【摘要】：本試驗通過不同濃度的乙醇分級、除蛋白、柱層析等方法制備出金針菇菇腳(Flammulina velutipes stembase)多糖,探討分級的乙醇濃度及純化程度對金針菇菇腳多糖的體外抗氧化活性的影響;同時研究了金針菇菇腳粉(FVS)和金針菇菇腳水提液(FVSE)在七彩鮭(Salvelinus fontinalis)幼魚體內(nèi)的抗氧化作用及對生長、免疫及腸道菌群的影響。試驗選取270尾七彩鮭幼魚(平均體重為13.34±0.08 g),隨機分為3組(CK:對照組;FVS:2%金針菇菇腳粉添加組;FVSE:2%金針菇菇腳提取液添加組),每組3個重復(fù),每個重復(fù)30尾,試驗期81天。試驗結(jié)果如下:1.分級的乙醇濃度對金針菇菇腳多糖抗氧化活性產(chǎn)生影響,在試驗研究范圍內(nèi),低濃度乙醇沉淀物,抗氧化活性弱,隨著乙醇濃度的升高,沉淀物多糖抗氧化活性逐漸增強,終濃度為75%沉淀獲得的多糖在1.0mg/mL時抗氧化活性最強;純化程度也可影響金針菇菇腳多糖抗氧化活性,在試驗研究范圍內(nèi),純化程度低,抗氧化活性強。2.FVS組和FVSE組顯著提高七彩鮭幼魚肝胰臟總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性(P㩳0.05);FVSE組七彩鮭幼魚過氧化氫酶(CAT)活力顯著高于FVS組(P㩳0.05)。FVS組和FVSE組七彩鮭幼魚的終末體重(FBW)、增重(WG)、特定生長率(SGR)及成活率(SR)顯著高于對照組(P㩳0.05);FVS組和FVSE組七彩鮭幼魚的飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)顯著低于對照組(P㩳0.05);FVSE組七彩鮭幼魚的肝體指數(shù)(HIS)顯著高于對照組(P㩳0.05)。金針菇菇腳的添加對七彩鮭幼魚全魚的水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量的影響均不顯著(P㧐0.05)。3.FVS組血清中總蛋白含量(TP)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性顯著高于對照組(P㩳0.05),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性顯著低于對照組(P㩳0.05)。FVSE組血清中總蛋白(TP)含量極顯著提高(P㩳0.01);白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、葡萄糖(GLU)、總膽固醇(CHOL)含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性顯著提高(P㩳0.05),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性顯著降低(P㩳0.05)。FVSE組血清中總蛋白(TP)含量顯著高于FVS組(P㩳0.05)。FVS組七彩鮭幼魚肝胰臟中堿性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性顯著升高(P㩳0.05);FVSE組溶菌酶(LYZ)、堿性磷酸酶(AKP)活性顯著提高(P㩳0.05);酸性磷酸酶(ACP)活性極顯著升高(P㩳0.01)。FVSE組七彩鮭幼魚肝胰臟中酸性磷酸酶(ACP)活性顯著高于FVS組(P㩳0.05)。FVS組和FVSE組均使七彩鮭幼魚肝胰臟中HSP70、HSP90基因mRNA表達量顯著降低(P㩳0.05)。4.七彩鮭幼魚的核心菌群主要包括變形菌門(Proteobacteria)、放線菌門(Actinobacteria)和厚壁菌門(Firmicutes),其中變形菌門(Proteobacteria)豐度最高。金針菇菇腳的添加可提高七彩鮭幼魚腸道菌群的多樣性和豐度,FVS組菌群的多樣性和豐度均顯著提高(P㩳0.05),FVSE組豐度顯著提高(P㩳0.05)。FVS組變形菌門(Proteobacteria)顯著減少(P㩳0.05),放線菌門(Actinobacteria)、藍藻門(Cyanobacteria)、綠彎菌門(Chloroflexi)、疣微菌門(Verrucomicrobia)、Saccharibacteria、衣原體門(Chlamydiae)顯著增加(P㩳0.05);FVSE組衣原體門(Chlamydiae)顯著增加(P㩳0.05)。綜上所述,金針菇菇腳多糖的體外抗氧化活性與分級時乙醇濃度和純化程度均相關(guān),分級時乙醇濃度高、純化程度低,其抗氧化活性強。金針菇菇腳中多糖等成分也可在七彩鮭幼魚體內(nèi)發(fā)揮抗氧化作用,提升抗氧化狀態(tài),提高生長性能和免疫能力,調(diào)節(jié)腸道菌群組成。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S963
【圖文】：

定吸光度（Ai），空白對照組以相同體積的蒸餾水代比，每組樣品溶液進行 3 次平行試驗。清除率計算除率（%）=（(Ao-Ai)/Ao）×100 準空白管的吸光度；Ai 為測定管的吸光度。±標準差（SD）表示。使用 SPSS 23 軟件和 ANOV著差異。及理化性質(zhì)分析的 FVSP-1，經(jīng)除蛋白得 FVSP-2，利用 DEAE-52 離數(shù)量的差異對其進行純化，通過蒸餾水洗脫得到多膠過濾根據(jù)分子分布進一步純化，如圖 2.2 所示，在通過濃縮、凍干，得到 FVSP-3 用于后續(xù)研究。

圖 2.2 Sephadex G-100 色譜柱洗脫圖Fig. 2.2 Elution profile of the Sephadex G-100 column多糖的糖含量和蛋白質(zhì)含量見表 2-2。不同乙醇5、FVSP60 和 FVSP75 中，F(xiàn)VSP60 糖含量最高，SP-2 和 FVSP-3 中，F(xiàn)VSP-3 具有最高的糖含量和最表 2-2 金針菇菇腳多糖的化學(xué)組成Tab. 2-2 The chemical composition of FVSPs.品mples多糖純度Polysaccharide purities (%)蛋ProteSP30 45.17±2.22 4SP45 79.19±1.27 1SP60 81.28±1.25 1SP75 66.82±0.93 1SP-1 60.85±1.05 1SP-2 77.00±0.66 2SP-3 93.80±1.05 0值±標準差表示(n=3)ted as mean ± SD (n=3).

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本文編號：2720896