發(fā)布時(shí)間：2020-05-05 17:42

【摘要】：鰻鱺(Anguilla japonica)是一種典型的降海洄游性魚(yú)類,是亞洲地區(qū)著名的名貴魚(yú)類和重要養(yǎng)殖對(duì)象。鰻鱺人工繁殖過(guò)程中親魚(yú)的選擇尤為重要,關(guān)系到繁殖的成功,而親魚(yú)的性別較難通過(guò)外部觀察進(jìn)行鑒定,雌雄魚(yú)在外部形態(tài)上難以區(qū)分。本實(shí)驗(yàn)主要從外部形態(tài)學(xué)指標(biāo),血清生化指標(biāo)以及SRAP分子標(biāo)記等三個(gè)層面對(duì)長(zhǎng)江口降海鰻鱺進(jìn)行性別鑒定。主要研究?jī)?nèi)容如下:1、長(zhǎng)江口降海雌雄鰻鱺外部形態(tài)指標(biāo)分析及建立雌雄鑒別函數(shù)測(cè)量60尾降海鰻鱺的17項(xiàng)外部形態(tài)特征數(shù)據(jù),并進(jìn)行追蹤標(biāo)記。通過(guò)人工繁殖確定雌雄后,發(fā)現(xiàn)30尾雌性,8尾雄性,22尾偽雄。分別對(duì)30尾雌性和8尾雄性個(gè)體的直接測(cè)量指標(biāo)進(jìn)行主成分分析及對(duì)17項(xiàng)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化處理后的15項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行R-聚類分析,并將標(biāo)準(zhǔn)化處理后的15項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果表明:主成分分析和R-聚類分析發(fā)現(xiàn),個(gè)體性狀差異主要集中在體型大小,吻部特征等方面。發(fā)現(xiàn)體寬/體長(zhǎng),體重/體長(zhǎng)^3,體高/體長(zhǎng),胸鰭長(zhǎng)/頭長(zhǎng),吻寬/頭長(zhǎng),吻端至眼眶后緣垂直距離/頭長(zhǎng),吻長(zhǎng)/頭長(zhǎng),眼徑指數(shù)等8個(gè)指標(biāo)存在雌雄差異(p0.05)。在此基礎(chǔ)上進(jìn)行逐步判別分析,并建立雌雄判定函數(shù)。獲得2個(gè)判定函數(shù):Y_(female)=1276.122X_3+366.352X_4+227.44X_7-116.555,(X_4=體重/體長(zhǎng)^3;X_3=體寬/體長(zhǎng);X_7=胸鰭長(zhǎng)/頭長(zhǎng))。2、長(zhǎng)江口降海雌、雄鰻鱺血清生化指標(biāo)和卵黃蛋白原的差異分析本文比較了長(zhǎng)江口降海洄游的鰻鱺雌、雄魚(yú)血清中的14項(xiàng)生化指標(biāo)及卵黃蛋白原含量的差異,并利用血清生化指標(biāo)建立了相應(yīng)的性別判定函數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鰻鱺雌魚(yú)血清中的甘油三酯、低密度脂蛋白、鈣離子含量顯著低于鰻鱺雄魚(yú)(P0.05),白蛋白、葡萄糖含量顯著高于鰻鱺雄魚(yú)(P0.05),而谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、總蛋白、肌酐、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和無(wú)機(jī)磷的含量在鰻鱺雌、雄魚(yú)間無(wú)明顯差異(P0.05)。此外,鰻鱺雌魚(yú)的卵黃蛋白原含量顯著高于鰻鱺雄魚(yú)(P0.05)。根據(jù)不同生化指標(biāo),采用逐步選擇法建立了兩個(gè)鰻鱺性別判定函數(shù)。3、長(zhǎng)江口降海鰻鱺雌雄個(gè)體SRAP分子標(biāo)記的篩選及SCAR分子標(biāo)記的建立以長(zhǎng)江口降海雌雄鰻鱺為研究材料,采用SRAP(sequence-related amplified polymorphism)技術(shù),共使用140對(duì)引物對(duì)鰻鱺基因組進(jìn)行性別特異表達(dá)特征條帶的篩選,研究其性別差異性SRAP標(biāo)記。通過(guò)初步篩選,獲得F5R2雌性特異DNA序列。回收克隆測(cè)序,片段長(zhǎng)145bp,經(jīng)核苷酸數(shù)據(jù)庫(kù)BLAST檢索未發(fā)現(xiàn)其同源序列。根據(jù)測(cè)序結(jié)果設(shè)計(jì)SCAR(sequence characterized amplified regions)特異引物,將此雌性特異性SRAP標(biāo)記轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定性和特異性更好的SCAR標(biāo)記。以此可以對(duì)鰻鱺進(jìn)行性別鑒定。總之,通過(guò)對(duì)降海鰻鱺的性別鑒定,優(yōu)化人工繁殖親魚(yú)的選擇,進(jìn)而為鰻鱺人工繁殖的成功提供基礎(chǔ)資料。
【圖文】：

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文表2-2 R-聚類分析的標(biāo)準(zhǔn)化處理Tab.2- 2standardized treatment of R- cluster analysis標(biāo)準(zhǔn)化性狀standardized treatment itemsX1=頭長(zhǎng)/體長(zhǎng) X6=口裂深/頭長(zhǎng) X11=吻端至眼眶后緣垂直距離/頭長(zhǎng)X2=軀干長(zhǎng)/體長(zhǎng) X7=胸鰭長(zhǎng)/頭長(zhǎng) X12=吻長(zhǎng)/頭長(zhǎng)X3=體寬/體長(zhǎng) X8=眼眶后緣寬度/頭長(zhǎng) X13= 吻長(zhǎng)/吻寬X4=體重/體長(zhǎng)^3 X9=眼間距/頭長(zhǎng) X14=吻端至眼眶后緣垂直距離/眼眶X5=體高/體長(zhǎng) X10=吻寬/頭長(zhǎng) X15=眼徑指數(shù)

圖 3-1 鰻鱺雌雄血清卵黃蛋白原Fig.3-1 serum vitellogenin of male and female eel3.2.3 血液中生化指標(biāo)含量與鰻鱺性別關(guān)系的判別分析3.2.3.1 逐步選擇法建立鰻鱺性別判定函數(shù)對(duì)這些生化指標(biāo)采用逐步選擇法進(jìn)行篩選。本文采用向前選擇的方式，利用F 統(tǒng)計(jì)量決定對(duì)某一指標(biāo)是選入還是剔除，以 F>3.84 作為選入的標(biāo)準(zhǔn)，以 F<2.71作為剔除的標(biāo)準(zhǔn)。共選出 6 項(xiàng)指標(biāo)，，Wilks ’ Lambda 值代表對(duì)判定函數(shù)的貢獻(xiàn)值，與其含量是否在雌雄魚(yú)間是否有顯著差異無(wú)關(guān)，結(jié)果見(jiàn)表 6。表3-6 逐步判別篩選結(jié)果 Tab.3-6 Result of stepwise discriminant analysis項(xiàng)目Item步驟Step引入指標(biāo)EnteredvariableF P Wilks ’Lambda
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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4 應(yīng)正河;RAPD、SRAP和ISSR標(biāo)記在香菇種質(zhì)資源的應(yīng)用及其SCAR標(biāo)記的建立[D];福建農(nóng)林大學(xué);2006年

本文編號(hào)：2650522