【摘要】：本論文以紅螯光殼螯蝦(Cherax quadricarinatus)為研究對象,綜合了營養(yǎng)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等學(xué)科的方法,輔以電鏡技術(shù)等,較為詳細(xì)地研究了維生素C對紅螯光殼螯蝦生長發(fā)育的影響,具體研究結(jié)果如下：1.飼料中不同維生素C水平對紅螯光殼螯蝦生長及相關(guān)酶活性的影響維生素C在促進(jìn)水生生動物生長發(fā)育過程中具有重要的作用。為探究維生素C對紅螯光殼螯蝦生長的影響,進(jìn)行了為期8周的養(yǎng)殖試驗(yàn),試驗(yàn)設(shè)置了7個(gè)維生素C添加組,分別添加0、100、200、400、800、1600、3200mg/kg的維生素C。結(jié)果表明,不同含量的維生素C對紅螯光殼螯蝦的存活率和肝體指數(shù)無顯著影響,而適量的維生素C對紅螯光殼螯蝦的增重率具有一定的促進(jìn)作用,但維生素C的添加量過高也會對其生長產(chǎn)生一定的抑制作用；紅螯螯蝦肝胰腺中維生素C的積累量與飼料中維生素C的添加量呈正相關(guān),但當(dāng)飼料中維生素C的添加量超過400mg/kg時(shí),肝胰腺中維生素C的積累量趨于飽和。維生素C顯著提高了螯蝦肝胰腺、胃和腸中胰蛋白酶活性,對淀粉酶活性無顯著影響,同時(shí)能顯著提高肝胰腺中酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活性,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明維生素C對紅螯光殼螯蝦的生長具有促進(jìn)作用。2.飼料中不同維生素C水平對紅螯光殼螯蝦肝胰腺超微結(jié)構(gòu)的影響分別取維生素C添加量的低濃度組(Vc添加量為Omg/kg).中濃度組(Vc添加量為400mg/kg)和高濃度組(Vc添加量為3200mg/kg)的紅螯光殼螯蝦肝胰腺進(jìn)行電鏡切片觀察,結(jié)果表明,低濃度組中蝦的肝胰腺結(jié)構(gòu)有輕微的損傷,微絨毛排列不整齊,有部分脫落變形現(xiàn)象,部分細(xì)胞核出現(xiàn)了異染色質(zhì)化,脂滴積累較少；低濃度和高濃度組中蝦肝胰腺結(jié)構(gòu)完整,但中濃度組脂滴的積累量比高濃度組略高,且質(zhì)地更加均勻。以上結(jié)果表明,維生素c的缺乏會影響紅螯光殼螯蝦肝胰腺結(jié)構(gòu)的完整性,進(jìn)而影響肝胰腺中營養(yǎng)物質(zhì)的積累和代謝,然而,維生素c的添加量過高可能也會對紅螯光殼螯蝦營養(yǎng)物質(zhì)的積累產(chǎn)生一定的抑制作用。3.紅螯光殼螯蝦組織蛋白酶L基因的克隆及維生素C對其表達(dá)影響的研究以紅螯光殼螯蝦肝胰腺cDNA為模板,克隆得到紅螯光殼螯蝦組織蛋白酶L基因全長序列,該該基因全長1810 bp,開放閱讀框長度為1026 bp,編碼341個(gè)氨基酸殘基。組織熒光定量PCR結(jié)果顯示,CqCatL基因在紅螯光殼螯蝦的多個(gè)組織中均有表達(dá),其中肝胰腺中表達(dá)量最高,其次為血細(xì)胞,在腸及觸角腺中也有一定量的表達(dá)。在基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的維生素C后,CqCatL基因的表達(dá)量也存在明顯差異,其中維生素C的添加量為400 mg/kg的組別中該基因的表達(dá)量最高,表明組織蛋白酶L基因在紅螯光殼螯蝦的生長發(fā)育過程中有重要的作用,且其表達(dá)量受維生素C的影響。4.紅螯光殼螯蝦RXR基因和EcR基因的克隆及維生素C對其表達(dá)影響的研究以紅螯光殼螯蝦肝胰腺cDNA為模板,克隆得到紅螯光殼螯蝦蛻皮相關(guān)基因RXR基因全長序列和EcR基因部分序列,其中RXR基因全長1341bp,開放閱讀框長度為1299bp,編碼432個(gè)氨基酸殘基,EcR片段長1099bp,編碼264個(gè)氨基酸殘基。組織熒光定量PCR結(jié)果顯示,這兩條基因在紅螯光殼螯蝦各個(gè)組織中都有表達(dá),表明其在紅螯光殼螯蝦的生長發(fā)育過程中具有一定的作用。在不同維生素C添加組中,這兩條基因的表達(dá)量與實(shí)驗(yàn)組1相比均有所提高,表明維生素C對這兩條基因的表達(dá)具有一定的促進(jìn)作用,具體的調(diào)控機(jī)制尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S917.4
【圖文】：

逑４００ｍｇ／ｋｇ時(shí)，肝膜腺中維生素Ｃ的積累量不再隨著維生素Ｃ的添加量的增加而逡逑增加（圖２．１）。逡逑９０邋－逡逑ｉｌｌ：逡逑ｌ｜Ｈ逡逑}0！胡－逡逑p哄澹懾澹矗板澹叔義現(xiàn)緬澹斟澹常板澹義希裕藻澹緬義锨桑佩義锨燒跡玻板澹義嫌桑懼義希保板澹義希板澹掊五五五義希卞危插危沖危村危靛危跺危峰義喜粚澖恚梅猶瑰義希模椋澹簦幔潁澹粒螅悖錚潁猓脲澹粒悖椋溴義賢跡玻焙靺莨飪莯r奸巧膜腺中維生素Ｃ含量變化逡逑Ｆｉｇ邋２．１邋Ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｏｆ邋Ａｓｃｏｒｂｉｃ邋Ａｃｉｄ邋ｉｎ邋化邋ｅ邋ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓ邋ｏｆ邋Ｃ．ｇｗ心Ｗｃ（３／７＞７幻逡逑３．３紅整光殼呡巧肝膜腺、胃、腸栄化酶活性檢測逡逑３．３．１膜蛋白酶活性逡逑義逡逑各飼料組紅整光殼蟹幰肝膀腺、胃和腸的膀蛋白酶活性如圖２．２所示。肝膜逡逑腺中膜蛋白酶活性隨著飼料中維生素Ｃ添加量的增加而呈先升高后降低的趨勢，逡逑當(dāng)維生素Ｃ的添加量為４００邋ｍｇ／ｋｇ時(shí)，肝膜腺中膜蛋白酶活性最高，與實(shí)驗(yàn)組３逡逑差異不顯著，顯著高于１、２、５、６、７組（Ｐ＜０．０５）。胃組織中膜蛋白酶活性也逡逑呈先升高后降低的趨勢，其中實(shí)驗(yàn)組５中膜蛋白酶活性最高，其余各組間膜蛋白逡逑酶活性差異不顯著，但均高于實(shí)驗(yàn)組１。腸組織中除了實(shí)驗(yàn)組７外，其余各組中逡逑膜蛋白酶的活性均高于未添加維生素Ｃ的實(shí)驗(yàn)組１，其中４、５、６沮膀蛋白酶活逡逑性顯著高于實(shí)驗(yàn)組１邋（Ｐ＜０．０５）

３．４．１酸怯x鎪崦富钚藻義喜煌櫓淥嶁詀愃崦傅幕钚圓鉅煜災(zāi)�，其中肝膜腺峙d嶁詘鎪崦傅幕钚宰鑠義細(xì)擼搴圖∪庵興嶁詚1酸酶活性較低（圖２．４）。肝膀腺中酸性a愃崦傅幕钚運(yùn)駑義獻(xiàn)盼兀玫奶砑恿康腦黽傭噬仙魘�，血清簣D∪庾櫓興嶁詀愃崦富钚藻義細(xì)髯榧洳鉅觳幌災(zāi)ǎ校荊埃埃擔(dān)�。辶x希�？。１逦ｄ辶x希煞粒危卞義希徨澹懾澹懾澹懾澹懾澹海蟈義嫌皴澹插危沖危村危靛危靛危峰義喜煌繕螅梅ɑ義希模椋澹簦幔潁危粒洌溴義賢跡玻床煌兀錳砑幼樗嶁緣崦富盍﹀義希疲椋玨澹玻村澹粒悖簦椋觶椋簦椋澹簀澹錚駑澹粒茫繡澹椋鑠澹洌椋媯媯澹潁澹睿翦澹觶椋簦幔恚椋鑠澹緬澹歟澹觶澹戾澹錚駑澹茫澹瘢酰幔洌潁椋悖幔潁椋釗紓酰簀義希常矗布钚詘鎪崦富钚藻義細(xì)文は僦屑钚詘鎪崦富钚猿哉兆橥獠鉅煬幌災(zāi)ㄍ跡玻擔(dān)Ｑ逯屑钚詚1逡逑酸酶活性呈現(xiàn)了先升高后降低趨勢，肌肉組織中各組間的差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。逡逑各個(gè)組織中堿性x鎪崦傅幕钚員浠焊偉螄伲狙澹炯∪�。辶x希保瑰義

本文編號：2753766