葉片早衰會(huì)影響水稻品質(zhì)和產(chǎn)量,因此研究水稻葉片早衰的分子機(jī)制對(duì)水稻的遺傳改良具有重要意義。突變體Esl10（early senescent leaf 10）來源于EMS（ethyl methane sulfonate）誘變秈型三系保持系西農(nóng)1B的突變體庫(kù)。與野生型相比,突變體葉片從四葉期開始表現(xiàn)出葉片黃化早衰表型,并且其葉片中淀粉及蔗糖大量積累。本研究對(duì)突變體Esl10進(jìn)行了表型鑒定、農(nóng)藝性狀分析、光合色素含量分析、光合特性分析、細(xì)胞學(xué)觀察、葉片糖含量測(cè)定、衰老相關(guān)生理指標(biāo)測(cè)定、光合相關(guān)基因差異表達(dá)分析、糖相關(guān)基因差異表達(dá)分析、遺傳分析及基因定位,為ESL10基因的克隆和功能分析奠定了基礎(chǔ)。其主要研究結(jié)果如下:1、表型及農(nóng)藝性狀分析田間種植情況下,突變體Esl10自四葉期開始葉片變黃,其黃化部位從葉尖逐漸延伸至葉片中下部,葉片基部微黃,該性狀一直持續(xù)至成熟期。與野生型相比,突變體Esl10的株高、穗長(zhǎng)、千粒重、每穗粒數(shù)顯著降低,分別降為野生型的92.63%、88.27%、88.91%和86.78%;此外,其有效穗數(shù)、每穗實(shí)粒數(shù)、一次枝梗數(shù)、分蘗數(shù)及結(jié)實(shí)率極顯著降低,分別降為野生型的64... 

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物衰老概述
    1.2 植物葉片衰老
        1.2.1 葉片衰老的基本特征
        1.2.2 葉片衰老的三個(gè)階段
        1.2.3 葉片衰老的機(jī)理
        1.2.4 葉片衰老相關(guān)基因的研究進(jìn)展
    1.3 水稻葉片早衰
        1.3.1 水稻葉片早衰的概述
        1.3.2 水稻葉片早衰突變體的研究
    1.4 植物葉片淀粉代謝和蔗糖代謝
        1.4.1 葉片淀粉代謝和蔗糖代謝的概述
        1.4.2 葉片淀粉代謝途徑
        1.4.3 葉片蔗糖代謝途徑
    1.5 水稻葉片淀粉代謝及蔗糖代謝研究進(jìn)展
第2章 引言
    2.1 研究目的及意義
    2.2 技術(shù)路線
第3章 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 主要菌株和質(zhì)粒
        3.1.3 主要生物試劑及試劑盒
        3.1.4 主要儀器設(shè)備
        3.1.5 主要試劑配方
    3.2 方法與步驟
        3.2.1 表型及農(nóng)藝性狀分析
        3.2.2 光合色素含量測(cè)定與光合特性分析
            3.2.2.1 光合色素含量測(cè)定
            3.2.2.2 光合特性分析
        3.2.3 細(xì)胞學(xué)觀察及碘-碘化鉀染色分析
            3.2.3.1 冷凍切片分析
            3.2.3.2 碘-碘化鉀染色分析
        3.2.4 糖含量測(cè)定
            3.2.4.1 淀粉含量測(cè)定
            3.2.4.2 蔗糖含量測(cè)定
        3.2.5 衰老相關(guān)生理指標(biāo)測(cè)定
        3.2.6 基因表達(dá)模式分析
            3.2.6.1 總RNA的提取、純化及質(zhì)量檢測(cè)
            3.2.6.2 cDNA的合成
            3.2.6.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
            3.2.6.4 光合色素合成以及葉綠體發(fā)育和光合相關(guān)基因的表達(dá)分析
            3.2.6.5 淀粉代謝和蔗糖代謝途徑相關(guān)基因表達(dá)分析
        3.2.7 基因組DNA提取、純化及PCR反應(yīng)
            3.2.7.1 基因組DNA的提取及快速純化
            3.2.7.2 用于基因定位的PCR反應(yīng)體系及程序
            3.2.7.3 用于測(cè)序分析的PCR反應(yīng)體系及程序
        3.2.8 分子標(biāo)記的開發(fā)與基因定位
            3.2.8.1 分子標(biāo)記的開發(fā)
            3.2.8.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳
            3.2.8.3 遺傳分析與基因定位
            3.2.8.4 遺傳圖譜構(gòu)建
        3.2.9 候選基因分析
            3.2.9.1 PCR產(chǎn)物的回收
            3.2.9.2 PCR產(chǎn)物的連接
            3.2.9.3 大腸桿菌感受態(tài)的制備
            3.2.9.4 遺傳轉(zhuǎn)化、測(cè)序及序列比對(duì)
第4章 結(jié)果與分析
    4.1 表型及農(nóng)藝性狀分析
    4.2 光合色素含量和光合特性分析
    4.3 葉片細(xì)胞學(xué)觀察
    4.4 葉片淀粉染色及淀粉和蔗糖含量測(cè)定
    4.5 生理特性分析
    4.6 光合色素合成及光合相關(guān)基因的表達(dá)分析
    4.7 淀粉代謝和蔗糖代謝途徑相關(guān)基因表達(dá)分析
    4.8 遺傳分析和基因定位
    4.9 候選基因分析
第5章 討論與結(jié)論
    5.1 討論
    5.2 主要結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在校期間所參加的科研課題和發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水稻葉片淀粉積累及早衰突變體esl9的鑒定與基因定位[J]. 肖艷華,陳新龍,杜丹,邢亞迪,張?zhí)烊?祝毛迪,劉明明,朱小燕,桑賢春,何光華.  作物學(xué)報(bào). 2017(04)
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[5]植物體內(nèi)糖分子的長(zhǎng)距離運(yùn)輸及其分子機(jī)制[J]. 張懿,張大兵,劉曼.  植物學(xué)報(bào). 2015(01)
[6]植物中SWEET基因家族研究進(jìn)展[J]. 劉暢,姜晶,韓曉雪,韓佳軒.  植物生理學(xué)報(bào). 2014(09)
[7]水稻葉片早衰突變體osled的生理特征與基因定位[J]. 趙晨晨,黃福燈,龔盼,楊茜,程方民,潘剛.  作物學(xué)報(bào). 2014(11)
[8]水稻早衰突變體esl5的鑒定及其基因精細(xì)定位[J]. 桑賢春,徐芳芳,朱小燕,邢亞迪,何沛龍,張長(zhǎng)偉,楊正林,何光華.  作物學(xué)報(bào). 2014(07)
[9]水稻葉片早衰及鹽敏感突變體osles的生理分析和基因精細(xì)定位[J]. 毛節(jié)景,趙晨晨,黃福燈,潘剛,程方民.  作物學(xué)報(bào). 2014(05)
[10]水稻早衰突變體esl3的鑒定與基因定位[J]. 苗潤(rùn)隆,蔣鈺東,廖紅香,徐芳芳,何光華,楊正林,趙芳明,桑賢春.  作物學(xué)報(bào). 2013(05)

博士論文
[1]水稻黃綠葉基因YGL8和YGL9的克隆與功能分析[D]. 王忠偉.西南大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3719798