葉片是水稻進行光合作用最重要的器官,功能葉早衰將影響水稻產(chǎn)量和品質(zhì)。因此,研究葉片早衰的分子生理機制對培育耐早衰優(yōu)良品種具有重要意義。本課題組從60Co輻射誘變的中秈恢復(fù)系N142后代中獲得葉片早衰突變體ospls3(Oryza sativa precocious leaf senescence 3)。本研究從生理、細(xì)胞和分子等角度研究了突變體ospls3,并利用圖位克隆技術(shù)分離克隆了OsPLS3基因,這為深入研究該突變體葉片早衰的分子生理機制奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、田間結(jié)果表明,突變體ospls3葉片早衰表型始于分蘗期(約4～5片葉齡時),之后隨著葉齡的增加,除心葉外,其他葉片均不同程度早衰;孕穗后期所有葉片均早衰。由于葉片早衰,導(dǎo)致突變體ospls3的主要農(nóng)藝性狀,如株高、有效穗數(shù)、每穗粒數(shù)、結(jié)實率、千粒重和單株產(chǎn)量等均顯著低于野生型對照。2、遺傳分析結(jié)果表明,突變體ospls3的葉片早衰性狀受1對隱性核基因控制。利用圖位克隆技術(shù)將OsPLS3基因定位在第12號染色體的RM28723和RM28753兩個SSR標(biāo)記之間,其間物理距離為294kb。進一步測序分析該定位區(qū)間的基...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 文獻綜述
    1.1 葉片衰老概述
    1.2 葉片衰老的主要生理生化特征
        1.2.1 活性氧累積
        1.2.2 葉綠素降解
        1.2.3 蛋白質(zhì)、核酸、脂類含量下降
        1.2.4 膜結(jié)構(gòu)的改變
    1.3 影響衰老的內(nèi)因
        1.3.1 脫落酸
        1.3.2 乙烯
        1.3.3 茉莉酸
        1.3.4 水楊酸
        1.3.5 細(xì)胞分裂素
        1.3.6 赤霉素
        1.3.7 生長素
        1.3.8 庫/源關(guān)系
    1.4 影響衰老的外因
        1.4.1 栽培管理
        1.4.2 鹽脅迫
        1.4.3 水分脅迫
        1.4.4 黑暗誘導(dǎo)衰老
        1.4.5 溫度逆境
        1.4.6 礦質(zhì)元素
    1.5 衰老假說
    1.6 本研究的意義
第二章 水稻葉片早衰基因OSPLS3的圖位克隆及其功能研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 主要農(nóng)藝性狀調(diào)查
        2.1.3 DNA提取
        2.1.4 SSR標(biāo)記分析
        2.1.5 遺傳分析及定位群體構(gòu)建
        2.1.6 候選基因分析及測序
        2.1.7 互補載體構(gòu)建
        2.1.8 水稻遺傳轉(zhuǎn)化
        2.1.9 轉(zhuǎn)基因植株表型鑒定和分子檢測
        2.1.10 實時定量PCR分析
        2.1.11 葉綠素含量測定
        2.1.12 葉片透射電鏡觀察
        2.1.13 超氧陰離子自由基含量測定
        2.1.14 過氧化氫含量測定
        2.1.15 組織化學(xué)染色
        2.1.16 丙二醛含量測定
        2.1.17 離子滲漏率測定
        2.1.18 氯化鈉、甘露醇、H₂O₂和6-BA的種子處理
        2.1.19 H₂O₂和6-BA的離體葉片處理
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 ospls3的田間表型
        2.2.2 OsPLS3遺傳分析與圖位克隆
        2.2.3 OsPLS3基因的時空表達分析
        2.2.4 突變體葉綠素含量及葉片TEM分析
        2.2.5 ROS累積及外源H₂O₂對ospls3的影響
        2.2.6 葉片膜生理指標(biāo)分析
        2.2.7 氯化鈉和甘露醇對ospls3的影響
        2.2.8 外源6-BA對ospls3的影響
    2.3 討論
        2.3.1 OsPLS3負(fù)調(diào)控水稻葉片衰老
        2.3.2 ROS在ospls3葉片早衰中發(fā)揮重要作用
        2.3.3 6-BA和乙烯參與調(diào)控OsPLS3
第三章 全文總結(jié)和展望
    3.1 全文總結(jié)
    3.2 展望
參考文獻



本文編號：3876239