【摘要】：魚類營養(yǎng)研究領域的一個重要課題是如何提高魚類對飼料糖的利用,充分發(fā)揮糖的供能功能,降低蛋白質作為能量的消耗。吉富羅非魚具有生長速度快、出肉率高、起捕率高等特點,已經(jīng)成為我國目前淡水養(yǎng)殖業(yè)中的重要品種。為了研究不同水平淀粉對吉富羅非魚生長、血液生化和免疫指標以及組織胰島素受體水平、酪氨酸激酶活性等影響,探討高淀粉日糧對吉富羅非魚影響的營養(yǎng)生理機制,探索魚類碳水化合物代謝的相關分子調控機制,本試驗選用平均體重約為31.73±0.68 g的吉富羅非魚360尾,隨機分配到12個水循環(huán)養(yǎng)殖箱。試驗分為3個處理,每個處理設4個重復,每個重復30尾魚。設置了添加不同水平碳水化合物的等能飼糧,其中一組飼糧添加0%的α-淀粉為低淀粉組(LS),另兩組分別添加18%和36%的α-淀粉為中淀粉組(MS)和高淀粉組(HS)。在可控的循環(huán)水系統(tǒng)中飼養(yǎng)70天,采用常規(guī)分析、生化分析和分子生物學方法進行測定,結果顯示:1.高淀粉組的增重率和特定生長率顯著低于低淀粉組(P0.05),而中淀粉組與低淀粉組差異不顯著,增重率和特定生長率隨日糧淀粉水平的提高而呈下降趨勢;高淀粉組和中淀粉組都顯著(P0.05)提高了吉富羅非魚臟體比和肥滿度,臟體比和肥滿度均表現(xiàn)出隨著日糧淀粉水平的增加而提高的趨勢。2.日糧不同水平淀粉對吉富羅非魚全魚的水分、粗蛋白、灰分沒有顯著影響,但是高淀粉組的粗脂肪顯著高于其他兩組(P0.05)。3.高淀粉組谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿酸濃度顯著高于低淀粉組(P0.05),高淀粉組的超氧化物歧化酶、溶菌酶濃度顯著低于低淀粉組(P0.05),而中淀粉組與低淀粉組的血清生化及免疫指標差異不顯著(P0.05)。4.高淀粉組和中淀粉組肝糖原、肌糖原含量均顯著高于低淀粉組(P0.05),無論日糧淀粉水平高低,肝糖原的含量總是高于肌糖原的含量;高淀粉組和中淀粉組血糖濃度均顯著高于低淀粉組(P0.05);不同淀粉水平?jīng)]有顯著影響胰島素濃度。5.肌肉中,中、高淀粉組的酪氨酸激酶(TKA)濃度顯著高于低淀粉組(P0.05),而肝臟中不同淀粉組的酪氨酸激酶(TKA)沒有顯著差異。中淀粉日糧提高了肌肉和肝臟中胰島素受體(IR-1)基因mRNA的表達,高淀粉日糧則降低了肝臟和肌肉中胰島素受體(IR-1)基因mRNA的表達,但是差異不顯著。研究結果表明,日糧添加一定水平的淀粉,沒有影響吉富羅非魚的生長,反而提高了肌肉和肝臟中胰島素受體(IR-1)基因mRNA的表達,增加了肌肉組織中酪氨酸激酶濃度,從而提高了吉富羅非魚對日糧碳水化合物的利用。但是高淀粉日糧抑制了吉富羅非魚的生長和免疫功能,降低了肝臟和肌肉組織中胰島素受體(IR-1)的基因表達,增加了肌肉組織中酪氨酸激酶濃度。高淀粉日糧對吉富羅非魚糖代謝關鍵酶及相關基因的表達產(chǎn)生了影響。
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4
【圖文】：

細胞膜的胰島素受體（insulin receptor，IR）的 α 亞基結合，解除 α 亞基對 亞基的抑制作用，使 亞基的酪氨酸蛋白激酶（protein tyrosine kinase，PTK）活化；胰島素受體底物(insulin recept-or substrate，IRS)被 PTK 磷酸化而激活，進一步引導 IR 本身磷酸化和幾種底物蛋白磷酸化；IRS 是一種船塢蛋白（docking protein），結合含肉瘤同源區(qū)段 2（Src ho-mology 2 domain,，SH2）結構域的信號分子，從而激活多種下游信號通路引發(fā)磷酸酶和蛋白激酶的反應，發(fā)揮重要功能。胰島素受體（insulin receptor，IR）是一種跨膜糖蛋白，在胰島素結合到靶細胞的過程中發(fā)揮重要作用。魚類的 IR 受相關生理調節(jié)，其分子結構相似于哺乳動物（Navarret al.，2001）。胰島素受體是一種跨膜的糖蛋白，其變構酶性質顯著，由 2 個在細胞質膜外的 α 亞基和 2 個跨膜的 亞基組成，兩種亞基通過 S-S 鍵連接。在多數(shù)魚類中胰島素受體只有 2 種亞型（Caruso and Sheridan，2011），而虹鱒的胰島素受體卻有 4 種 IR亞型（IR1、IR2、IR3 和 IR4）（Caruso et al.，2010）。

高淀粉日糧對吉富羅非魚生長、胰島素受體及酪氨酸激酶活性的影響按照 SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)試劑盒說明進行調整為 25ul 反應系，qRT-PCR 最佳反應條件為：95℃，30s，預變性；95℃變性 5s，60℃，30s 退火進行 40 個循環(huán)。2.2.9.3 熒光定量 PCR 引物特異性驗證以新提取的吉富羅非魚肝臟樣品和新提取的吉富羅非魚肌肉樣品反轉錄后進行合，以此為模板進行驗證。JN967750（IR-1）引物驗證結果：

圖 2：IR-1 擴增曲線Fig 2 Ampliation curve of IR-12.2.9.4 各個基因標準曲線的建立以各組肝臟和肌肉提取的 Total RNA（1000ng）反轉錄獲得的 cDNA 作為標準品，用 EASY Dilution 按 5 倍梯度稀釋作為模板，制作 AB037865（β-action）和 JN967750（IR-1）基因的標準曲線。

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 羅智;卓梅琴;;魚類胰島素、胰島素受體和胰島素受體底物的生物學特性及其對營養(yǎng)物質代謝的調控[J];水產(chǎn)學報;2018年01期

2 馬紅娜;王猛強;陸游;袁野;孫蓬;周歧存;;碳水化合物種類和水平對大黃魚生長性能、血清生化指標、肝臟糖代謝相關酶活性及肝糖原含量的影響[J];動物營養(yǎng)學報;2017年03期

3 邢淑娟;張文兵;;魚類糖營養(yǎng)生理的研究進展[J];河北漁業(yè);2015年08期

4 竇兵帥;梁萌青;鄭珂珂;陳壯;王新星;;飼料中碳水化合物水平對鱸魚生長、生理狀態(tài)參數(shù)及體組成的影響[J];漁業(yè)科學進展;2014年01期

5 吳凡;文華;蔣明;劉偉;劉波;田娟;楊長庚;;飼料碳水化合物水平對吉富羅非魚幼魚生長性能和血液主要生化指標的影響[J];西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版);2012年12期

6 繆凌鴻;劉波;戈賢平;謝駿;周傳鵬;潘良坤;陳汝麗;周群蘭;;高碳水化合物水平日糧對異育銀鯽生長、生理、免疫和肝臟超微結構的影響[J];水產(chǎn)學報;2011年02期

7 郭恩彥;郭忠寶;羅永巨;;吉富羅非魚最適生長水溫研究[J];廣東海洋大學學報;2011年01期

8 繆凌鴻;劉波;何杰;謝駿;戈賢平;徐跑;陳汝麗;梁政遠;;吉富羅非魚肌肉營養(yǎng)成分分析與品質評價[J];上海海洋大學學報;2010年05期

9 莫振明;林東年;;吉富羅非魚與奧尼羅非魚養(yǎng)殖對比試驗報告[J];現(xiàn)代漁業(yè)信息;2010年08期

10 羅毅平;謝小軍;;魚類利用碳水化合物的研究進展[J];中國水產(chǎn)科學;2010年02期

相關會議論文 前1條

1 吳建開;曹俊明;梁海鷗;譚永剛;朱旺明;周萌;藍漢兵;馬利;;飼料中碳水化合物水平對軍曹魚幼魚生長、血清生化指標和肝臟糖代謝酶的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物營養(yǎng)學分會——第九屆學術研討會論文集[C];2004年

相關博士學位論文 前1條

1 周傳朋;不同水平碳水化合物日糧對團頭魴的生長、免疫及相關糖代謝酶的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2012年

相關碩士學位論文 前3條

1 劉含亮;注射葡萄糖對羅非魚糖代謝、胰島素受體和GLUT4基因表達的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2012年

2 周華;飼料碳水化合物水平對溼幼魚生長、體成分及糖代謝酶活性的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2011年

3 王廣宇;日糧碳水化合物水平對翹嘴紅湆生長、血液指標及GK、G6Pase、HSC70基因表達的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2009年

本文編號：2770324