【摘要】：青蝦學(xué)名日本沼蝦(Macrobrachium nipponensis)俗稱河蝦,廣泛分布在我國(guó)淡水水域。屬于節(jié)肢動(dòng)物門(Arthropoda),甲殼綱(Crustacea),十足目(Decapoda),長(zhǎng)臂蝦科(Palaemonidae)、沼蝦屬(Macrobrachium)。近年來(lái),隨著青蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的規(guī)模化擴(kuò)大、年產(chǎn)量的提高,在生產(chǎn)中出現(xiàn)了一系列亟待解決的難題,其中青蝦個(gè)體小型化"性早熟"問(wèn)題最為突出。在養(yǎng)殖池塘中小蝦性腺過(guò)早成熟產(chǎn)卵,導(dǎo)致青蝦個(gè)體變小、池塘養(yǎng)殖密度過(guò)大、多代同堂等一系列問(wèn)題,制約著青蝦產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展。性腺的成熟與生殖調(diào)控基因密切相關(guān),參與生殖調(diào)控的基因很多,其中卵黃蛋白原(Vitellogenin,Vg)和卵黃蛋白原受體(Vitellogeninreceptor,VgR)在卵子發(fā)生過(guò)程中起著十分關(guān)鍵的作用。目前,在青蝦中曾經(jīng)克隆了 Vg基因的短片段,但對(duì)于其功能研究還未見(jiàn)報(bào)道,關(guān)于VgR基因的研究還十分薄弱。本研究以青蝦為研究對(duì)象,擬開(kāi)展卵黃蛋白原基因和卵黃蛋白原受體基因的研究,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的精卵巢文庫(kù)獲取的基因短片段,采用cDNA末端快速擴(kuò)增(Rapid AnplificationofcDNA Ends,RACE)技術(shù)克隆獲得了 Vg基因和VgR基因的全長(zhǎng)cDNA序列,并研究了在不同組織、成體不同發(fā)育時(shí)期、卵巢不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)規(guī)律;與此同時(shí),通過(guò)眼柄摘除和RNAi,研究了 Mn-VgR和Mn-Vg基因的功能以及在卵子發(fā)生過(guò)程中之間的相互調(diào)控關(guān)系。采用RACE技術(shù)獲得青蝦Vg基因的全長(zhǎng)cDNA序列全長(zhǎng)約7804bp,ORF共編碼2536個(gè)氨基酸殘基,蛋白分子量為286.810kDa,熒光定量結(jié)果表明,Mn-Vg基因在雌蝦的肝胰腺、血淋巴和卵巢中高表達(dá),其中肝臟表達(dá)量最高。在雄蝦的各個(gè)組織基本不表達(dá)。Mn-Vg在胚胎發(fā)育的原腸期和n炞從滋迤詒澩锪拷細(xì)�。哉C瞿さ諞惶轂澩锪看锏椒逯，

本文編號(hào)：2698473