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刺參神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對運動和應(yīng)激行為調(diào)控的分子機(jī)制

發(fā)布時間:2020-06-25 07:17
【摘要】:刺參(Apostichopus japonicus)是我國重要的海洋經(jīng)濟(jì)物種,在我國北方海水養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中刺參養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的單一產(chǎn)值最大。刺參行為學(xué)研究可為刺參采捕設(shè)施的研發(fā)和增殖放流策略的制定提供參考,為刺參工廠化養(yǎng)殖、池塘養(yǎng)殖等增養(yǎng)殖模式創(chuàng)新提供參數(shù)支撐。行為內(nèi)分泌學(xué)是行為學(xué)研究的一個重要分支,主要探究動物激素和行為之間的相互影響。本研究以褪黑激素和兩種代表性神經(jīng)肽為例,綜合運用紅外攝影技術(shù)、運動行為量化軟件、代謝組學(xué)技術(shù),系統(tǒng)探究了褪黑激素和兩種神經(jīng)肽對刺參運動行為的調(diào)控作用和行為變化的內(nèi)在生理機(jī)制。此外,本研究還運用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)查明了刺參應(yīng)激行為—吐腸行為的內(nèi)在分子機(jī)制。1.褪黑激素對刺參運動行為的調(diào)控及內(nèi)在機(jī)制研究檢測了褪黑激素在刺參體腔液中的含量,并采用體腔注射的方法研究了褪黑激素對刺參運動行為的影響。此外,使用超高效液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(UPLCQ-TOF-MS)檢測了褪黑激素對刺參肌肉組織代謝活動的影響。研究結(jié)果表明褪黑激素在刺參體腔液中的濃度為135.0 ng/L左右,隨著注射褪黑激素濃度的增加,注射后9小時內(nèi)刺參運動的總距離和步數(shù)逐漸減少,且部分處理組差異顯著,而平均和最大運動速度及步幅和步幅頻率均有所下降,但無顯著差異。因此褪黑激素對刺參具有鎮(zhèn)靜作用。在褪黑激素處理組刺參肌肉組織中檢測到22種代謝物的濃度發(fā)生改變,其中5-羥色胺、9-順式視黃酸、全反式視黃酸、黃素單核苷酸濃度明顯下降。此外,處理組肌肉組織中游離脂肪酸(FFA)和腺苷5'-三磷酸(ATP)的濃度均降低。因此,褪黑激素抑制刺參運動行為的潛在生理機(jī)制包括運動調(diào)節(jié)劑—血清素濃度下降、降低脂肪酸氧化和氧化磷酸化過程。2.Pedal神經(jīng)多肽對刺參運動行為的調(diào)控及內(nèi)在機(jī)制研究采用體腔注射后記錄刺參運動行為變化的方法研究Pedal神經(jīng)多肽對刺參運動行為的影響,同時基于UPL-Q-TOF-MS代謝組學(xué)檢測技術(shù)研究Pedal神經(jīng)肽注射后刺參肌肉代謝物的變化情況。結(jié)果表明Pedal神經(jīng)肽注射后刺參的步幅有所降低,表明該神經(jīng)肽很可能參與調(diào)節(jié)刺參肌肉的收縮。此外,運動路程、步數(shù)的增加和運動速度的降低表明Pedal神經(jīng)肽可增強(qiáng)刺參的運動耐力而降低其運動效率。肌肉代謝組學(xué)結(jié)果表明,磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰膽堿(PC)的下調(diào)、LysoPCs和LysoPEs的升高以及花生四烯酸(ARA)濃度的升高是Pedal神經(jīng)肽對刺參運動行為產(chǎn)生這些影響的潛在生理機(jī)制。3.SALMFamide神經(jīng)多肽對刺參運動行為的調(diào)控及內(nèi)在機(jī)制研究體外合成刺參L型SALMFamide神經(jīng)肽后,采用體腔注射的方法研究了SALMFamide神經(jīng)肽對刺參運動行為的調(diào)控作用,并采用代謝組學(xué)技術(shù)檢測了該神經(jīng)肽注射后刺參肌肉生理的變化情況。實驗結(jié)果表明SALMFamide神經(jīng)肽使刺參運動步幅有一定提升,表明該神經(jīng)肽可能參與刺參體壁肌肉松弛的調(diào)節(jié)。此外,運動路程、步數(shù)、時間和運動速度均增大表明SALMFamide神經(jīng)肽不僅增強(qiáng)了刺參的運動耐力,而且提升了刺參的運動效率。代謝組學(xué)結(jié)果表明刺參肌肉泛酸含量的升高、磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰膽堿(PC)比例的變化、溶血磷脂酰乙醇胺(LysoPEs)和花生四烯酸(ARA)濃度的升高是SALMFamide神經(jīng)肽調(diào)控刺參運動行為的潛在生理機(jī)制。4.刺參吐腸行為內(nèi)在分子機(jī)制研究為探究刺參應(yīng)激行為—吐腸行為的分子機(jī)制,本研究采用Illumina(RNASeq)測序平臺同時測試了刺參三種狀態(tài)下的樣品:正常(TCQ)、去除內(nèi)臟時(TCZ)和去除內(nèi)臟后3小時(TCH)。測試結(jié)果表明總共產(chǎn)生129,905個unigenes,N50長度為2651個堿基對,54787個unigenes可從7個功能數(shù)據(jù)庫(KEGG,KOG,GO,NR,NT,Interpro和Swiss-Prot)得到注釋。此外,在TCQ與TCZ、TCZ與TCH和TCQ與TCH的比較中,分別鑒定出190、191和320個發(fā)生差異表達(dá)基因(DEG)。這些DEG可映射到KEGG數(shù)據(jù)庫中的157、113和190個信號傳導(dǎo)途徑。KEGG分析結(jié)果顯示潛在的DEGs分別屬于“環(huán)境信息處理”、“生物系統(tǒng)”、“新陳代謝”和“細(xì)胞過程”類別。這些DEGs與肌肉收縮、激素和神經(jīng)遞質(zhì)分泌、神經(jīng)和肌肉損傷、能量供應(yīng)、細(xì)胞應(yīng)激和細(xì)胞凋亡有關(guān)。這些相關(guān)的基因和信號通路有助于闡明刺參吐腸行為的內(nèi)在分子機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】:中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院海洋研究所)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S917.4
【圖文】:

仿刺參


最北端可至俄羅斯的薩哈林島(SakhalinIsland)南部沿岸,最南端可達(dá)島縣沿岸,而在我國的最南端分布可至江蘇省連云港市沿岸,中間區(qū)域群島(Kuril Islands)西南部沿岸、日本海沿岸、朝鮮半島沿岸、我國黃沿岸以及日本東部和南部沿岸海域(圖 1.2)(邱天龍,2013;廖玉麟,1;宋希和和柳振東,2005)。

仿刺參,天龍,自然分布,西北太平洋


圖 1.2 仿刺參(A. japonicus)西北太平洋自然分布范圍(邱天龍,2013). 1.2 The natural distribution of sea cucumber (A. japonicus) in the Pacific North野生仿刺參大多棲息于 3 至 10 米左右的水深,最深曾在一百多米水深

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9 杜正江;抗刺參腐皮綜合征特異性卵黃抗體新制劑的研究[D];大連理工大學(xué);2017年

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本文編號:2729035

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