發(fā)布時(shí)間：2020-05-16 15:24

【摘要】：本文對(duì)泥鰍幼魚(yú)和成魚(yú)腸道菌群多樣性進(jìn)行分析,并從中篩選出在體外能產(chǎn)多種酶以及對(duì)常見(jiàn)致病菌有較強(qiáng)拮抗作用的潛在益生菌枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis),并且評(píng)估投喂對(duì)泥鰍幼魚(yú)生長(zhǎng)、消化酶和非特異性免疫的影響,以期為益生菌在泥鰍配合飼料中的應(yīng)用提供參考。主要結(jié)果如下:(1)運(yùn)用高通量測(cè)序方法研究健康泥鰍成魚(yú)和幼魚(yú)腸道菌群組成。試驗(yàn)分為3組,馴化幼魚(yú)組(C1)、野生幼魚(yú)組(N1)和野生成魚(yú)組(N2)。提取腸道基因組DNA,PCR擴(kuò)增16SrRNA基因V3-V4片段,采用Illumina公司的Miseq測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序。在門水平上,在泥鰍馴養(yǎng)幼魚(yú)(C1)和野生幼魚(yú)(N1)中變形菌門占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),分別為整個(gè)菌群的91.3%、94.4%,厚壁菌門為次優(yōu)勢(shì)菌群,分別占8.5%、4.0%;在野生泥鰍成魚(yú)(N2)中,變形菌門占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)占79.6%,梭桿菌門為次優(yōu)勢(shì)菌群占18.4%。在屬水平上,馴養(yǎng)組幼魚(yú)(C1)腸道菌群有14個(gè)屬,其中氣單胞菌屬和不動(dòng)桿菌屬占整個(gè)腸道菌群的84.4%;野生幼魚(yú)(N1)腸道菌群有17個(gè)屬依次其中不動(dòng)桿菌屬和氣單胞菌屬占整個(gè)腸道菌群的90.2%。野生成魚(yú)(N2)腸道菌群有24個(gè)屬,其中氣單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬和鯨桿菌屬占整個(gè)腸道菌群的89.3%。(2)將從野生泥鰍幼魚(yú)和成魚(yú)腸道分離的93株細(xì)菌進(jìn)行體外產(chǎn)酶試驗(yàn)和對(duì)常見(jiàn)水生動(dòng)物病原菌(嗜水氣單胞菌、殺鮭氣單胞菌、副溶血弧菌和腐敗希瓦氏菌)的拮抗試驗(yàn),得到6株能產(chǎn)3種酶(淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶)的菌株和2株有拮抗活性的菌株,再通過(guò)溶血性試驗(yàn)篩選出3株無(wú)溶血活性的菌株分別為N1-08、N2-08和N2-26菌株。選擇同時(shí)具有拮抗活性和產(chǎn)酶活性的N1-08菌株,進(jìn)行安全性試驗(yàn),將菌懸液(109 cells/mL)通過(guò)腹腔注射泥鰍幼魚(yú),每尾200μL。結(jié)果表明,該菌株對(duì)泥鰍幼魚(yú)均無(wú)致病性。16S rRNA序列分析表明,N1-08菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis,AB735994)相似。(3)以基礎(chǔ)餌料為對(duì)照組(C),在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行為期4周的飼喂試驗(yàn),研究餌料中添加不同濃度(107 cells/g、109 cells/g)的N1-08菌株對(duì)泥鰍幼魚(yú)生長(zhǎng)、消化酶、非特異性免疫的影響。結(jié)果顯示,飼料中添加N1-08菌株對(duì)泥鰍幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的提高不顯著(P0.05)。飼料中添加不同劑量的N1-08菌株后,能不同程度的提高泥鰍幼魚(yú)肝胰臟和腸道消化酶活力(胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶)和非特異性免疫活力(血清溶菌酶活力和血清超氧化物歧化酶活力)。
【圖文】：

12圖 2-2 不同樣品 OTU 分布 Venn 圖Fig.2-2 Venn diagram of shared OTU analysis for the different s腸道微生物 Alpha 多樣性分析道的菌群豐度和多樣性見(jiàn)表 2-1，3 組樣品覆蓋率均接近概率很低。Ace 和 Chao 指數(shù)可以對(duì)菌群物種豐度進(jìn)行評(píng)最高，，其次 N1 和 C1。樣品 C1 的香濃指數(shù)和辛普森指數(shù)

圖 2-1 不同樣品稀釋曲線Fig.2-1 Rarefaction curves of the different samples于 OTU 分布 Venn 圖(見(jiàn)圖 2-2）可知，三組樣品中其中 C1、N1 兩個(gè)樣本間共同存在 20 個(gè) OTUs；C；N1、N2 兩個(gè)樣本間共存在 24 個(gè) OTUs；三個(gè)樣本共
【學(xué)位授予單位】：大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S917.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡樂(lè)勇;寧波港幼魚(yú)比例檢查之實(shí)踐與思考[J];中國(guó)水產(chǎn);2002年02期

2 羅會(huì)明,鄭微云;鰻鱺幼魚(yú)對(duì)顏色光的趨光反應(yīng)[J];淡水漁業(yè);1979年08期

3 應(yīng)杰;;蚯蚓制品作幼魚(yú)餌料的試驗(yàn)[J];飼料研究;1980年04期

4 季之源,戴俊杰,顧嘉賓,周裕溪;計(jì)算幼魚(yú)長(zhǎng)度和重量的體積測(cè)定法及其應(yīng)用[J];淡水漁業(yè);1981年01期

5 謝洪民;;蘇聯(lián)培育鯉幼魚(yú)的幾個(gè)主要環(huán)節(jié)[J];水產(chǎn)科技情報(bào);1983年01期

6 В.К.Конобеева;王作楷;;水庫(kù)中水流對(duì)幼魚(yú)分布的影響[J];水利漁業(yè);1989年01期

7 謝小軍;;南方大口鲇幼魚(yú)發(fā)育的初步研究[J];水生生物學(xué)報(bào);1989年02期

8 周秀琴;;新型幼魚(yú)飼料[J];今日科技;1990年05期

9 允連;;新型幼魚(yú)飼料[J];飼料研究;1991年06期

10 李福秀;;新型幼魚(yú)飼料[J];國(guó)外畜牧學(xué)(飼料);1992年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 何偉;陳波見(jiàn);曹振東;付世建;;溫度和急性低氧對(duì)鳊魚(yú)幼魚(yú)糖代謝酶活性的影響[A];中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

2 楊晗;曹振東;付世建;;尾鰭缺失對(duì)鳊魚(yú)幼魚(yú)的游泳能力、能量效率與行為的影響[A];第七屆全國(guó)野生動(dòng)物生態(tài)與資源保護(hù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

3 楊晗;付世建;曹振東;;尾鰭缺失對(duì)鳊魚(yú)幼魚(yú)的游泳能力、能量效率與行為的影響[A];中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

4 張安杰;曹振東;付世建;;低氧對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)快速啟動(dòng)運(yùn)動(dòng)能力的影響[A];中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

5 高露姣;宋兵;陳立僑;江洪波;陳亞瞿;徐彥明;;饑餓狀態(tài)下史氏鱘幼魚(yú)的形態(tài)和行為變化的初步研究[A];動(dòng)物學(xué)專輯——上海市動(dòng)物學(xué)會(huì)2000年年會(huì)論文集[C];2000年

6 劉超;胡文佳;陳明茹;楊圣云;;山口紅樹(shù)林生態(tài)系統(tǒng)稚幼魚(yú)多樣性及對(duì)漁業(yè)資源的補(bǔ)充作用[A];中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

7 張倩;康斌;;水流對(duì)團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)幼魚(yú)游泳行為的影響[A];山地環(huán)境與生態(tài)文明建設(shè)——中國(guó)地理學(xué)會(huì)2013年學(xué)術(shù)年會(huì)·西南片區(qū)會(huì)議論文集[C];2013年

8 丁兆坤;逄劭楠;許友卿;;高度不飽和脂肪酸對(duì)軍曹魚(yú)幼魚(yú)功能基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)理[A];2008年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

9 張曦;付世建;曹振東;;鯉魚(yú)幼魚(yú)標(biāo)準(zhǔn)代謝的種內(nèi)差異與運(yùn)動(dòng)能力和攝食代謝的關(guān)系[A];中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)魚(yú)類學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

10 李丹;林小濤;李想;朱志明;;流速對(duì)羅非魚(yú)幼魚(yú)游泳行為的影響[A];2009年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 梁思奇;北部灣濫捕幼魚(yú)當(dāng)飼料,毀滅資源令人痛心[N];新華每日電訊;2008年

2 鐘欣　編譯;二氧化碳嘗試升高導(dǎo)致幼魚(yú)被攻擊的可能性增加[N];中國(guó)氣象報(bào);2010年

3 林明;護(hù)理魚(yú)寶寶的竅門[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2008年

4 吳安欽;連江養(yǎng)殖區(qū)餌料奇缺 千萬(wàn)尾幼魚(yú)嗷嗷待哺[N];中國(guó)特產(chǎn)報(bào);2000年

5 江燕;浙江上層幼魚(yú)發(fā)生量高于往年[N];中國(guó)漁業(yè)報(bào);2011年

6 記者　錢錚;“淡”水養(yǎng)海魚(yú)，比海里長(zhǎng)得快還長(zhǎng)得好[N];新華每日電訊;2006年

7 凱文;四種養(yǎng)魚(yú)新法[N];農(nóng)民日?qǐng)?bào);2004年

8 本報(bào)記者 張力澎;金龍魚(yú)F2代群體成功繁育[N];新農(nóng)村商報(bào);2013年

9 ;水泥池中養(yǎng)金魚(yú)[N];河北科技報(bào);2004年

10 農(nóng)牧企;國(guó)外養(yǎng)魚(yú)六大新招[N];經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào).農(nóng)村版;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 張國(guó)斌;胭脂魚(yú)幼魚(yú)適宜蛋白水平及中草藥對(duì)其非特異性免疫機(jī)能的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 逯巖;發(fā)酵銀杏葉在團(tuán)頭魴幼魚(yú)飼料中的應(yīng)用研究[D];南京林業(yè)大學(xué);2015年

2 胡艷;長(zhǎng)江口近岸水域幼魚(yú)時(shí)空分布及代表種資源評(píng)估[D];上海海洋大學(xué);2015年

3 聶廣鋒;梭魚(yú)早期發(fā)育以及間歇性饑餓對(duì)其幼魚(yú)消化道組織學(xué)及行為的影響[D];上海海洋大學(xué);2015年

4 鄭新春;咖啡因?qū)Π唏R魚(yú)脂肪肝的保護(hù)作用及其機(jī)制的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

5 程燕;醫(yī)用臭氧對(duì)斑馬魚(yú)幼魚(yú)缺氧腦損傷的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 崔紅紅;日糧肌醇對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)、非特異免疫及相關(guān)免疫基因表達(dá)的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 廖英杰;團(tuán)頭魴幼魚(yú)對(duì)蛋氨酸、賴氨酸和精氨酸需要量的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 王瑩;團(tuán)頭魴幼魚(yú)對(duì)吡哆醇和硫胺素的適宜需求量研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

9 曾蕓蕓;不同比例的亞麻酸/亞油酸對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)消化吸收能力和腸道免疫功能的影響及其調(diào)控機(jī)制[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

10 王天嬌;團(tuán)頭魴幼魚(yú)對(duì)煙酸的適宜需要量及調(diào)節(jié)抗應(yīng)激能力的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2666943