發(fā)布時間：2020-08-05 07:38

【摘要】：黃姑魚(Nibea albiflora)屬于鱸形目Perciformes、石首魚科Sciaenidae、黃姑魚屬Nibea,是我國重要的海水經(jīng)濟(jì)魚類,具有生長快、抗逆性強(qiáng)、繁殖力強(qiáng)等特點,是開展近海網(wǎng)箱養(yǎng)殖和工廠化養(yǎng)殖的適宜品種。黃姑魚是一種適應(yīng)鹽度范圍較廣的品種,屬于廣鹽類海水魚。水體鹽度是魚類生長、代謝和繁育的重要的環(huán)境因子,鹽度變化對魚類健康狀態(tài)密切相關(guān)。迄今,關(guān)于鹽度對魚類生長、組織抗氧化酶活和非特異性免疫影響的研究較熱門,而鹽度對腸道微生物多樣性的影響的相關(guān)研究文獻(xiàn)少有報道。本論文在研究鹽度對黃姑魚耐受性、生長、組織抗氧化酶活和非特異性免疫及代謝指標(biāo)的影響基礎(chǔ)上,采用石蠟切片,研究了鹽度對組織結(jié)構(gòu)的影響,運(yùn)用16S rDNA擴(kuò)增子測序技術(shù),研究了鹽度對腸道微生物多樣性的影響,并探究了相應(yīng)的微生物的功能。旨在不同鹽度水體中黃姑魚的健康養(yǎng)殖提供資料。研究結(jié)果由三部分構(gòu)成。1.黃姑魚鹽度耐受性研究。本部分實驗共分為鹽度S0(代表鹽度為0)、S2、S4、S6、S8、S40、S45、S50、S55、S60組,共10組,每組3平行。采用了兩種規(guī)格的黃姑魚,即規(guī)格Ⅰ:平均體質(zhì)量為180.29±2.26 g(平均值±SD),平均全長為25.7±0.51cm;規(guī)格Ⅱ:平均體質(zhì)量為17.3±0.8 g,平均全長為9.52±0.7cm。將黃姑魚從自然海水直接移入各鹽度組中,經(jīng)過7天短期鹽度脅迫,結(jié)果發(fā)現(xiàn):鹽度2-45下存活率均為100%。在S0、S55、S60中均全數(shù)死亡,其中S0、S55、S60三組全致死時間,規(guī)格Ⅰ分別為10.33±1.9 h,29.55±3.2 h,12.67±1.6 h;規(guī)格Ⅱ分別為1.22±0.5 h,67.5±4.3 h,3.8±0.9 h。1周內(nèi),規(guī)格Ⅰ、Ⅱ黃姑魚在S50組中存活率分別為15±7.8%、30±4.5%。在S0組中12 h內(nèi),兩種規(guī)格黃姑魚死亡率均100%,其中,全致死時間高鹽S60組明顯小于S55組,當(dāng)鹽度超過50‰發(fā)現(xiàn)鹽度越高,其耐受能力越低。將半致死時間(y)與相應(yīng)的鹽度(x)擬合成二次函數(shù)回歸曲線為,規(guī)格Ⅰ:y=-0.199x~2+18.405x-380.75,R~2=0.999,規(guī)格Ⅱ:y=-0.093x~2+9.67x-243.5,R~2=0.998。鹽度超過一定范圍,半致死時間隨鹽度升高而減少,即鹽度耐受能力和鹽度呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系,隨著鹽度增高,其耐受能力先緩慢下降,后是急劇下降。在此,筆者得出兩種規(guī)格黃姑魚的耐受鹽度不低于2,耐受鹽度均不高于50。規(guī)格大小方面,大規(guī)格黃姑魚鹽度耐受力強(qiáng)于小規(guī)格黃姑魚。2.鹽度對黃姑魚生長、組織抗氧化酶活和非特異性免疫及代謝指標(biāo)的影響。本實驗設(shè)置5個鹽度組,即S6、S12、S18、S30和S42組,每組三個平行。歷經(jīng)7周長期鹽度脅迫實驗,結(jié)果表明:(1)隨著鹽度的升高,特定生長率降低。(2)通過石蠟切片,發(fā)現(xiàn)高鹽組、低鹽組和對照組肝臟組織差異不明顯;鰓組織中隨著鹽度的增高,泌鹽細(xì)胞明顯增多。(3)本次研究中發(fā)現(xiàn),餌料系數(shù)低鹽S6、S12和S18組均與對照組無顯著差異(P0.05),而高鹽組S42顯著低于對照組(P0.05),肝體比與餌料系數(shù)的變化一致。(4)黃姑魚鰓和肝臟組織中超氧化物歧化酶(SOD),S6和S42組均高于S30組(對照組)。黃姑魚鰓中的酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)活均隨著鹽度升高,也相應(yīng)逐漸升高,但無顯著性差異,而血清中兩種酶活S6和S42組顯著低于S30組。谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)酶活在鰓組織中,S6組顯著高于其它組,且S42組中酶活最低,而谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)隨著鹽度升高先上升,后下降再升高。血清中代謝指標(biāo),如乳酸脫氫酶(LDH)在各組間無顯著性差異,肌酐(Cr)、甘油三酯(TG)變化趨勢隨著鹽度升高先升后下降,葡萄糖(GLU)先下降再上升后下降,各代謝指標(biāo)均在鹽度42組時最低(P0.05)。3.鹽度對腸道菌群的影響。本實驗共分為鹽度S6、S30、S42組,共3組,每組分別設(shè)置3個平行,歷經(jīng)7周長期鹽度脅迫實驗,實驗結(jié)束,取黃姑魚后腸進(jìn)行微生物多樣性分析。結(jié)果表明:(1)在S6組中,共有524個OUT聚類(一個OUT相當(dāng)于一種細(xì)菌);S30組,共有494個OUT聚類;S42組,共有567個OUT聚類。(2)其中門水平上三個鹽度組中優(yōu)勢細(xì)菌種群主要分布于變形菌門和軟壁菌門,均在在各組所有樣品中占細(xì)菌OUT總數(shù)的90.79%-98%。在所有細(xì)菌門中,綠彎菌門和疣微菌門S6組顯著高于S30組;而擬桿菌門S30組顯著高于S6組(P0.05)。疣微菌門、綠彎菌門和螺旋體菌門細(xì)菌,S42組顯著高于S30組(P0.05)。(3)從屬水平分析結(jié)果表明:在S6組和S30組,優(yōu)勢細(xì)菌為短波單胞菌屬(分別為25.99%和19.06%)、螺原體屬(分別為15.18%和13.8%)、伯克氏菌屬(分別為14.14%和18.19%)、支原體屬(分別為13.1%和6.95%)。S42組優(yōu)勢細(xì)菌為螺原體屬(24.53%)、短波單胞菌屬(19.81%)、支原體屬(10.66%)。S6和S30組之間有25種屬的細(xì)菌含量具有顯著性差異,其中有18種S6組顯著高于S30組(P0.05)。S42和S30兩組之間有57種屬的細(xì)菌含量具有顯著性差異,其中有37種S42組顯著高于S30組(P0.05)。(4)采用RDP和NT-16S數(shù)據(jù)庫進(jìn)行物種注釋發(fā)現(xiàn):高鹽S42組,致病性弧菌顯著高于對照組(P0.05),高鹽組中益生菌減少,如紅環(huán)菌屬具有為宿主提供生長因子,減少了,表明高鹽環(huán)境并不利于黃姑魚的生長或維持腸道健康。
【學(xué)位授予單位】：浙江海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S917.4
【圖文】：

圖 2-1 各鹽度組中半致死時間分布Fig. 2-1 Distribution of median lethal time in each salinity group大小對黃姑魚鹽度耐受性的影響。

而鰓中未發(fā)現(xiàn)溶解或者膨大現(xiàn)象，其中，鰓組織中泌鹽細(xì)胞隨著鹽度的升高，明顯增多，如圖3-1 。圖 3-1 不同鹽度組中肝臟和鰓組織結(jié)構(gòu)的變化(鰓中箭頭所指的為泌鹽細(xì)胞)Fig.3-1 Changes in liver and Gill tissue structure in different salinity group

圖 3-2 不同鹽度組中組織抗氧化酶活Fig.3-2 Tissue antioxidant enzyme activities in different salinity groups

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本文編號：2781233