【摘要】：呋喃丹是一種高毒的氨基甲酸酯類農(nóng)藥,能夠引起大鼠附睪、精囊、前列腺等器官重量降低,蚯蚓幼蟲孵化數(shù)減少、精子畸形、受精能力喪失等一系列生殖損傷。為了確定呋喃丹對魚類的生殖內分泌干擾效應,本文選用斑馬魚作為實驗動物,檢測了肝臟卵黃原蛋白(Vitellogenin, VTG)、整魚性激素17β-雌二醇(17β-estradiol, E2)、睪酮(testosterone, T)含量、VTG基因、性腺芳香化酶基因CYP19ala及雌激素受體(estrogen receptors、雄激素受體(androgen receptor,AR)基因表達水平等多個指標,探討了呋喃丹對雌性和雄性斑馬魚的生殖內分泌干擾效應及機制。本文研究結果表明：(1)0.1、1.0、10.0、100.0μg/L呋喃丹暴露雄性斑馬魚21天后,采用雙抗夾心ELISA法(Enzyme linked immunosorbent assay--sandwich technique)檢測肝臟VTG含量,放射免疫分析法(Radioimmunoassay, RIA)檢測了整魚性激素含量,實時定量RT-PCR方法檢測了肝臟VTG、性腺芳香化酶基因CYP19a1a、肝臟和性腺雌激素受體基因基因表達水平。結果表明：0.1μg/L處理組VTG含量上升,所有呋喃丹處理組肝臟VTG基因表達量均升高；1.0、10.0、100.0 μg/L處理組E2含量顯著上升,T含量顯著下降；而各處理組性腺CYP19a1a基因表達量較對照組均無顯著性變化；所有處理組肝臟ERβ2及性腺ERa、ERβ1、ERβ2的表達水平顯著上調。表明呋喃丹可升高雄魚E2含量,上調雌激素受體ERs基因的表達,從而誘導雄性斑馬魚產(chǎn)生VTG,發(fā)揮雌激素效應。而雄魚E2含量顯著升高和T含量顯著降低并不是由于呋喃丹影響CYP19ala基因表達所致。呋喃丹暴露對性成熟雄性斑馬魚的性腺指數(shù)(gonadosomatic index, GSI)無顯著性影響。(2)0.1、1.0、10.0、100.0 μg/L呋喃丹暴露雌性斑馬魚21天后,采用RIA檢測了整魚性激素含量,實時定量RT-PCR方法檢測了性腺芳香化酶基因CYP19ala、肝臟雌激素受體基因、性腺雄激素受體AR及肝臟VTG基因表達水平,雙抗夾心ELISA法檢測肝臟VTG含量。所得結果與雄性斑馬魚存在差異：在雌魚體內,E2和T含量均顯著降低,表明呋喃丹在雌性斑馬魚體內不僅不能表現(xiàn)雌激素效應,反而表現(xiàn)出潛在的抗雌激素效應：但是各處理組性腺CYP19ala和肝臟ERs基因表達量較對照組均無顯著性變化；而雌性斑馬魚性腺AR基因表達水平卻顯著上調。因此呋喃丹對雌性斑馬魚潛在的抗雌激素效應尚需深入的研究。此外,1.0、10.0、100.0μg/L處理組VTG含量顯著降低,而最低濃度肝臟VTG基因的表達量升高,其他處理組外無顯著性變化。呋喃丹暴露對性成熟雌性斑馬魚的GSI也無顯著性影響。綜上所述,本文研究顯示呋喃丹對雄性斑馬魚具有類雌激素效應,而對雌性斑馬魚具有潛在的抗雌激素效應,其生殖內分泌干擾效應在成熟的雌雄斑馬魚間存在明顯的性別差異。
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：X592;S917.4

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 豆長明;王曉輝;謝賢政;周鳴鳴;張潔;;鉛對斑馬魚生殖系統(tǒng)毒性作用研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2012年29期

2 邵潘柱;林金杏;胡建華;;斑馬魚實驗室繁育方法研究進展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2013年14期

3 李潔斐,李衛(wèi)華,金泰^

本文編號：2731949