【摘要】：免疫系統(tǒng)包括先天免疫和適應(yīng)性免疫。無脊椎動物缺乏適應(yīng)性免疫系統(tǒng),并依靠先天免疫來保護(hù)他們免受病原體和微生物的侵染。本文以羅氏沼蝦為研究對象,對其模式識別和免疫相關(guān)信號途徑進(jìn)行了研究。(1) C型凝集素(CTL)是在脊椎動物和無脊椎動物的先天免疫中起重要作用的模式識別蛋白。本課題從羅氏沼蝦中克隆到一條C型凝集素,命名為MrLec。MrLec的cDNA全長為1431 bp,其開放閱讀框為1041bp,編碼一個含346個氨基酸殘基的蛋白。MrLec的信號肽長為18個氨基酸,另外含有一個長為122個氨基酸的單個碳水化合物識別結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析表明MrLec與脊椎動物為一個分支,并且與日本囊對蝦中的CTL3具有57%的相似性。組織表達(dá)分析表明,MrLec在腸中具有較高的表達(dá)水平,在血細(xì)胞,心臟,肝胰腺,鰓和胃中表達(dá)水平較低。在受到副溶血弧菌刺激后,MrLec在鰓和腸中的表達(dá)量上升。在受到白斑綜合征病毒(WSSV)攻擊的24,36和48小時,MrLec在腮中的表達(dá)量均上調(diào)。同時,MrLec在腸道中的表達(dá)量在36和48小時后也上調(diào)。MrLec重組蛋白可以在鈣離子存在的情況下凝集細(xì)菌并且結(jié)合革蘭氏陽性菌和陰性菌。另外MrLec重組蛋白可以結(jié)合脂多糖和肽聚糖,并且可以在蝦體內(nèi)促進(jìn)機(jī)體對弧菌的清除作用。這些結(jié)果表明MrLec參與羅氏沼蝦的免疫反應(yīng)。(2) Toll受體作為模式識別受體在無脊椎動物的先天免疫反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用。在這項研究中,我們從羅氏沼蝦中發(fā)現(xiàn)了一種Toll受體并將它命名為MrToll。其cDNA全長為4257bp,編碼1367個氨基酸。它含有17個LRR結(jié)構(gòu)域,1個跨膜結(jié)構(gòu)域和1個TIR結(jié)構(gòu)域。構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明MrToll與果蠅中的Toll7和其他節(jié)肢動物的Toll為一個分支。在mRNA水平上,MrToll主要分布于羅氏沼蝦的心臟,肝胰腺,腮,胃和腸。在血細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中,MrToll的表達(dá)量較低。在受到白斑病毒刺激后的24至48小時,MrToll在腮中的表達(dá)量逐漸上調(diào)。在羅氏沼蝦的腮組織中,甲殼素(Cru)基因Cru3和Cru7的表達(dá)水平相對低于Cru2和Cru4。在受到WSSV攻擊期間,對羅氏沼蝦的鰓組織中的MrToll進(jìn)行RNA干擾后,Cru3和Cru7的表達(dá)受到抑制。同時,抗脂多糖因子(ALF)基因ALF2,ALF3 ALF4和ALF5在鰓組織中的表達(dá)量也受到調(diào)節(jié)。這些研究結(jié)果表明MrToll可能有助于羅氏沼蝦抗病毒免疫防御反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：南京師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S945.41

【參考文獻(xiàn)】

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1 張金洲;項智鋒;李學(xué)斌;王清華;;RNAi的技術(shù)研究進(jìn)展[J];河南科技學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年03期

2 王金星,趙小凡;無脊椎動物先天免疫模式識別受體研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年02期

3 孟凡倫,張玉臻,孔健,馬桂榮;甲殼動物中的酚氧化酶原激活系統(tǒng)研究評價[J];海洋與湖沼;1999年01期

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1 王冬冬;中國明對蝦核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB家族基因在免疫調(diào)控中的功能研究[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2012年

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本文編號：2690777