GbWOX9基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及對海島棉胚性細(xì)胞的遺傳轉(zhuǎn)化
發(fā)布時間:2024-01-23 19:08
植物分生組織的干細(xì)胞是植物形態(tài)建成、器官持續(xù)再生的關(guān)鍵。WUS/WOX家族成員在植物分生組織的干細(xì)胞中特異表達(dá),在植物器官發(fā)育過程中以及細(xì)胞類型轉(zhuǎn)變中發(fā)揮著重要作用。本研究以海島棉“新海16”為材料,克隆WOX/WUS轉(zhuǎn)錄因子家族的成員中與植物胚胎發(fā)育相關(guān)的基因GbWOX9,并對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)預(yù)測分析、亞細(xì)胞定位預(yù)測、同源進(jìn)化分析及不同體細(xì)胞胚階段的表達(dá)分析,同時,構(gòu)建化學(xué)誘導(dǎo)型的GbWOX9正、反義植物表達(dá)載體,借助農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將GbWOX9基因?qū)氲健靶潞?6”的正、反義胚性細(xì)胞中并對其在不同誘導(dǎo)劑濃度處理過的細(xì)胞組織的表達(dá)模式進(jìn)行分析。主要研究結(jié)果如下:1.利用PCR技術(shù)對GbWOX9基因進(jìn)行克隆,借助相關(guān)的在線軟件及DANMAN、MEGA5等對該基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果表明該基因包括1038 bp的開放閱讀框,編碼345個氨基酸,在線預(yù)測其蛋白分子量約為38.26 kD,等電點為6.7。通過氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn),序列中含有一個保守的由65個氨基酸組成的DNA結(jié)合域,即同源異型結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明海島棉GbWOX9蛋白與亞洲棉GaWOX9蛋白分布在同一分支上,...
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
本文編號:3883207
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【學(xué)位級別】:碩士
圖1-1頂端分生組織結(jié)構(gòu)圖
圖1-2WOX家族進(jìn)化樹
圖2-1RNA電泳圖
圖2-2GbWOX9基因PCR產(chǎn)物電泳分析
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