【摘要】：輪蟲是重要的淡水浮游生物類群,由于其個(gè)體小、生活周期和世代時(shí)間短、生殖速度快,自20世紀(jì)70年代初期開始,輪蟲就被用作毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)受試動(dòng)物。目前,淡水生態(tài)毒理學(xué)方面的研究多集中在使用濾食性種類-萼花臂尾輪蟲(Brachlonus calyclflorus),而關(guān)于利用捕食性的晶囊輪蟲(Asplanchna),如卜氏晶囊輪蟲(Asplanchna brightwelli)作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究生態(tài)毒理效應(yīng)的報(bào)道尚不多見。由于卜氏晶囊輪蟲個(gè)體比萼花臂尾輪蟲大、行動(dòng)緩慢且易計(jì)數(shù),將其作為水環(huán)境監(jiān)測(cè)的指示生物具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。睪丸酮和雌二醇是由脊椎動(dòng)物分泌的類固醇激素,進(jìn)入水體會(huì)對(duì)浮游生物產(chǎn)生內(nèi)分泌干擾,是目前較受關(guān)注的環(huán)境激素。本文以卜氏晶囊輪蟲作為受試動(dòng)物,旨在探討類固醇激素睪丸酮和雌二醇單獨(dú)以及組合作用對(duì)輪蟲生殖的影響,進(jìn)一步研究?jī)煞N激素對(duì)輪蟲體內(nèi)相關(guān)酶活性的影響,從而考察卜氏晶囊輪蟲作為檢測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的可靠性,以期為輪蟲繁殖生物學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)的結(jié)合提供新的思路,為卜氏晶囊輪蟲檢測(cè)水環(huán)境污染提供新的依據(jù)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.睪丸酮和雌二醇急性毒性實(shí)驗(yàn)(LC50)睪丸酮對(duì)卜氏晶囊輪蟲的48h-LC50為9.56 mg/L,直線回歸方程為Y=1.9793X+3.0591(R2=0.92),95%置信區(qū)間為 2.74-33.40 mg/L;雌二醇對(duì)卜氏晶囊輪蟲的48h-LC50為8.18 mg/L,直線回歸方程為Y=3.5292X+1.7788(R2=0.92),95%置信區(qū)間為3.07-21.77 mg/L。結(jié)果顯示,經(jīng)睪丸酮和雌二醇處理后,卜氏晶囊輪蟲出現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,死亡率隨著劑量濃度升高而增加,表明卜氏晶囊輪蟲可以作為評(píng)估兩種藥物毒性效應(yīng)的受試動(dòng)物。2.睪丸酮和雌二醇分別對(duì)卜氏晶囊輪蟲種群參數(shù)的影響溫度為25±1℃光照強(qiáng)度約為4000lx,晝長(zhǎng)比L:D=12:12,分別經(jīng)0.5、1.0、2.0、4.0和8.0mg/L睪丸酮和雌二醇暴露處理后,統(tǒng)計(jì)分析卜氏晶囊輪蟲種群密度、種群增長(zhǎng)率、雄體比例和休眠卵產(chǎn)量等參數(shù),結(jié)果可以得出:兩種激素均對(duì)卜氏晶囊輪蟲繁殖產(chǎn)生顯著影響,且對(duì)輪蟲種群增長(zhǎng)的抑制效果與激素濃度呈正相關(guān),其中第4d,組間差異最為顯著。第4d睪丸酮濃度為4.0和8.0 mg/L時(shí),種群增長(zhǎng)率分別為0.74和0.55,與對(duì)照組相比,顯著下降10.77%和33.58%,差異極其顯著(P0.01)。雌二醇與睪丸酮作用效果相似,第4d雌二醇濃度為1.0、4.0和8.0mg/L時(shí),種群增長(zhǎng)率分別為0.80、0.74和0.61,與對(duì)照組相比,顯著下降12.92%、18.70%和33.53%,差異顯著(P0.05)。隨著兩種激素濃度升高,卜氏晶囊輪蟲雄體和休眠卵受到的抑制效果更明顯,8.0mg/L睪丸酮和雌二醇處理組則完全抑制輪蟲休眠卵的產(chǎn)生。3.睪丸酮和雌二醇分別對(duì)卜氏晶囊輪蟲生殖和壽命的影響隨著睪丸酮濃度升高,卜氏晶囊輪蟲生殖前期延長(zhǎng)、平均壽命縮短、后代個(gè)體數(shù)逐漸減少。與對(duì)照組相比,8.0 mg/L睪丸酮處理組的生殖前期顯著延長(zhǎng)11.71%(P0.05),其他組無顯著性變化(P0.05)。除0.5 mg/L濃度組之外,其余各處理組的平均壽命顯著縮短、后代個(gè)體數(shù)明顯減少(P0.05)。睪丸酮濃度為1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L時(shí),平均壽命分別縮短21.91%、35.61%、35.00%和52.22%;后代個(gè)數(shù)分別減少31.63%、69.22%、60.51%和82.20%,差異顯著(P0.05)。與睪丸酮相似,隨著雌二醇濃度升高,卜氏晶囊輪蟲生殖前期延長(zhǎng)、平均壽命縮短、后代個(gè)體數(shù)逐漸減少。與對(duì)照組相比,4.0和8.0 mg/L雌二醇處理組的生殖前期分別延長(zhǎng)6.74%和7.10%(P0.05)。各處理組的壽命和產(chǎn)生的后代個(gè)體數(shù)分別表現(xiàn)出縮短和減少現(xiàn)象,雌二醇濃度為0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L時(shí),輪蟲平均壽命分別縮短21.49%、27.72%、34.58%、39.09%和49.75%;后代個(gè)數(shù)分別減少 24.44%、38.67%、46.22%、49.44%和 80.33%,差異顯著(P0.05)。4.睪丸酮與雌二醇組合作用對(duì)卜氏晶囊輪蟲種群參數(shù)和生殖的影響組合總濃度為8.0 mg/L,分別以睪丸酮(T)和雌二醇(E)設(shè)置不同組合濃度。結(jié)果發(fā)現(xiàn):睪丸酮和雌二醇組合對(duì)卜氏晶囊輪蟲的種群增長(zhǎng)率有顯著影響,其中第5d,各組間差異最為明顯(F=9.71,df組間=5,d 組內(nèi)=62,P0.001),種群增長(zhǎng)率(r)總體上隨著組合濃度升高呈下降趨勢(shì)。睪丸酮與雌二醇組合對(duì)卜氏晶囊輪蟲生殖前期、平均壽命和后代個(gè)體數(shù)均有顯著影響。與對(duì)照組相比,T0E8、T2E6和T8E0mg/L處理組,生殖前期分別比對(duì)照組顯著延長(zhǎng)34.17%、48.01%和43.57%(P0.05),其他組無顯著性變化(P0.05)。與對(duì)照組相比,各處理組平均壽命和后代個(gè)數(shù)顯著低于對(duì)照組,差異極其顯著(P0.001)。由此可見,在睪丸酮與雌二醇組合中,雌二醇對(duì)卜氏晶囊輪蟲存活和繁殖影響更明顯,兩者表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。5.睪丸酮與雌二醇分別對(duì)卜氏晶囊輪蟲部分酶活影響卜氏晶囊輪蟲暴露于不同濃度睪丸酮和雌二醇24 h后,其體內(nèi)SOD和CAT酶活性均隨著藥物濃度升高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),但各處理組酶活性均高于對(duì)照組。睪丸酮濃度為2.0 mg/L時(shí),輪蟲SOD酶活性最高(P0.05);濃度為1.0 mg/L時(shí),CAT酶活性最高,與對(duì)照組相比,差異顯著(P0.05)。雌二醇濃度為1.0 mg/L時(shí),輪蟲SOD酶活性最高(P0.05);濃度為0.5 mg/L時(shí),CAT酶活性最高,與對(duì)照組相比,差異顯著(P0.05)。 【學(xué)位授予單位】：南京師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S963.214

【圖文】：

重新發(fā)育成為非混交雌體，繼續(xù)進(jìn)入孤雌生殖階段。雄體壽命短，只能存活逡逑２－３ｄ，邋—生不攝食，活動(dòng)能力迅速，與雌體相遇后把精子排入其泄殖腔單巢逡逑類輪蟲的生活史如圖１．１。逡逑７逡逑

２．２結(jié)果與分析逡逑２．２．１睪丸酮對(duì)卜氏晶囊輪蟲的急性毒性實(shí)驗(yàn)逡逑如圖２．１，卜氏晶囊輪蟲在５．０、１０、１５和２０邋ｍｇ／Ｌ邋４個(gè)濃度組的睪丸酮處理逡逑４８邋ｈ后，其死亡率分別為３１．３０％、４３．８０％、７０．８０％和７２．９０％，運(yùn)用概率單位法逡逑求得睪丸酮對(duì)卜氏晶囊輪蟲的４８ｈ邋ＬＣ５0為９．５６邋ｍｇ／Ｌ，直線回歸方程為逡逑Ｆ＝１．９７９３Ｘ＋３．０５９１（／？－，＝０．９２１邋丨），９５％置信區(qū)間為邋２．７４－３３．４０邋ｍｇ／Ｌ。逡逑５８邋１邐ｙ＝邋１．９７９３ｘ邋＋３．０５９１逡逑５．６」邐Ｒ：邋＝邋０．９２１１邐？逡逑５．４－逡逑１邐４．８－邐？逡逑ｉ邋叫逡逑＾邐４．４－逡逑４．２－逡逑４．０邐ｉ邐；邐Ｉ邐！邐！逡逑０．５邐０．７邐０．９邐１．１邐１．３邐１．５逡逑ｌｏｇ（睪丸酮（ｍｇ／ＴＬ））邋ｌｏｇ（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ．’（ｍｇ／Ｌ））逡逑圖２．１睪丸酮濃度對(duì)數(shù)與輪蟲死亡幾率的關(guān)系逡逑Ｆｉｇ．２．１邋Ｔｈｅ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋ｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃ邋ｏｆ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ逡逑ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ逡逑２．２．２雌二醇對(duì)卜氏晶囊輪蟲的急性毒性實(shí)驗(yàn)逡逑如圖２．２，，卜氏晶囊輪蟲在５．０、１０、１５和２０邋ｍｇ／Ｌ邋４個(gè)濃度組的雌二醇中逡逑４８ｈ后

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2711984