【摘要】：本研究針對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中細(xì)菌性疾病爆發(fā)導(dǎo)致的抗生素濫用現(xiàn)象及養(yǎng)殖動(dòng)物感染疾病引起的氧化應(yīng)激問題,以團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)幼魚為研究對(duì)象,探明抗氧化蛋白基因(Peroxiredoxin,Prx)在其肝臟、腎臟、脾臟、心臟、腦、鰓、肌肉、鰾、前腸及后腸10個(gè)組織器官中的表達(dá)分布情況,并采用姜黃素投喂動(dòng)物的手段,探求姜黃素在團(tuán)頭魴幼魚飼料中的適宜添加量以及適宜的投喂模式。并進(jìn)一步解析嗜水氣單胞菌對(duì)團(tuán)頭魴幼魚抗氧化蛋白基因在組織器官中的表達(dá)分布的影響及在姜黃素不同添加量及投喂模式下團(tuán)頭魴生理、免疫反應(yīng)及肝臟抗氧化蛋白表達(dá)差異的影響。主要結(jié)果如下:1、研究抗氧化蛋白基因Peroxiredoxin在團(tuán)頭魴肝臟、腎臟、脾臟、心臟、腦、鰓、肌肉、鰾、前腸及后腸10個(gè)組織器官中的表達(dá)分布影響,表明了PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA在團(tuán)頭魴10個(gè)主要組織中均有表達(dá):PrxⅠ:心臟、腎臟肝臟、脾臟、鰓后腸前腸腦、肌肉、鰾;PrxⅡ:肝臟前腸后腸心臟、腦、鰾、腎臟、脾臟、鰓、肌肉;PrxⅢ:肌肉、鰾脾臟肝臟心臟前腸、后腸鰓、腦、腎臟;PrxⅣ:肝臟后腸前腸心臟、腦、肌肉腎臟脾臟、鰓、鰾;PrxⅤ:腦、心臟肌肉后腸前腸腎臟、脾臟、鰓、肝臟、鰾;PrxⅥ:肝臟前腸肌肉后腸腎臟脾臟、心臟鰓鰾、腦�？寡趸鞍谆蛟诟鹘M織上的表達(dá)水平的差異性,說明其表達(dá)具有特異性。在嗜水氣單胞菌感染24h后,抗氧化蛋白基因PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA在團(tuán)頭魴10個(gè)組織器官中的表達(dá)較感染前出現(xiàn)不同程度的升高,且在肝臟中的表達(dá)水平普遍偏高。鑒于抗氧化蛋白基因在嗜水氣單胞菌感染前后,在肝臟中的表達(dá)水平均較高推斷肝臟在團(tuán)頭魴抗氧化過程中發(fā)揮重要作用。2、研究姜黃素對(duì)團(tuán)頭魴幼魚生長性能及非特異性免疫的影響,配制姜黃素水平為0、15、30、60、120、240 mg/kg的6組等氮等能的試驗(yàn)飼料,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)25尾魚(初均重:3.15 ± 0.022 g),試驗(yàn)周期為60天。結(jié)果表明:(1)與對(duì)照組相比,60 mg/kg姜黃素添加組的增重率(WGR)和特定生長率(SGR)顯著升高(p0.05),餌料系數(shù)顯著下降(p0.05),各組間臟體比(VSI)無顯著性差異(p0.05);(2)白細(xì)胞(WBC)數(shù)隨姜黃素添加量的增加呈先升高后降低的趨勢,且60 mg/kg姜黃素添加組的白細(xì)胞(WBC)數(shù)顯著高于對(duì)照組(p0.05);(3)與對(duì)照組相比,60、120 mg/kg姜黃素添加組的TNF-α、ACH50活力顯著升高(p0.05);60 mg/kg姜黃素添加組的IL-1β活力最高,且顯著高于15、30、120 mg/kg姜黃素添加組以及對(duì)照組(p0.05);(4)60mg/kg姜黃素添加組,攻毒后96h的累積死亡率顯著低于對(duì)照組(p0.05);(5)PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA表達(dá)水平在姜黃素添加量為60mg/kg時(shí)達(dá)最大,且與對(duì)照組差異顯著(p0.05)。綜上所述,在飼料中添加適量的姜黃素(60 mg/kg)可提高團(tuán)頭魴幼魚的生長性能、非特異性免疫反應(yīng)及抗氧化能力。3、研究日糧姜黃素不同投喂模式對(duì)團(tuán)頭魴幼魚生長及非特異性免疫的影響,分別以5種投喂模式(P1連續(xù)喂養(yǎng)基礎(chǔ)日糧,即對(duì)照組;P2、P3、P4、先投喂添加60 mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧,再投喂基礎(chǔ)日糧,P2每周一交替,P3每兩周一交替,P4每四周一交替,P5連續(xù)投喂添加60mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧)飼養(yǎng)8周初均重為3.15±0.01g的團(tuán)頭魴幼魚,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)25尾魚。結(jié)果顯示:(1)P3組魚的增重率(WGR)及特定生長率(SGR)相比于對(duì)照組及P5組顯著升高(p0.05),且餌料系數(shù)(FCR)達(dá)最低并與P1、P2、P5組差異顯著(p0.05);(2)相比于對(duì)照組,P2、P3、P4組呼吸爆發(fā)活性和白細(xì)胞介素(IL-1β)活性均顯著升高(p0.05);(3)血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性根據(jù)投喂模式的不同呈先下降后上升趨勢,且在P3模式下的活力顯著低于對(duì)照組(p0.05),而抗腫瘤壞死因子(TNF-α)活性及補(bǔ)體替代途徑活力(ACH50)呈相反趨勢,且在P3模式下顯著高于對(duì)照組(p0.05);(4)P3組攻毒后96 h的累積死亡率顯著低于P1組(p0.05);(5)P3組較P1組顯著提高了PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA表達(dá)水平(p0.05),且達(dá)最大。因此,本試驗(yàn)建議以先投喂添加60mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧,再投喂基礎(chǔ)日糧,每兩周一交替的投喂模式飼養(yǎng)團(tuán)頭魴幼魚。4、研究了姜黃素不同添加量及投喂模式對(duì)嗜水氣單胞菌感染下團(tuán)頭魴生理、免疫反應(yīng)及肝臟抗氧化蛋白表達(dá)差異的影響。結(jié)果顯示,團(tuán)頭魴在嗜水氣單胞菌感染24h后:1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性均較感染前有所升高,相比與對(duì)照組,60mg/kg姜黃素添加組及P3組投喂模式下團(tuán)頭魴AST活性顯著降低(p0.05);2、白細(xì)胞數(shù)量、NO含量、NOS、IL-1β及TNF-α活性在姜黃素添加量為60mg/kg及P3組投喂模式時(shí)最高且與對(duì)照組差異顯著(p0.05);3、各組抗氧化蛋白基因表達(dá)水平均較感染前有所升高,說明嗜水氣單胞菌有上調(diào)抗氧化蛋白基因的表達(dá)水平的作用,而當(dāng)姜黃素添加量為60mg/kg及P3投喂模式更能提高肝臟抗氧化蛋白基因PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA的表達(dá)水平,從而加強(qiáng)團(tuán)頭魴抗嗜水氣單胞菌的能力,增強(qiáng)抗氧化應(yīng)激能力。
【圖文】：

２０１３）。姜黃素微溶于水，溶于甲醇、己醇、丙二醇等有機(jī)溶劑，易溶于逡逑冰醋酸和堿溶液，在堿性條件下呈紅褐色，在中性和酸性條件下呈黃色（Ｗａｎｇｅｔａｌ．，逡逑１９９７；趙春萍等，２０１４）。其化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖１－２，包含了兩個(gè)鄰甲基化的酷Ｗ及一個(gè)Ｐ－逡逑二酬功能基團(tuán)，這種結(jié)構(gòu)特性與其多種生物活性作用都高度相關(guān)（Ｐａｎｅｔａｌ．，１９９９）。逡逑姜黃素在中性及堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，高溫及強(qiáng)光會(huì)加速其降解，產(chǎn)生香草酵、阿魏酸逡逑和阿魏憸甲燒（Ｗａｎｇｅｔａｌ．，１９９７；王榮莉，２００６；馮生光等，２００９）。目前世界衛(wèi)生逡逑組織食品藥品管理局己批準(zhǔn)姜黃為天然食品添加劑。逡逑~k繁瓣Ｃ分子懸３孩泛％邋０逡逑ＯＨ邐ｍ逡逑化甲巧蔥巧巧巧Ｃ分子＊３３７》逡逑0邋0逡逑ＯＢ邐？逡逑巧，

本文編號(hào)：2675031