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甘藍型油菜細胞質(zhì)雄性不育系SaNa-1A敗育機制初探及育性相關(guān)microRNA的挖掘

發(fā)布時間:2023-03-19 06:24
  細胞質(zhì)雄性不育是油菜雜種優(yōu)勢利用的最有效的方式之一。目前對油菜細胞質(zhì)雄性不育的研究主要包括不育基因的來源、結(jié)構(gòu)特征、作用機理以及育性恢復基因的分子機制等。本研究使用的材料是從白芥和甘藍型油菜體細胞雜種后代中選育出穩(wěn)定的不育系SaNa-1A以及對應保持系SaNa-1B,并對其敗育機制進行了細胞學、分子水平的研究,同時也通過小RNA測序篩選出一些可能與育性相關(guān)的小RNA,探究其在調(diào)控雄性不育中的作用。其結(jié)果如下:(1)通過對新型甘藍型油菜不育系和保持系花器官形態(tài)比較發(fā)現(xiàn),不育系花器官明顯較小,且雄蕊發(fā)育不良,花粉囊內(nèi)無成熟花粉粒;ㄋ幇氡∏衅容^觀察發(fā)現(xiàn),單核時期不育系小孢子內(nèi)容物消失僅剩下細胞核,絨氈層液泡化嚴重并與藥室內(nèi)壁分離,最終絨氈層包裹著小孢子并與其一起在不開裂的藥室內(nèi)降解退化,推測其敗育發(fā)生原因可能是絨氈層沒有正常降解所致。進一步比較兩個材料超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),從花粉母細胞時期開始不育系的花粉母細胞內(nèi)一些細胞器膜結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常,細胞核與核仁都要小于保持系,并且細胞內(nèi)出現(xiàn)較多的液泡;四分體時期至單核后期小孢子外雖有孢粉素的積累但內(nèi)部核仁等結(jié)構(gòu)逐漸消失,內(nèi)容物降解,液泡化嚴重,絨氈層在單核...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文對照表
1 文獻綜述
    1.1 細胞質(zhì)雄性不育
    1.2 植物線粒體基因組與CMS的關(guān)系
        1.2.1 來源于complex Ⅰ(NADH脫氫酶)的CMS相關(guān)開放式閱讀框
        1.2.2 來源于complex Ⅳ(細胞色素氧化酶)的CMS相關(guān)開放式閱讀框
        1.2.3 來源于complex Ⅴ(FOF1-ATPase)的CMS相關(guān)開放式閱讀框
        1.2.4 來源于其他序列與CMS有關(guān)的開放式閱讀框
    1.3 植物miRNA的研究進展
        1.3.1 miRNA的形成機制
        1.3.2 miRNA的作用機制
        1.3.3 miRNA的功能
        1.3.4 植物miRNA與雄性不育
    1.4 研究目的與意義
2 新型甘藍型油菜CMS系SaNa-1A敗育的細胞學研究
    2.0 前言
    2.1 實驗材料和方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 實驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 保持系和不育系花器官形態(tài)分析
        2.2.2 不育系和保持系花藥發(fā)育的細胞學研究
        2.2.3 不育系和保持系各發(fā)育時期花藥超微結(jié)構(gòu)比較
        2.2.4 花藥中H2O2亞細胞定位
        2.2.5 花藥絨氈層細胞凋亡檢測檢測
    2.3 討論
        2.3.1 新型甘藍型油菜CMS系SaNa-1A花藥敗育時期
        2.3.2 新型甘藍型油菜SaNa-1A花藥敗育的細胞學機制
        2.3.3 活性氧代謝與CMS
        2.3.4 絨氈層細胞程序性死亡與CMS
3 CMS相關(guān)的miRNA及其靶基因
    3.0 前言
    3.1 實驗材料和方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 實驗方法
    3.2 miRNA測序數(shù)據(jù)處理與分析
        3.2.1 小RNA的分類與注釋
        3.2.2 miRNA差異表達分析
        3.2.3 miRNA靶基因的預測
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 花藥總RNA的提取
        3.3.2 miRNA高通量測序數(shù)據(jù)基本生物信息學分析
        3.3.3 定量驗證差異表達miRNA和靶基因的表達量
        3.3.4 利用5'RLM-RACE精確驗證靶基因剪切位點
    3.4 討論
4 總結(jié)
參考文獻
附錄
致謝
研究生期間發(fā)表的與碩士論文有關(guān)的文章



本文編號:3764744

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