水稻是世界上最重要的糧食作物之一,全球約二分之一以上的人口以稻米為主食,通過分子生物學(xué)的技術(shù)手段提高水稻的產(chǎn)量和品質(zhì)已經(jīng)成為水稻育種工作的重要內(nèi)容。水稻穗型,特別是每穗粒數(shù)作為一種重要的復(fù)雜農(nóng)藝性狀,一直以來是提高水稻產(chǎn)量的主要育種改良目標(biāo)。水稻穗粒數(shù)性狀的QTL,GNP1（Grain Number per Panicle 1）在作物高產(chǎn)育種中表現(xiàn)出增加總穗粒數(shù)和籽粒數(shù)的效應(yīng),遺傳分析表明OsGNP1（GA20ox1）基因編碼一個(gè)赤霉素合成相關(guān)氧化酶,可能通過參與KNOX家族轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的赤霉素和細(xì)胞分裂素之間的動(dòng)態(tài)平衡,調(diào)節(jié)水稻穗原基的發(fā)育,從而對(duì)水稻穗粒數(shù)表型有貢獻(xiàn)。為了進(jìn)一步明確OsGNP1基因的功能,以及其不同表達(dá)水平下對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育及穗型的影響,本研究利用實(shí)驗(yàn)室已有的CRISPR-Cas9體系,構(gòu)建了3個(gè)針對(duì)OsGNP1基因的定向編輯載體pZJP064、pZJP065、pZJP066,通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將上述載體分別導(dǎo)入水稻品種日本晴中,對(duì)獲得的T₀代轉(zhuǎn)基因水稻植株進(jìn)行OsGNP1基因突變體檢測(cè),并進(jìn)一步在T₁代中篩選... 

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 水稻簡(jiǎn)介
    1.2 水稻育種研究進(jìn)展
    1.3 水稻產(chǎn)量與植物激素的關(guān)系
        1.3.1 影響水稻高產(chǎn)的因素
        1.3.2 細(xì)胞分裂素CK及赤霉素GA與水稻穗發(fā)育關(guān)系
    1.4 利用CRISPR-Cas9技術(shù)創(chuàng)制突變體
    1.5 研究目的
        1.5.1 立題依據(jù)
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 工程菌株
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 水稻CRISPR-Cas9定向修飾骨架載體
        2.4.2 OsGNP1編碼區(qū)定向突變表達(dá)載體構(gòu)建
        2.4.3 OsGNP1基因啟動(dòng)子區(qū)大片段定向修飾表達(dá)載體構(gòu)建
        2.4.4 水稻原生質(zhì)體制備與轉(zhuǎn)化及活性驗(yàn)證
        2.4.5 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
        2.4.6 水稻再生植株轉(zhuǎn)基因陽性鑒定
        2.4.7 水稻基因組目標(biāo)位點(diǎn)定向修飾突變體材料鑒定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 水稻OsGNP1基因CRISPR-Cas9定向突變表達(dá)載體構(gòu)建
        3.1.1 OsGNP1基因編碼區(qū)定向突變表達(dá)載體構(gòu)建
        3.1.2 OsGNP1基因啟動(dòng)子區(qū)大片段刪除表達(dá)載體構(gòu)建
    3.2 水稻OsGNP1基因CRISPR-Cas9定向修飾表達(dá)載體活性驗(yàn)證
    3.3 水稻再生植株轉(zhuǎn)基因陽性鑒定
    3.4 水稻OsGNP1基因定向修飾突變體材料鑒定
        3.4.1 OsGNP1基因編碼區(qū)定向突變體T0代再生植株材料鑒定
        3.4.2 OsGNP1啟動(dòng)子區(qū)大片段定向刪除突變體材料鑒定
        3.4.3 OsGNP1基因編碼區(qū)定向突變體T1代植株材料鑒定
第四章 討論
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻碩期間取得的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雜交水稻培育的實(shí)踐和理論[J]. 袁隆平.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 1977(01)



本文編號(hào)：3718482