【摘要】：由于缺乏獲得性免疫,仿刺參等棘皮動物主要依靠天然免疫進行自身防御,保護宿主免受非己物質如病菌、真菌和異物的侵害。仿刺參免疫系統(tǒng)中,體腔細胞的吞噬作用具有重要意義。而吞噬作用的關鍵就是吞噬過程中所分泌的相關溶酶體酶和活性氧類物質;活性氧在消除非己物質如病菌、真菌和大顆粒物質時發(fā)揮舉足輕重的作用。本文利用化學發(fā)光法,研究了酵母體外誘導仿刺參體腔細胞產生活性氧類物質的過程。實驗確定了仿刺參體腔細胞化學發(fā)光的最優(yōu)反應體系:體腔細胞濃度在106/mL時,酵母終濃度為0.5 mg/mL,魯米諾終濃度為2.5×10-4 mol/L。實驗數(shù)據(jù)顯示,檢測溫度對體腔細胞的影響比較大,理想檢測溫度在17℃左右。刺參注射脂多糖后,體腔細胞體外吞噬酵母時活性氧的產生先升高,在第9h達到峰值,然后降低。本文研究了環(huán)境因子溫度,鹽度和pH對仿刺參體腔細胞吞噬過程中活性氧產生的影響。不同環(huán)境條件處理暫養(yǎng)一周的仿刺參,于不同時間點抽取體腔液,然后用魯米諾化學發(fā)光法檢測仿刺參體腔細胞體外吞噬酵母細胞時活性氧的產生。結果表明與對照組相比(17℃),6℃和26℃水溫中的仿刺參分別從第1 d和第15 d極大地增加了活性氧的產生。鹽度25和鹽度35兩組海參體腔細胞比對照組吞噬過程產生更多的活性氧,而鹽度16和40兩組第1 d時活性氧的產生也顯著增強。較低pH同樣極大增強了吞噬作用中活性氧的產生。結果表明,溫度、鹽度和pH均可影響仿刺參體腔細胞吞噬過程中活性氧的產生。本文為進一步研究仿刺參在適應不同環(huán)境時的生理生化過程及無脊椎動物免疫機制奠定了基礎。水產動物抗菌消炎類藥物已經(jīng)廣泛應用于水產養(yǎng)殖。但由于抗菌藥物的亂用濫用給生態(tài)環(huán)境及人類健康帶來了極大的安全隱患。本實驗設置仿刺參3組,分別連續(xù)3天注射呋喃唑酮、氯霉素和紅霉素,于不同時間抽取仿刺參體腔液,用魯米諾化學發(fā)光法檢測體腔細胞經(jīng)酵母誘導后的化學發(fā)光現(xiàn)象。結果顯示,整個實驗過程中,靜息狀態(tài)下,呋喃唑酮和紅霉素均抑制了體腔細胞活性氧的產生。注射紅霉素組,仿刺參體腔細胞經(jīng)酵母誘導的化學發(fā)光現(xiàn)象均有所增強,且最大值出現(xiàn)在第15天。注射呋喃唑酮后,仿刺參體腔細胞吞噬過程活性氧的產生先增強,隨后在第七天時發(fā)光值低于對照組,第15天時基本恢復到正常水平。整個過程中氯霉素組吞噬過程的活性氧水平除第一天外,均明顯增強。
【學位授予單位】：大連海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S917.4

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本文編號：2706092