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刺參自溶過程中Caspase家族酶及線粒體膜電位變化的研究

發(fā)布時間:2020-08-13 11:07
【摘要】:刺參屬于棘皮動物門,海參綱。刺參具有很高的營養(yǎng)價值,屬于典型的高蛋白、富含維生素、礦物質(zhì),但低脂肪、不含膽固醇的高端營養(yǎng)食材。但刺參自溶能力很強(qiáng),當(dāng)生活條件發(fā)生改變或受到不利的理化因素的刺激,便會出現(xiàn)吐腸、體壁溶化等自溶現(xiàn)象。刺參自溶嚴(yán)重影響了刺參的養(yǎng)殖、運(yùn)輸、加工、保藏。前期研究發(fā)現(xiàn),在刺參自溶的過程中伴隨著細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞凋亡與caspase家族酶密切相關(guān)。本實驗通過紫外線UVC照射,以誘導(dǎo)刺參自溶。以刺參體壁TCA可溶性寡肽含量為標(biāo)準(zhǔn),確定刺參自溶程度。然后,對自溶過程中,不同時間刺參線粒體膜電位的變化JC-1染色法進(jìn)行檢測。利用免疫組織化學(xué)法對自溶刺參體壁中的caspase-3進(jìn)行染色、觀察。并檢測刺參腸中caspase-3、caspase-9等caspase家族酶的存在及酶比活力隨自溶時間變化的情況。本實驗通過JC-1染色對自溶過程中刺參腸中線粒體膜電位的檢測發(fā)現(xiàn):當(dāng)刺參受到紫外線刺激時,自溶程度并不高,但線粒體膜電位立刻大幅度下降,之后隨著自溶時間增加逐漸降低。對通過免疫組織化學(xué)法標(biāo)記出刺參體壁caspase-3,比較不同自溶時間內(nèi)刺參體壁免疫組化染色情況發(fā)現(xiàn):與新鮮刺參相比,自溶刺參體壁內(nèi)出現(xiàn)caspase-3染色顆粒,而且caspase-3染色顆粒的數(shù)量隨著自溶時間的增加逐漸增多。對不同自溶時間的刺參中caspase-3、caspase-9等caspase家族酶酶比活力檢測后,發(fā)現(xiàn)caspase家族酶的活性都會隨著自溶時間增強(qiáng),但激活的時間及活力增強(qiáng)的順序不盡相同。
【學(xué)位授予單位】:大連工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S917.4

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本文編號:2791927

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