棉花（G.hirsutum）作為世界上主要的天然纖維來源,在70個國家種植,像其他作物一樣,棉花也遭受嚴(yán)重的生物/非生物脅迫。雖然常規(guī)育種、誘變育種和病蟲害管理措施提高了棉花的耐熱性、纖維品質(zhì)以及產(chǎn)量,但病蟲害、干旱、鹽漬等生物和非生物脅迫仍然嚴(yán)重威脅著棉花產(chǎn)業(yè)。不良環(huán)境（如低溫、高溫、干旱、鹽漬等）作用于植物,將會引起植物體內(nèi)發(fā)生一系列的生理代謝反應(yīng),表現(xiàn)為代謝和生長的不可逆性抑制,嚴(yán)重時甚至引起不可逆?zhèn)?導(dǎo)致整個植株死亡。棉花的耐旱性、耐鹽性均較糧食作物強(qiáng),隨著糧棉爭地矛盾的日益突出,不適宜糧食作物種植的旱地、鹽堿地、沿海灘涂成了棉花種植的另一個選擇。AtNEK6編碼一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,具有參與調(diào)控細(xì)胞周期的功能,并且與植物的生長發(fā)育和抗逆性相關(guān)。本研究通過在棉花中過表達(dá)AtNEK6,促進(jìn)了棉花的生長發(fā)育并提高了其耐鹽耐旱性。本研究取得的進(jìn)展如下:1.通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法,將AtNEK6基因轉(zhuǎn)化棉花,獲得T₂代轉(zhuǎn)基因株系。通過qRT-PCR檢測,結(jié)果表明基因在轉(zhuǎn)基因棉花的根、莖、葉中均有表達(dá);2.正常培養(yǎng)條件下,相較于野生型植株,轉(zhuǎn)基因株系的株高... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 抗逆轉(zhuǎn)基因棉花研究進(jìn)展
    1.2 NIMA相關(guān)激酶的研究進(jìn)展
        1.2.1 NIMA相關(guān)激酶家族
        1.2.2 人類中NIMA相關(guān)激酶的研究進(jìn)展
        1.2.3 植物NEK家族的進(jìn)化
        1.2.4 NEKs在植物中的研究進(jìn)展
    1.3 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌種和質(zhì)粒
        2.1.2 植物材料
    2.2 常用試劑及儀器
        2.2.1 常用試劑及試劑盒
        2.2.2 常用儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 陽性轉(zhuǎn)基因棉花篩選與鑒定
        2.3.2 CTAB法提取植物基因組DNA
        2.3.3 Southernblotting
        2.3.4 qRT-PCR檢測
        2.3.5 轉(zhuǎn)基因棉花表型分析
        2.3.6 根長、側(cè)根數(shù)、鮮重和干重比較
        2.3.7 溫室條件模擬耐鹽耐旱性實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 CAT、SOD活性和MDA含量檢測
        2.3.9 葉綠素相對含量(SPAD)測定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 轉(zhuǎn)基因陽性植株的鑒定和表達(dá)情況
    3.2 過表達(dá)AtNEK6轉(zhuǎn)基因棉花的表型分析
        3.2.1 過表達(dá)AtNEK6促進(jìn)了植株的生長發(fā)育
        3.2.2 細(xì)胞周期基因和生長發(fā)育基因的表達(dá)情況
    3.3 轉(zhuǎn)基因棉花的耐鹽耐旱性分析
        3.3.1 轉(zhuǎn)基因棉花在脅迫條件下根系的表型
        3.3.2 轉(zhuǎn)基因棉花的耐鹽耐旱性及生理指標(biāo)分析
        3.3.3 轉(zhuǎn)基因棉花的葉綠素相對含量(SPAD)分析
        3.3.4 逆境脅迫相關(guān)基因在轉(zhuǎn)基因棉花中的表達(dá)情況
第四章 結(jié)果討論
    4.1 在棉花中過表達(dá)AtNEK6對植物生長發(fā)育的影響
    4.2 AtNEK6對轉(zhuǎn)基因棉花幼苗的影響
    4.3 AtNEK6對植物的抗氧化能力的影響
    4.4 AtNEK6對植物光合作用的影響
    4.5 AtNEK6對植物響應(yīng)脅迫的標(biāo)記基因的表達(dá)的影響
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]淺述棉花的抗逆性與抗逆育種研究進(jìn)展[J]. 黃云,藍(lán)家樣,陳全求,韓光明,詹先進(jìn).  棉花科學(xué). 2015(01)
[2]棉花鹽害與耐鹽性的生理和分子機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 辛承松,董合忠,唐薇,溫四民.  棉花學(xué)報. 2005(05)
[3]我國鹽漬土資源及其綜合治理[J]. 張士功,邱建軍,張華.  中國農(nóng)業(yè)資源與區(qū)劃. 2000(01)



本文編號：3694000