老化處理導(dǎo)致種子萌發(fā)后期能量及物質(zhì)供應(yīng)能力降低,但對種子萌發(fā)初期的貯藏物的動員及人工老化對物質(zhì)代謝調(diào)控的研究還較少。本論文以玉米“大白頭”種子為材料,研究了人工老化對種子萌發(fā)初期可溶性糖含量,糖酵解途徑、三羧酸循環(huán)和戊糖磷酸途徑關(guān)鍵酶活性、ATP含量、糖類代謝關(guān)鍵酶相關(guān)基因表達的影響,以期進一步完善種子老化機理。結(jié)果如下:1)人工老化處理對種子吸水的影響未老化種子(對照)在吸脹0-24h吸水呈快--慢的變化模式,0-8h為快速吸水階段,8-24h為慢速吸水階段,吸脹24h時胚根即將突破種皮;人工老化的種子在吸脹0-24h吸水率與對照均無顯著性差異。2)人工老化處理對種子萌發(fā)初期可溶性糖含量的影響利用UPLC法檢測到種子胚中的蔗糖含量最高,占總可溶性糖含量的91%,說明玉米種子中的可溶性糖主要以蔗糖的形式貯藏在胚中。對照種子吸脹0-24h,蔗糖含量逐漸降低,同時果糖和葡萄糖含量升高至16h時達到峰值,而后降低,說明吸脹過程蔗糖可能轉(zhuǎn)化為單糖,后者通過糖酵解途徑被進一步利用;老化種子吸脹0-24h,蔗糖含量先降低后升高,而果糖和葡萄糖含量的變化模式隨著老化加劇而逐漸喪失規(guī)律。說明老化可能抑...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
1 文獻綜述
    1.1 種子萌發(fā)、種子老化、種子活力定義
    1.2 種子活力的影響因素
    1.3 種子萌發(fā)及老化的生理生化研究
        1.3.1 種子吸水規(guī)律的變化
        1.3.2 儲藏物的變化
        1.3.3 能量代謝和ATP含量的變化
        1.3.4 酶活性的變化
        1.3.5 可溶性糖的變化的變化
2 引言
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 技術(shù)路線
3 材料與方法
    3.1 材料與處理
    3.2 種子發(fā)芽率的測定
    3.3 種子吸水率測定
    3.4 可溶性糖的提取與測定
        3.4.1 可溶性糖的提取
        3.4.2 可溶性糖的測定
    3.5 糖代謝關(guān)鍵酶活性的提取與測定
        3.5.1 己糖激酶（HXK）
            3.5.1.1 己糖激酶粗酶樣品的制備
            3.5.1.2 蛋白濃度測定
            3.5.1.3 己糖激酶活性測定
        3.5.2 磷酸果糖激酶(PFK)
            3.5.2.1 磷酸果糖激酶粗酶樣品的制備
            3.5.2.2 蛋白濃度測定
            3.5.2.3 磷酸果糖激酶活性測定
        3.5.3 丙酮酸激酶（PK）
            3.5.3.1 丙酮酸激酶粗酶樣品的制備
            3.5.3.2 蛋白濃度測定
            3.5.3.3 丙酮酸激酶活性測定
        3.5.4 檸檬酸合酶（CS）
            3.5.4.1 檸檬酸合酶粗酶樣品的制備
            3.5.4.2 蛋白濃度測定
            3.5.4.3 檸檬酸合酶活性測定
        3.5.5 葡萄糖6磷酸脫氫酶（G6PD）
            3.5.5.1 葡萄糖6磷酸脫氫酶粗酶樣品的制備
            3.5.5.2 蛋白濃度測定
            3.5.5.3 葡萄糖6磷酸脫氫酶活性測定
    3.6 ATP含量的測定
        3.6.1 ATP的提取
        3.6.2 發(fā)光反應(yīng)液的配置
        3.6.3 ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線的配置
        3.6.4 樣品測定
    3.7 糖代謝關(guān)鍵酶相關(guān)基因的實時熒光定量qRT-PCR檢測
        3.7.1 RNA提取
        3.7.2 RNA質(zhì)量檢測
        3.7.3 cDNA第一鏈合成
        3.7.4 qRT-PCR的引物設(shè)計
        3.7.5 實時熒光定量PCR（qRT-PCR）
    3.8 糖代謝中間物質(zhì)含量的測定
        3.8.1 樣品的提取
        3.8.2 樣品的測定
    3.9 數(shù)據(jù)處理
4 結(jié)果與分析
    4.1 人工老化處理對種子吸水率的影響
    4.2 人工老化處理對種子萌發(fā)初期可溶性糖的影響
        4.2.1 種子中可溶性糖的分布及種類
        4.2.2 人工老化過程胚中可溶性糖含量的變化
            4.2.2.1 人工老化過程胚中麥芽糖的變化
            4.2.2.2 人工老化過程胚中蔗糖的變化
            4.2.2.3 人工老化過程胚中果糖的變化
            4.2.2.4 人工老化過程胚中葡萄糖的變化
        4.2.3 人工老化過程胚乳中可溶性糖含量的變化
            4.2.3.1 人工老化過程胚乳中蔗糖的變化
            4.2.3.2 人工老化過程胚乳中果糖的變化
            4.2.3.3 人工老化過程胚乳中葡萄糖的變化
    4.3 人工老化處理對種子萌發(fā)初期糖代謝途徑關(guān)鍵酶活性的影響
        4.3.1 人工老化處理對糖酵解途徑關(guān)鍵酶活性的影響
            4.3.1.1 人工老化過程中己糖激酶活性的變化
            4.3.1.2 人工老化過程中磷酸果糖激酶活性的變化
            4.3.1.3 人工老化過程中丙酮酸激酶活性的變化
        4.3.2 人工老化處理對三羧酸循環(huán)關(guān)鍵酶活性的影響
        4.3.3 人工老化處理對戊糖磷酸途徑關(guān)鍵酶活性的影響
    4.4 人工老化對種子糖代謝中間物質(zhì)的影響
    4.5 人工老化處理對種子萌發(fā)初期種胚內(nèi)ATP含量的影響
    4.6 人工老化處理對種子糖代謝調(diào)控的影響
    4.7 人工老化處理對糖代謝關(guān)鍵酶相關(guān)基因表達的影響
5 結(jié)論與討論
    5.1 討論
        5.1.1 人工老化處理使種子在萌發(fā)初期可溶性糖的動員受到阻礙
        5.1.2 人工老化處理使種子在萌發(fā)初期糖代謝失調(diào)
        5.1.3 人工老化處理使種子在萌發(fā)初期ATP產(chǎn)生受到抑制
    5.2 結(jié)論
參考文獻
ABSTRACT



本文編號：3828058