【摘要】：紅毛菜具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值,.是新興的重要栽培紅藻,然而目前對(duì)我國(guó)紅毛菜屬植物的種類、分布,淡水紅毛菜與海水紅毛菜的親緣關(guān)系等研究不足。本文通過克隆測(cè)序核糖體RNA基因全長(zhǎng)序列,對(duì)我國(guó)沿海地區(qū)及內(nèi)陸地區(qū)采集到的紅毛菜植物的種屬關(guān)系及親緣關(guān)系進(jìn)行研究。核糖體RNA基因由編碼區(qū)和非編碼區(qū)構(gòu)成,編碼區(qū)序列包括18S rDNA、5.8S rDNA和28S rDNA,非編碼區(qū)包括ITS1、ITS2和IGS區(qū)域,編碼區(qū)序列比較保守,而非編碼區(qū)序列進(jìn)化速率則較快,不同的進(jìn)化速率讓核糖體RNA基因適用于不同分類水平。通過基因克隆和測(cè)序技術(shù),對(duì)福建莆田的海水紅毛菜進(jìn)行核糖體RNA基因全長(zhǎng)測(cè)序研究。結(jié)果顯示,莆田的海水紅毛菜18S rDNA的全長(zhǎng)序列為2942bp,5.8S rDNA的序列長(zhǎng)度為158bp,28S rDNA全長(zhǎng)序列為3751bp, ITS1序列長(zhǎng)度為699bp, ITS2序列長(zhǎng)度為397bp, IGS序列長(zhǎng)度為4613bp,因此,莆田的海水紅毛菜核糖體RNA基因序列全長(zhǎng)為12530bp。本文對(duì)采自山東威海(WH)、江蘇連云港(LYG)和南通(NT)、福建莆田(PT)和南日島1-2 (NRD1-2)和深圳南澳1-3(NA1-3)的9個(gè)海水紅毛菜以及甘肅蘭州興隆山(XLS)、山西陽(yáng)泉娘子關(guān)(NZG)的2個(gè)淡水紅毛菜進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育研究�？寺〔⑶曳治銎�18S rDNA、5.8S rDNA及ITS區(qū)域序列、28S rDNA部分序列和IGS部分序列,結(jié)果顯示：11個(gè)地理群的紅毛菜分成三個(gè)進(jìn)化分支,2個(gè)淡水紅毛菜與世界其他地方的淡水紅毛菜分為一支,獨(dú)立于海水紅毛菜；而9個(gè)海水紅毛菜中分為兩個(gè)分支,威海(WH)的海水紅毛菜分為一個(gè)獨(dú)立分支,其他8個(gè)海水紅毛菜分為一個(gè)分支。根據(jù)國(guó)際上最新修訂的紅毛菜科15個(gè)屬的分類,本文中的2個(gè)淡水紅毛菜聚類在Bangia中,威海的海水紅毛菜聚類在"Bangia" 1中,其他8個(gè)海水紅毛菜聚類在"Bangia"2中。對(duì)不同地理群紅毛菜核糖體RNA基因的不同區(qū)域序列進(jìn)行分析,結(jié)果顯示：不同物種間18S rDNA的序列相似性為89.0%-93.2%,5.8S rDNA的序列相似性為86.7%-90.5%,28S rDNA的部分序列相似性為80.1%-86.2%,而紅毛菜種內(nèi)相似性極高,幾乎沒有差異,因此,各編碼區(qū)序列適合于紅毛菜種間及種以上水平的分類鑒定。雖然不同物種間ITS區(qū)序列相似性極低,但在種內(nèi)相似性卻極高,故而不適合用于紅毛菜種下水平的遺傳分析,可結(jié)合5.8S rDNA序列用于種間及其以上水平的分類研究。聚類在同一進(jìn)化分支上的8個(gè)海水紅毛菜的部分IGS序列幾乎沒有差別,因此推測(cè)這8個(gè)海水紅毛菜可能為同一個(gè)種。
【圖文】：

（絲狀體）兩個(gè)世代（汪文俊等２００８）。此類型包括有性繁殖和無性繁殖兩種繁逡逑殖方式。紅毛菜的有性繁殖過程中，雌雄配子體分別形成果胞和精子，受精后形逡逑成果抱子囊，并放散果抱子（圖１）。Ｄｒｅｗ邋（１９４９）報(bào)道了擠形紫菜逡逑Ｍ／Ｍ占?jí)揽诠茫┑墓勺樱ǎ纾锘螅穑铮颍澹┟劝l(fā)后穿過貝殼內(nèi)層生長(zhǎng)，形成一種殼斑藻，逡逑并確定此為絲狀體時(shí)期。我國(guó)藻類學(xué)家曾呈奎和張德瑞（１９５４）對(duì)甘紫菜（化Ｗ炒ｒａ逡逑ｔｅｎｅｍ）的絲狀體發(fā)育成配子體過程進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)絲狀體發(fā)育成抱子囊，進(jìn)而逡逑放散抱子，此抱子直接發(fā)育成配子體，同時(shí)命名此抱子為殼袍子（ｃｏｎｃｈｏｓｏｐｏｒｅ）。逡逑紅毛菜的果拖子萌發(fā)穿過貝殼內(nèi)層形成抱子體，抱子體中的袍子囊枝放散殼袍子，逡逑殼跑子直接發(fā)育成紅毛菜配子體。相比于有性繁殖，紅毛菜的無性繁殖更為普遍，逡逑其雌雄配子體幼苗直接發(fā)散大量單跑子，單抱子繼而發(fā)育成新的配子體，無性繁逡逑殖方式為紅毛菜群體數(shù)量的擴(kuò)增有巨大貢獻(xiàn)。無性繁殖除了通過單抱子進(jìn)行Ｗ外，逡逑還通過休眠抱子和藻體斷裂形成新個(gè)體。休眠抱子是紅毛菜原葉體在生長(zhǎng)過程中逡逑部分細(xì)胞壞死

３．結(jié)果逡逑３．１海水紅毛萊基因組ＤＮＡ的提取逡逑采自福建甫田的栽培海水紅毛菜基因組ＤＮＡ的瓊脂糖凝膠電泳圖如圖４所逡逑示。根據(jù)凝膠電泳圖，我們可Ｗ看出海水紅毛菜基因組ＤＮＡ的大小約為２５此，符逡逑合其基因組分子量大小。逡逑ＷＯＯｂｐ逡逑３0００ｂｐ逡逑－腳卿逡逑１５００ｂｐ逡逑ｌＯＯＯｂｐ逡逑￣５０ｂｐ逡逑５００ｂｐ逡逑＊邐三邋００邋ｂｐ逡逑１００邸逡逑圖４海水紅私菜基因組ＤＮＡ電泳圖逡逑Ｍｌ：邋ＴａＫａ民ａ邋Ｘ－Ｈｉｎｄ邋ＩＩＩ邋出ｇｅｓｔＤＮＡｍａｒｋｅｒ；邋１－５：海水}毛萊基因組ＤＮＡ；邋Ｍ２：逡逑ＴａＫａＲａＤＬ５０００ＤＮＡｍａｒｋｅｒ；邋６：空白對(duì)照逡逑Ｆｉｇ．邋４邋Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ邋ｉｍａｇｅ邋ｏｆ邋ｇｅｎｏｍｉｃ邋ＤＮＡ邋ｅｘｔｒａｃｔｅｄ邋ｆｒｏｍ邋度幻巧各／ａ邋ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ邋ｆｒｏｍ逡逑Ｐｕｔｉａｎ逡逑Ｍｌ：邋ＴａＫａ民邋ａ邋入－Ｈｉｎｄ邋ｉｎ邋ｄｉｇｅｓｔ邋ＤＮＡ邋ｍａｒｋｅｒ；邋１－５：邋Ｇｅｎｏｍｉｃ邋ＤＮＡ邋ｏｆ邋Ｂａ打ｇｉａ邋ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ逡逑ｆｒｏｍ邋Ｐｕｔｉａｎ；邋Ｍ２：邋ＴａＫａＲａ邋ＤＮＡ邋ｍａｒｋｅｒ邋ＤＩ＾－５０００；邋６：邋Ｂｌａｃｋ邋ｃｏｎｔｒｏｌ逡逑３．２邋＂海水紅毛萊基因組ＤＮＡ為模板的ＰＣ民擴(kuò)增逡逑ＰＣ民擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)Ｗ海水紅毛菜基因組ＤＮＡ為模板，結(jié)合表４中的引物進(jìn)行ＰＣ民逡逑反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳圖如圖５所示。固５邋（ａ）為１８Ｓ邋ｒＤＮＡ的凝膠電泳圖，逡逑從圖中可Ｗ看出，ＷＳＳＵＦ和ＳＳＵＲ為引物的ＰＣＲ成功擴(kuò)增出單一明亮條帶，且逡逑電泳條帶的大小約為３０００ｂｐ
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S968.43

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 黃文鳳,黃建明,董飛強(qiáng),陳啟發(fā);紅毛菜的營(yíng)養(yǎng)成分特征和價(jià)值[J];海洋水產(chǎn)研究;1998年02期

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本文編號(hào)：2663922