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丹參miR156前體序列的克隆及功能研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-11 20:39
  丹參(Salvia miltiorrhizaBunge),唇形科多年生藥用植物,其根部是我國傳統(tǒng)大宗藥材,在治療心腦血管疾病、組織損傷、血脂升高等方面具有很好的療效,被譽(yù)為“藥用模式植物”,F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí),丹參的主要藥用成分可分為以酚酸類為代表的水溶性化合物和以丹參酮類為主的脂溶性物質(zhì)。miR156是一類進(jìn)化非常保守的非編碼小RNA,是植物中目前已知的唯一年齡因子。已有研究表明,miR156不僅調(diào)控植物的生長發(fā)育(包括生殖轉(zhuǎn)型、形態(tài)建成、雌配子發(fā)育、表皮毛發(fā)育、側(cè)根生長、開花時(shí)間、生物量),同時(shí)也影響植物抗性以及次生代謝產(chǎn)物的積累。本論文以“藥用模式植物”丹參為主要研究對(duì)象,從中克隆得到miR156前體序列—Sm-MIR156a,通過對(duì)Sm-MIR156a進(jìn)行過表達(dá)和干涉研究,探究miR156對(duì)丹參生長及次生代謝含量的影響。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1、基于保守的成熟Sm-miR156序列,從丹參基因組Survey數(shù)據(jù)庫中搜索并克隆得到長度為465bp的丹參miR156前體序列—Sm-MIR156a;生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),Sm-MIR156a的可形成穩(wěn)定的二級(jí)莖環(huán)結(jié)構(gòu);以不同植物miR...

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1丹參細(xì)-M7i^5(5a擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)??M:?DL2000?marker;?1:以DNA為模板的擴(kuò)增產(chǎn)物;2:以cDNA為模板的擴(kuò)增產(chǎn)物??

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運(yùn)用軟件Clustal?W對(duì)M/W56a進(jìn)行多序列比對(duì)分析,比對(duì)結(jié)果顯示M/幻5仏??在不同物種間有很高的保守性,以MEGA5.2軟件,通過Neighbor-Joining方法,??構(gòu)建不同物種MW?75如系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖2-2)。進(jìn)化樹結(jié)果顯示,M//J75如在各??物種間進(jìn)化非....


圖2-2?如系統(tǒng)進(jìn)化樹??Fig.?2-2?Phylogenetic?analysis?of?Sm-MIRl?56a?protein?with?other?related?proteins.??

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圖2-4丹參miR?156成熟序列堿基保守性分析??Fig.2-4?S.?miltiorrhiza?conserved?nucleotide?sequences?analysis?of?miR156??

圖2-4丹參miR?156成熟序列堿基保守性分析??Fig.2-4?S.?miltiorrhiza?conserved?nucleotide?sequences?analysis?of?miR156??

能為-75.00?kcal/mol,能形成穩(wěn)定的莖環(huán)結(jié)構(gòu),miR156/miR156*雙鏈結(jié)構(gòu)區(qū)分別位??于莖環(huán)結(jié)構(gòu)的兩臂,miR156成熟序列(5'-UGACAGAAGAGAGUGAGCAC-3')位??于莖環(huán)結(jié)構(gòu)31端(圖2-3箭頭所指位置)。在。遥危翑(shù)據(jù)庫miRbase?....


圖2-8?Sw-M/及/5如在丹參相同組織不同時(shí)期的相對(duì)表達(dá)水平??Rl、SI、L1代表1個(gè)月丹參幼苗的根、莖、葉;R3、S3、L3代表3個(gè)月丹參幼苗的根、莖、??葉??

圖2-8?Sw-M/及/5如在丹參相同組織不同時(shí)期的相對(duì)表達(dá)水平??Rl、SI、L1代表1個(gè)月丹參幼苗的根、莖、葉;R3、S3、L3代表3個(gè)月丹參幼苗的根、莖、??葉??

基?wrtigtm?mw?ton*??圖2-7?在丹參同組織不同部位的相對(duì)表達(dá)水平??注:*、**、***表示有顯著差異(尸<0.05、0.01、0.001)??Fig.?2-7?Relative?expression?level?of?Sm-MIRl?56a?in?differ....



本文編號(hào):3951115

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