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甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系SaNa-1A敗育機(jī)制初探及育性相關(guān)microRNA的挖掘

發(fā)布時(shí)間:2023-03-19 06:24
  細(xì)胞質(zhì)雄性不育是油菜雜種優(yōu)勢(shì)利用的最有效的方式之一。目前對(duì)油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育的研究主要包括不育基因的來(lái)源、結(jié)構(gòu)特征、作用機(jī)理以及育性恢復(fù)基因的分子機(jī)制等。本研究使用的材料是從白芥和甘藍(lán)型油菜體細(xì)胞雜種后代中選育出穩(wěn)定的不育系SaNa-1A以及對(duì)應(yīng)保持系SaNa-1B,并對(duì)其敗育機(jī)制進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)、分子水平的研究,同時(shí)也通過(guò)小RNA測(cè)序篩選出一些可能與育性相關(guān)的小RNA,探究其在調(diào)控雄性不育中的作用。其結(jié)果如下:(1)通過(guò)對(duì)新型甘藍(lán)型油菜不育系和保持系花器官形態(tài)比較發(fā)現(xiàn),不育系花器官明顯較小,且雄蕊發(fā)育不良,花粉囊內(nèi)無(wú)成熟花粉粒。花藥半薄切片比較觀察發(fā)現(xiàn),單核時(shí)期不育系小孢子內(nèi)容物消失僅剩下細(xì)胞核,絨氈層液泡化嚴(yán)重并與藥室內(nèi)壁分離,最終絨氈層包裹著小孢子并與其一起在不開(kāi)裂的藥室內(nèi)降解退化,推測(cè)其敗育發(fā)生原因可能是絨氈層沒(méi)有正常降解所致。進(jìn)一步比較兩個(gè)材料超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),從花粉母細(xì)胞時(shí)期開(kāi)始不育系的花粉母細(xì)胞內(nèi)一些細(xì)胞器膜結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常,細(xì)胞核與核仁都要小于保持系,并且細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)較多的液泡;四分體時(shí)期至單核后期小孢子外雖有孢粉素的積累但內(nèi)部核仁等結(jié)構(gòu)逐漸消失,內(nèi)容物降解,液泡化嚴(yán)重,絨氈層在單核...

【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文對(duì)照表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 細(xì)胞質(zhì)雄性不育
    1.2 植物線粒體基因組與CMS的關(guān)系
        1.2.1 來(lái)源于complex Ⅰ(NADH脫氫酶)的CMS相關(guān)開(kāi)放式閱讀框
        1.2.2 來(lái)源于complex Ⅳ(細(xì)胞色素氧化酶)的CMS相關(guān)開(kāi)放式閱讀框
        1.2.3 來(lái)源于complex Ⅴ(FOF1-ATPase)的CMS相關(guān)開(kāi)放式閱讀框
        1.2.4 來(lái)源于其他序列與CMS有關(guān)的開(kāi)放式閱讀框
    1.3 植物miRNA的研究進(jìn)展
        1.3.1 miRNA的形成機(jī)制
        1.3.2 miRNA的作用機(jī)制
        1.3.3 miRNA的功能
        1.3.4 植物miRNA與雄性不育
    1.4 研究目的與意義
2 新型甘藍(lán)型油菜CMS系SaNa-1A敗育的細(xì)胞學(xué)研究
    2.0 前言
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 保持系和不育系花器官形態(tài)分析
        2.2.2 不育系和保持系花藥發(fā)育的細(xì)胞學(xué)研究
        2.2.3 不育系和保持系各發(fā)育時(shí)期花藥超微結(jié)構(gòu)比較
        2.2.4 花藥中H2O2亞細(xì)胞定位
        2.2.5 花藥絨氈層細(xì)胞凋亡檢測(cè)檢測(cè)
    2.3 討論
        2.3.1 新型甘藍(lán)型油菜CMS系SaNa-1A花藥敗育時(shí)期
        2.3.2 新型甘藍(lán)型油菜SaNa-1A花藥敗育的細(xì)胞學(xué)機(jī)制
        2.3.3 活性氧代謝與CMS
        2.3.4 絨氈層細(xì)胞程序性死亡與CMS
3 CMS相關(guān)的miRNA及其靶基因
    3.0 前言
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 miRNA測(cè)序數(shù)據(jù)處理與分析
        3.2.1 小RNA的分類(lèi)與注釋
        3.2.2 miRNA差異表達(dá)分析
        3.2.3 miRNA靶基因的預(yù)測(cè)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 花藥總RNA的提取
        3.3.2 miRNA高通量測(cè)序數(shù)據(jù)基本生物信息學(xué)分析
        3.3.3 定量驗(yàn)證差異表達(dá)miRNA和靶基因的表達(dá)量
        3.3.4 利用5'RLM-RACE精確驗(yàn)證靶基因剪切位點(diǎn)
    3.4 討論
4 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
研究生期間發(fā)表的與碩士論文有關(guān)的文章



本文編號(hào):3764744

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