現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,蛹蟲草含有蟲草素、腺苷、多糖、蟲草酸、麥角甾醇等多種活性物質(zhì),具有抗氧化、抗菌、抗病毒、提高免疫力等功效,并因其具有相似的活性成分而成為傳統(tǒng)名貴中藥材——冬蟲夏草的良好替代品。蛹蟲草已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了規(guī)�；斯ぴ耘�,以解決冬蟲夏草產(chǎn)品的市場(chǎng)供應(yīng)不足問題。但蛹蟲草菌株在繼代培養(yǎng)過程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的菌株退化現(xiàn)象,影響了子實(shí)體的發(fā)育,造成蛹蟲草的規(guī)�；a(chǎn)的損失。本研究以生產(chǎn)用蛹蟲草菌株YCCZ為母株,接種于大米培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)蛹蟲草菌株六代(命名:YCCZ1-6),觀察各世代蛹蟲草子實(shí)體的發(fā)育,研究其交配型基因的表達(dá)差異,分析判定菌株退化時(shí)期,比較研究退化前后蛹蟲草菌株活性物質(zhì)含量的變化,通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析研究這六代蛹蟲草菌株間可變剪接、差異表達(dá)基因以及GO(Gene ontology)通路和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路的變化,以期探討蛹蟲草菌株的退化機(jī)制。具體研究結(jié)果如下:一、蛹蟲草菌株的繼代培養(yǎng)和退化分析通過繼代培養(yǎng)得到的6代蛹蟲草菌株,子實(shí)體發(fā)育情況表明,第1代和第2代菌株子實(shí)體長勢(shì)一致,色澤橙黃,生長狀況良...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 蛹蟲草簡介
        1.1.1 蛹蟲草的分類學(xué)地位
        1.1.2 蛹蟲草的活性物質(zhì)和功能
        1.1.3 蛹蟲草人工培養(yǎng)技術(shù)
    1.2 蛹蟲草菌種的退化
        1.2.1 蛹蟲草退化后表型的變化
        1.2.2 蛹蟲草退化的機(jī)制
        1.2.3 蛹蟲草退化的檢測(cè)和防治方法
    1.3 二代測(cè)序技術(shù)
        1.3.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序概述
        1.3.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)在真菌中的應(yīng)用
    1.4 本研究的目的和意義
第2章 蛹蟲草繼代培養(yǎng)及結(jié)實(shí)能力和交配型分析
    2.1 前言
    2.2 試驗(yàn)材料
        2.2.1 供試菌株與培養(yǎng)基
        2.2.2 主要藥品和試劑
        2.2.3 主要儀器與設(shè)備
    2.3 方法
        2.3.1 蛹蟲草菌絲體的繼代培養(yǎng)和收集
        2.3.2 蛹蟲草基因組的提取
        2.3.3 蛹蟲草不同傳代次數(shù)菌株交配型的判定
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 蛹蟲草不同傳代次數(shù)菌株子實(shí)體發(fā)育情況的分析
        2.4.2 蛹蟲草不同傳代次數(shù)菌株子實(shí)體交配型的分析
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第3章 不同世代蛹蟲草菌絲體中活性成分比較
    3.1 前言
    3.2 材料
        3.2.1 供試菌株與培養(yǎng)基
        3.2.2 主要藥品和試劑
        3.2.3 主要溶液的配制
        3.2.4 主要儀器與設(shè)備
    3.3 方法
        3.3.1 蛹蟲草菌絲體的繼代培養(yǎng)和收集
        3.3.2 蛹蟲草多糖的測(cè)定
        3.3.3 麥角甾醇的測(cè)定
        3.3.4 蟲草素和腺苷的測(cè)定
        3.3.5 蟲草酸的測(cè)定
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 不同世代蛹蟲草中多糖含量的變化
        3.4.2 不同世代蛹蟲草麥角甾醇含量的變化
        3.4.3 不同世代蛹蟲草中蟲草素和腺苷含量的變化
        3.4.4 不同傳代次數(shù)蛹蟲草中蟲草酸含量的變化
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第4章 蛹蟲草繼代培養(yǎng)菌株的轉(zhuǎn)錄組分析
    4.1 前言
    4.2 材料
        4.2.1 供試菌株與培養(yǎng)基
        4.2.2 主要藥品和試劑
        4.2.3 主要儀器與設(shè)備
    4.3 方法
        4.3.1 RNA的提取與檢測(cè)
        4.3.2 cDNA合成
        4.3.3 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制與處理
        4.3.4 轉(zhuǎn)錄組拼接與注釋
        4.3.5 GO分析與KEGG分析
        4.3.6 相關(guān)差異表達(dá)基因的qRT-PCR
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 樣品總RNA提取與質(zhì)量檢測(cè)
        4.4.2 測(cè)序讀取質(zhì)量檢測(cè)
        4.4.3 基因識(shí)別與評(píng)估
        4.4.4 表達(dá)量統(tǒng)計(jì)
        4.4.5 基因差異表達(dá)分析 (DEGs)
        4.4.6 GO和KEGG注釋和分析
        4.4.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
結(jié)論
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3740185