發(fā)布時(shí)間：2020-08-09 14:48

【摘要】：中華鱉(Trionyx sinensis)是我國重要的名特淡水養(yǎng)殖品種,其營養(yǎng)豐富、肉味鮮美、滋補(bǔ)力強(qiáng)。中華鱉在野生環(huán)境下疾病很少發(fā)生,但是隨著人工養(yǎng)殖生產(chǎn)的高密度和集約化發(fā)展,各類疾病頻繁發(fā)生,中華鱉的病害問題成為當(dāng)前制約其人工養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要障礙之一。本研究從患病中華鱉頸部及口腔分離出兩株菌株,分別標(biāo)號為1號和2號。為驗(yàn)證1號和2號菌的致病性,進(jìn)行人工感染試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：1號和2號混合感染的致病力大于1號和2號菌單獨(dú)感染的致病力,且腹腔注射法比浸泡法更易使健康中華鱉致病。對患病中華鱉主要器官進(jìn)行組織病理學(xué)切片觀察,發(fā)現(xiàn)其腸、肝、肺、腎、氣管、脾臟、性腺等組織器官都發(fā)生明顯病變,其中肺部組織病變最嚴(yán)重,可能由此導(dǎo)致中華鱉呼吸困難而窒息死亡。對1號和2號菌株進(jìn)行生理生化鑒定,結(jié)合其形態(tài)特征,可以初步確定1號菌為是嗜水氣單胞菌；2號菌為弗勞地枸櫞酸桿菌或者布拉克枸櫞酸桿菌,這兩種菌屬于弗勞地枸櫞酸桿菌復(fù)合群,但具體是哪一種菌目前還尚無定論；分別對1號和2號菌株16S rRNA序列進(jìn)行擴(kuò)增,測序。將測序結(jié)果輸入到NCBI中,用BLAST工具對序列進(jìn)行同源性比對分析,發(fā)現(xiàn)：1號菌株與嗜水氣單胞菌的親緣關(guān)系最近；2號菌株與弗勞地枸櫞酸桿菌親緣關(guān)系最近。結(jié)合其形態(tài)特征和生理生化鑒定結(jié)果,可以確定1號菌為嗜水氣單胞菌,2號菌為弗勞地枸櫞酸桿菌,即弗氏檸檬酸桿菌；藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明1號和2號菌對頭孢他啶、頭孢吡肟、阿米卡星、環(huán)丙沙星、美洛培南抗生素高度敏感,對氨芐西林和哌拉西林/他唑巴具有耐藥性。本研究通過采集目前在湖南多個(gè)中華鱉養(yǎng)殖場發(fā)現(xiàn)的一種新的細(xì)菌性疾病“中華鱉大脖子病”的病樣,進(jìn)行病原的分離、純化與16S rRNA序列分析,之后進(jìn)行人工感染試驗(yàn)和組織病理學(xué)研究確定病原的致病性,進(jìn)而進(jìn)行藥物敏感性實(shí)驗(yàn)初步確定該病的治療藥物,為生產(chǎn)中治療該病提供理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S947.1

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本文編號：2787263