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七株蜜環(huán)菌鑒定、生長條件篩選及其與天麻拌栽的適應(yīng)性研究

發(fā)布時間:2022-10-17 17:34
  蜜環(huán)菌(Armillaria mellea)具有很高的生態(tài)經(jīng)濟(jì)利用價值,是名貴藥用中藥材天麻的一種共生真菌,天麻的生長發(fā)育必須充分依靠蜜環(huán)菌為其生長提供所需的營養(yǎng)。蜜環(huán)菌因使用時間的增加,加上天麻種植戶和菌種生產(chǎn)商的培養(yǎng)管理不當(dāng),使得菌種循環(huán)使用發(fā)生了嚴(yán)重功能退化等不良的現(xiàn)象,尋找和獲得具有優(yōu)勢性的蜜環(huán)菌已經(jīng)成為我國天麻產(chǎn)業(yè)努力的目標(biāo)之一。本試驗(yàn)主要通過以下幾個方面的科學(xué)研究,篩選研制出優(yōu)良蜜環(huán)菌菌株用于天麻生產(chǎn)。第一,通過對七株蜜環(huán)菌的分子鑒定,確定七株蜜環(huán)菌之間的科學(xué)分類關(guān)系地位及其親緣關(guān)系;第二,為解決上述問題,本研究通過對七株蜜環(huán)菌的生長條件進(jìn)行篩選,探索七株蜜環(huán)菌的生長特點(diǎn),篩選出適宜蜜環(huán)菌生長的優(yōu)良條件。第三,將七株蜜環(huán)菌與三種類型天麻進(jìn)行拌栽試驗(yàn),即與天麻的適應(yīng)性研究,篩選出與不同類型天麻適應(yīng)性高的菌株。綜合以上試驗(yàn)結(jié)果,為篩選栽培天麻的優(yōu)質(zhì)蜜環(huán)菌菌種提供一定理論依據(jù)和技術(shù)支持。本試驗(yàn)的主要研究成果如下:1.對七株蜜環(huán)菌的生物種分子鑒定。通過試驗(yàn)提取了七株蜜環(huán)菌的DNA,進(jìn)行r DNA-ITS和r DNA-TEF序列擴(kuò)增,構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,對七株蜜環(huán)菌進(jìn)行物種鑒定及親緣關(guān)系... 

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 蜜環(huán)菌研究進(jìn)展
        1.1.1 蜜環(huán)菌簡介
        1.1.2 蜜環(huán)菌形態(tài)特征
        1.1.3 蜜環(huán)菌生長條件研究進(jìn)展
        1.1.4 蜜環(huán)菌的分類研究進(jìn)展
    1.2 天麻研究進(jìn)展
        1.2.1 天麻的介紹
        1.2.2 天麻栽培技術(shù)研究進(jìn)展
        1.2.3 天麻化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展
    1.3 蜜環(huán)菌與天麻共生關(guān)系的研究進(jìn)展
        1.3.1 天麻生長與蜜環(huán)菌的各個階段
        1.3.2 蜜環(huán)菌對天麻的浸染
        1.3.3 蜜環(huán)菌優(yōu)良品種篩選的研究進(jìn)展
    1.4 研究目的及意義
第二章 七株蜜環(huán)菌鑒定
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 菌種來源
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 菌種活化
        2.2.2 七株蜜環(huán)菌DNA的提取
        2.2.3 r DNA-ITS的擴(kuò)增
        2.2.4 r DNA-TEF的擴(kuò)增
        2.2.5 PCR產(chǎn)物檢測和測序
        2.2.6 序列分析
        2.2.7 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 蜜環(huán)菌分子鑒定結(jié)果
    2.5 小結(jié)
第三章 七株蜜環(huán)菌生長條件研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 供試菌株
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要試劑及培養(yǎng)基
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 營養(yǎng)條件篩選
        3.2.2 環(huán)境條件篩選
    3.3 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 不同碳源對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
        3.4.2 不同氮源對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
        3.4.3 不同培養(yǎng)基對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
        3.4.4 不同溫度對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
        3.4.5 不同光照對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
        3.4.6 不同pH對蜜環(huán)菌菌索生長的影響
    3.5 小結(jié)
第四章 七株蜜環(huán)菌與三種類型天麻拌栽的適應(yīng)性研究
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 其他材料
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 主要試劑
    4.2 試驗(yàn)地點(diǎn)
    4.3 試驗(yàn)方法
        4.3.1 蜜環(huán)菌二級半固體母種培養(yǎng)
        4.3.2 蜜環(huán)菌三級栽培種制備
        4.3.3 不同蜜環(huán)菌與天麻蒴果的有性栽培
        4.3.4 不同蜜環(huán)菌與天麻的無性栽培
            4.3.4.1 固定菌床
            4.3.4.2 下種
    4.4 測定項(xiàng)目及方法
        4.4.1 天麻產(chǎn)量的測定
        4.4.2 水分測定
        4.4.3 灰分測定
        4.4.4 浸出物測定
        4.4.5 多糖測定
        4.4.6 天麻素和對羥基苯甲醇測定
            4.4.6.1 色譜條件
            4.4.6.2 對照品溶液的制備
            4.4.6.3 供試品溶液的制備
            4.4.6.4 測定法
    4.5 數(shù)據(jù)處理
    4.6 結(jié)果與分析
        4.6.1 蜜環(huán)菌與天麻的有性栽培
            4.6.1.1 不同蜜環(huán)菌對紅天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
            4.6.1.2 不同蜜環(huán)菌對烏天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
            4.6.1.3 不同蜜環(huán)菌對綠天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
        4.6.2 蜜環(huán)菌與天麻的無性栽培
            4.6.2.1 不同蜜環(huán)菌對紅天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
            4.6.2.2 不同蜜環(huán)菌對烏天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
            4.6.2.3 不同蜜環(huán)菌對綠天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
        4.6.3 七株蜜環(huán)菌與天麻拌栽后藥材的成分含量變化
            4.6.3.1 有性栽培方式
            4.6.3.2 無性栽培方式
        4.6.4 七株蜜環(huán)菌對三種天麻主要藥用成分含量的影響
            4.6.4.1 有性栽培方式
            4.6.4.2 無性栽培方式
    4.7 小結(jié)
        4.7.1 不同蜜環(huán)菌菌株對天麻產(chǎn)量和數(shù)量的影響
        4.7.2 不同蜜環(huán)菌菌株對天麻有效成分的影響
        4.7.3 不同蜜環(huán)菌菌株對天麻藥用成分含量的影響
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
圖版


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[8]不同樹種菌材對貴州仿野生栽培天麻的影響[J]. 劉威,趙致,王華磊,羅夫來,李金玲,羅春麗.  北方園藝. 2015(10)
[9]基于主成分分析的天麻礦質(zhì)元素含量研究[J]. 李金玲,趙致,劉紅昌,羅春麗,黃明進(jìn),羅夫來,王華磊.  中國中藥雜志. 2015(06)
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博士論文
[1]云南特有食藥用菌活性多糖研究[D]. 明建.西南大學(xué) 2008
[2]中國蜜環(huán)菌的遺傳學(xué)與系統(tǒng)學(xué)研究[D]. 秦國夫.中國林業(yè)科學(xué)研究院 2002

碩士論文
[1]昭通天麻共生優(yōu)良蜜環(huán)菌的篩選及特性研究[D]. 彭述敏.西南林業(yè)大學(xué) 2011



本文編號:3692491

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