明了脾臟可能是刺激隱核蟲感染石斑魚后主要的系統(tǒng)免疫器官。
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S943

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本文編號(hào)：2792678