【摘要】：三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)、中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)、中國(guó)對(duì)蝦(Penaeus orientalis)和克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)都是我國(guó)主要的經(jīng)濟(jì)蝦蟹類,年齡鑒定是其漁業(yè)資源和漁業(yè)管理研究的基礎(chǔ)。但是,目前還沒(méi)有精確有效的甲殼類鑒齡方法,使用硬組織研究甲殼類的年齡和生長(zhǎng)在我國(guó)屬空白,國(guó)外以往的研究中,大多數(shù)也只針對(duì)甲殼類眼柄生長(zhǎng)紋寬帶和其年齡的關(guān)系,沒(méi)有確定最適合的眼柄和胃磨預(yù)處理和研磨方法。因此,本文對(duì)比了不同的預(yù)處理和研磨方法來(lái)選擇最佳方法。并且分別檢測(cè)了三疣梭子蟹、中華絨螯蟹、中國(guó)對(duì)蝦和克氏原螯蝦四種蝦蟹類的眼柄微結(jié)構(gòu)特征,并結(jié)合四者生長(zhǎng)規(guī)律,使用硬組織分析法研究這幾種經(jīng)濟(jì)蝦蟹類甲長(zhǎng)甲寬體重與紋數(shù)的對(duì)應(yīng)關(guān)系。此外,本文還初步對(duì)生長(zhǎng)紋進(jìn)行周期性驗(yàn)證,提出相應(yīng)假設(shè),為以后的研究提供可用的方法和奠定基礎(chǔ),在甲殼類的年齡鑒定方面也為以后的研究者提供一些思路和借鑒。本研究對(duì)148只三疣梭子蟹、42只中華絨螯蟹、69只中國(guó)對(duì)蝦和180只克氏原螯蝦樣本的眼柄進(jìn)行了研磨,觀察了四種蝦蟹類的眼柄微結(jié)構(gòu),初步研究了眼柄生長(zhǎng)紋與其基礎(chǔ)生物學(xué)特征的關(guān)系。研究主要結(jié)論如下:(1)在選擇研磨眼柄的方法時(shí),根據(jù)研究的甲殼類種類和想要得到的效果,選擇最適的研究方法。在清洗蟹類眼柄之前,不適宜對(duì)其進(jìn)行煮沸的預(yù)處理。研磨甲殼比較硬的物種眼柄時(shí),將眼柄內(nèi)部處理干凈后可以直接立在包埋盒里,但是對(duì)于甲殼比較軟的物種眼柄時(shí),應(yīng)該先將眼柄剪開(kāi),小心剔除附著在眼柄上的有機(jī)物,并且在研磨時(shí),應(yīng)更加謹(jǐn)慎小心。就三疣梭子蟹眼柄的研磨來(lái)說(shuō),橫磨更容易觀察生長(zhǎng)紋細(xì)紋,豎磨更容易觀察生長(zhǎng)紋寬帶。(2)三疣梭子蟹、中華絨螯蟹、中國(guó)對(duì)蝦和克氏原螯蝦的眼柄都分為4層:表層、色素層、鈣化層和膜層。三疣梭子蟹、三疣梭子蟹、中華絨螯蟹和中國(guó)對(duì)蝦鈣化區(qū)邊緣部分生長(zhǎng)紋間距小,而鈣化區(qū)中央部分生長(zhǎng)紋間距大,但是克氏原螯蝦的眼柄生長(zhǎng)紋從色素層與鈣化層的交界處到鈣化層與膜層的交界處呈現(xiàn)出由寬到窄的變化趨勢(shì)。4種蝦蟹類的眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋間距的大小排序?yàn)?克氏原螯蝦中華絨螯蟹三疣梭子蟹中國(guó)對(duì)蝦,細(xì)紋間距的變化和大小都跟該物種的生長(zhǎng)速度的變化和大小正相關(guān)。(3)本研究中,三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的甲長(zhǎng)與甲寬呈線性關(guān)系,關(guān)系式為:雄性三疣梭子蟹:LCW=2.069×LCL+2.004(R_2=0.945)雌性三疣梭子蟹:LCW=1.988×LCL+2.121(R_2=0.961)中華絨螯蟹:LCW=1.147×LCL-1.167(R_2=0.998)三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的體重都隨著其甲長(zhǎng)和甲寬的增加而增加,甲寬與體重呈冪函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式分別為:雄性三疣梭子蟹:W=0.00003×LCW~(3.14991)(R_2=0.875)雌性三疣梭子蟹:W=0.00003×LCW~(3.08819)(R_2=0.978)中華絨螯蟹:W=0.0006×LCW~(2.947)(R_2=0.9839)中國(guó)對(duì)蝦和克氏原螯蝦的體長(zhǎng)與體重均呈冪函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:中國(guó)對(duì)蝦:W=0.00002×L~(2.718)(R_2=0.866)克氏原螯蝦:W=6×10-11×L~(5.792)(R_2=0.820)(4)生長(zhǎng)紋與甲長(zhǎng)關(guān)系根據(jù)最小AIC法則,雄性三疣梭子蟹眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與甲長(zhǎng)呈對(duì)數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=27.812×LN(t)-59.431(R_2=0.591);眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與甲寬呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCW=108.459/1+e-0.130×(t-23.341)(R_2=0.634);眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋個(gè)數(shù)與體重的關(guān)系呈對(duì)數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=72.345×LN(t)-219.994(R_2=0.583)。雌性三疣梭子蟹生長(zhǎng)紋細(xì)紋個(gè)數(shù)與甲長(zhǎng)的關(guān)系呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=28.561×e-0.0515(t-23.856)(R_2=0.781);眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋個(gè)數(shù)與甲寬呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCW=58.296×e-0.0493(t-23.693)(R_2=0.778);眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋個(gè)數(shù)與體重的關(guān)系呈對(duì)數(shù)函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=155.137×LN(t)-503.955(R_2=0.711)。三疣梭子蟹生長(zhǎng)紋寬帶數(shù)目與退殼次數(shù)呈線性相關(guān)關(guān)系,關(guān)系式為:M=1.055s-0.812(R_2=0.610)。中華絨螯蟹眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與甲長(zhǎng)、甲寬的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:LCL=61.53/1+e-0.066×(t-42.59)(R_2=0.969)、LCW=70.01/1+e-0.063×(t-44.49)(R_2=0.971),眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與體重呈Gompertz函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:W=55.14×e-0.080(t-47.89)(R_2=0.895)。中國(guó)對(duì)蝦眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與體長(zhǎng)和體重的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:L=333.84/1+e-0.04(t-39.46)(R_2=0.747)、W=92.74/1+e-0.09(t-58.11)(R_2=0.623)�？耸显r眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與體長(zhǎng)和體重的關(guān)系均呈Logistic函數(shù)關(guān)系,關(guān)系式為:L=96.66/1+e-0.25(t-2.54)(R_2=0.461)、W=22.48/1+e-0.41(t-11.78)(R_2=0.454)。三疣梭子蟹和中華絨螯蟹細(xì)紋個(gè)數(shù)與其甲長(zhǎng)、甲寬和體重生長(zhǎng)關(guān)系都是前期快,后期慢,符合其生長(zhǎng)規(guī)律,細(xì)紋個(gè)數(shù)增長(zhǎng)速度與三疣梭子蟹和中華絨螯蟹的生長(zhǎng)速率一致,隨著時(shí)間的增長(zhǎng)而逐漸變慢,三疣梭子蟹的寬帶個(gè)數(shù)與其退殼次數(shù)一致。中國(guó)對(duì)蝦和克氏原螯蝦眼柄生長(zhǎng)紋細(xì)紋與體長(zhǎng)和體重的關(guān)系變化情況和其生長(zhǎng)速率的變化情況一致,中國(guó)對(duì)蝦眼柄寬紋數(shù)目與其年齡相關(guān),即1齡對(duì)應(yīng)1個(gè)寬帶,1個(gè)細(xì)紋的形成則需要9.9~14.6(12.3±1.5)天,在克氏原螯蝦眼柄內(nèi)部暫時(shí)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)寬帶。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S917.4
【圖文】：

圖 1-1 (a)三疣梭子蟹眼柄 的生長(zhǎng)紋；(b) 華絨螯蟹眼柄 的生長(zhǎng)紋；(c眼柄 的生長(zhǎng)紋Fig.1-1 The growth bands of eyestalk of (a) Portunus trituberculatus，(b) Eriocheir(c) Penaeus orientalis表 1-1 甲 類年齡鑒定方法

蝦眼柄質(zhì)地較為柔軟，不便于下一步固定，因此將其沿縱軸線剪開(kāi)后再去除有機(jī)物，然后置于 75%酒精的離心管中保存。三疣梭子蟹、中華絨螯蟹和克氏原螯蝦眼柄的眼柄基部按圖 1 剪平，垂直放模具中（三疣梭子蟹樣本選擇要磨的平面，橫磨圖 2-2 或者豎磨圖 2-3），倒好的冷埋樹(shù)脂溶液（壓克力粉和液體固化劑按體積比 1：1.5）包埋（圖 2-2-B3-B）。由于中國(guó)對(duì)蝦眼柄較軟，無(wú)法豎直放置，故將眼柄剪開(kāi)后，平放于模圖 2-4-B）。包埋好的樹(shù)脂模具放在陰涼通風(fēng)處 24h 待其硬化（圖 2-2-C、、圖 2-4-C），硬化后將包有眼柄的模具依次用 120、240、600、1200、2400 目的水磨砂紙打磨（圖 2-2-D、圖 2-3-D、圖 2-4-D），打磨過(guò)程中不斷在下檢查，直到打磨到需要的平面，將經(jīng)打磨的樹(shù)脂薄片拋光研磨面（圖 2-2-E3-E、圖 2-4-E）。然后將拋光過(guò)的截面朝下，用熱熔膠粘在載玻片上（圖 2-2-F3-F、圖 2-4-F），使用同樣的方法對(duì)另一面進(jìn)行打磨（圖 2-2-G、圖 2-3-G、），直至在顯微鏡下模具截面的生長(zhǎng)紋清晰可見(jiàn)（圖 2-2-H、圖 2-3-H、圖 2-4-H光得到眼柄切片（圖 2-2-I、圖 2-3-I、圖 2-4-I）。最后用密封袋將其密封保存觀察眼柄之用。

圖 2-2 三疣梭子蟹眼柄 磨切片 作示意圖tic of eyestalk cross section slices production of Portunus trid; C: Harden; D: Grind; E: Polish; F: Fix; G: Rough grindingI: Polish

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2749704