【摘要】：白介素22(IL-22)是IL-10家族中的一員,作為一種多功能性細胞因子,在炎癥性疾病中發(fā)揮著重要作用。在機體組織中適量的IL-22有抗菌抑炎、修復黏膜損傷、促進細胞再生等保護機體的功能,但是過量的IL-22會導致機體發(fā)生功能性紊亂,從而引發(fā)自身免疫疾病。另外,IL-22受體(IL-22RA1)能夠介導IL-22信號的轉導,IL-22結合蛋白(IL-22BP)能夠調控IL-22信號。目前已有大量研究明確了哺乳動物中IL-22、IL-22RA1、IL-22BP的重要性,但是它們在硬骨魚中的關系和功能地位還有待闡明。本文以草魚為研究模型,首先分離克隆得到IL-22,其全長CDS序列包含510個核苷酸,共編碼169個氨基酸,和其它幾種物種IL-22氨基酸序列比對有14.77%到39.91%的相似度。課題采用原核表達系統(tǒng)、變復性處理包涵體蛋白、真核表達系統(tǒng)等方法獲取草魚IL-22重組蛋白并驗證了其生物學活性。另外,在驗證了IL-22定制抗體的特異性后,利用該抗體在蛋白水平證明了PMA刺激草魚頭腎白細胞促進IL-22分泌。隨后,通過染色體基因定位方法分離鑒定了草魚IL-22RA1,其CDS序列包含1533個核苷酸,編碼510個氨基酸,首次獲悉了硬骨魚IL-22RA1編碼序列信息。最后分離克隆了草魚IL-22BP,其CDS序列全長702 bp,共編碼233個氨基酸,和其它幾種物種IL-22BP氨基酸序列比對有31.20%到82.83%的相似度。通過IL-22BP的組織分布分析發(fā)現(xiàn):IL-22BP在小腸、肝臟中分布較多,在頭腎、中腎、脾臟、鰓中分布較少。另外體內細菌感染草魚實驗顯示,嗜水氣單胞桿菌感染草魚三天后,草魚各組織中IL-22BP表達水平明顯下降,其中在小腸和肝臟中變化最為明顯,提示IL-22BP可能參與了機體的炎癥調節(jié)。以上研究獲悉了草魚IL-22、IL-22RA1、IL-22BP的分子和表達信息,為探究它們在硬骨魚免疫調控中的地位奠定了基礎。
【學位授予單位】：電子科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4

【相似文獻】

相關期刊論文 前2條

1 蔣茂芹;賴銘裕;謝芳;姜丹;盧婷;;胃癌組織中IL-22BP、IL-22、STAT3的表達變化及意義[J];山東醫(yī)藥;2017年25期

2 馬靜;陳達凡;宛新建;;IL-22BP在活動期炎癥性腸病患者腸黏膜中的表達及其意義[J];胃腸病學;2018年04期

相關碩士學位論文 前4條

1 蔣茂芹;IL-22BP、IL-22、STAT3在胃癌中的表達及臨床意義研究[D];廣西醫(yī)科大學;2018年

2 馬騰躍;草魚白介素22及其受體和結合蛋白的分離鑒定[D];電子科技大學;2018年

3 郭宗強;IL-22及IL-22BP表達與乳腺癌發(fā)生發(fā)展的相關性研究[D];青島大學;2016年

4 韓楊;IL-22在TNBS誘導的小鼠早期潰瘍性結腸炎中的表達[D];華中科技大學;2011年

，

本文編號：2670881