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TaCYP78A5基因的原核表達(dá)及轉(zhuǎn)基因小麥后代鑒定分析

發(fā)布時(shí)間:2024-11-27 21:24
  小麥?zhǔn)鞘澜缟现匾募Z食作物之一,其產(chǎn)量的提高對(duì)解決當(dāng)今日益嚴(yán)重的糧食短缺問題起著至關(guān)重要的作用。細(xì)胞色素P450是植物中最大的蛋白家族之一,其中CYP78A是其重要成員之一,許多CYP78A亞家族成員已被鑒定出在種子生長(zhǎng)發(fā)育過程中起著調(diào)節(jié)作用。本課題組通過同源克隆的方法分離得到TaCYP78A3和TaCYP78A5,并通過擬南芥的過表達(dá)和小麥BSMV-VIGS(大麥條斑花葉病毒誘導(dǎo)的基因沉默)證實(shí)其與籽粒大小有關(guān)。為進(jìn)一步研究TaCYP78A5基因的功能,本研究開展了以下研究:(1)TaCYP78A5的原核表達(dá)和蛋白純化利用生物信息學(xué)預(yù)測(cè)分析了TaCYP78A5氨基酸序列的結(jié)構(gòu)及基本理化性質(zhì),分析結(jié)果顯示該蛋白無信號(hào)肽,具有一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu),是親水蛋白。TaCYP78A5蛋白分子量為55.805 kD,理論pI值是8.32,共含有510個(gè)氨基酸,屬于不穩(wěn)定蛋白。去掉跨膜結(jié)構(gòu)的截短體TaCYP78A5蛋白和截短體融合蛋白GST-TaCYP78A5的蛋白分子量分別為51.973 kD和80.385 kD,理論pI值分別為8.71和7.00。以植物表達(dá)載體pCAMBIA3301-TaCYP78A5...

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1TaCYP78A5蛋白的信號(hào)肽分析

圖2-1TaCYP78A5蛋白的信號(hào)肽分析

圖2-1TaCYP78A5蛋白的信號(hào)肽分析Fig.2-1SignalpeptideanalysisofTaCYP78A5protein


圖2-2TaCYP78A5蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)分析

圖2-2TaCYP78A5蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)分析

圖2-2TaCYP78A5蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)分析Fig.2-2AnalysisoftransmembranestructureofTaCYP78A5prote


圖2-3TaCYP78A5蛋白的親疏水性分析

圖2-3TaCYP78A5蛋白的親疏水性分析

圖2-3TaCYP78A5蛋白的親疏水性分析Fig.2-3AnalysisofhydrophobicityofTaCYP78A5protein性質(zhì)分析aram對(duì)TaCYP78A5蛋白基本理化性質(zhì)進(jìn)行分析,結(jié)果5.805kD,理論pI值是8.32,共....


圖2-4TaCYP78A5基因PCR擴(kuò)增M.MarkerD2000;1-2.TaCYP78A5基因擴(kuò)增產(chǎn)物

圖2-4TaCYP78A5基因PCR擴(kuò)增M.MarkerD2000;1-2.TaCYP78A5基因擴(kuò)增產(chǎn)物

2-4TaCYP78A5基因PCR擴(kuò)rD2000;1-2.TaCYP78A5基因PCRamplificationofTaCYP782000;1-2.PCRproductsofTaCR(圖2-5A)鑒定為陽性



本文編號(hào):4012707

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