利用TALEN技術(shù)定點突變水稻DST基因
發(fā)布時間:2021-09-22 10:30
水稻的耐鹽堿性質(zhì)一直是各大育種科學(xué)家們研究的重點之一。本研究利用類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介導(dǎo)的基因組定點突變技術(shù),以優(yōu)良的粳稻品種空育131為改良對象,通過失活該材料DST基因,增強其耐鹽堿性質(zhì)。具體結(jié)果如下:1、成功構(gòu)建了具有基因組定點突變功能的TALEN載體。2、通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的方法,對水稻DST基因靶位點進行定點突變。通過對轉(zhuǎn)基因位點PCR檢測、Southern印記雜交分析;對DST基因靶位點的尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳、測序分析,共獲得2株DST基因靶位點片段缺失的陽性T0代轉(zhuǎn)基因植株,陽性轉(zhuǎn)化率為1.16%。3、陽性轉(zhuǎn)基因植株加代純合后,對T2代植株進行鹽堿脅迫,通過表型分析,以及生理生化指標(biāo)的測定,發(fā)現(xiàn)陽性轉(zhuǎn)基因植株的鹽堿耐受性確實比野生型對照植株高,也就是產(chǎn)生了耐鹽堿性質(zhì)。4、大田種植,調(diào)查T2代植株與對照植株的農(nóng)藝性狀差異,結(jié)果表明,除了耐鹽堿性質(zhì)顯著增強外,T2代植株的各...
【文章來源】:黑龍江大學(xué)黑龍江省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
DST基因結(jié)構(gòu)(引自Huang)
TALEN蛋白切割修復(fù)原理(引自張金脈)
空育131Figure2-1Kongyu131
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TALENs技術(shù)的研究進展及其應(yīng)用前景[J]. 唐宇,李麗莎,林峻. 生物工程學(xué)報. 2015(07)
[2]斑馬魚socs2的TALEN敲除及其敲除胚胎的生長研究[J]. 王華林,朱作言,孫永華. 水生生物學(xué)報. 2015(04)
[3]應(yīng)用TALEN技術(shù)敲除gata4基因建立斑馬魚先天性心臟病模型[J]. 劉靜,何嘉玲,暴國,李楠,王天奇,張長勇,孫德明. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2015(04)
[4]水稻葉綠體TALEN載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 方真,李丁,沈春修,夏玉梅,曹孟良. 雜交水稻. 2015(02)
[5]TALEN表達(dá)載體構(gòu)建技術(shù)研究進展[J]. 楊瀟. 西華大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(04)
[6]TALENs技術(shù)在基因功能研究中的應(yīng)用[J]. 應(yīng)春妹,陳藝升,鄭冰. 檢驗醫(yī)學(xué). 2014(05)
[7]“分子剪刀”TALEN技術(shù)簡介[J]. 麻智春. 生物學(xué)教學(xué). 2014(03)
[8]DNA剪刀——TALEN和CRISPR/Cas[J]. 倪培凌,劉暢,陳凌懿. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2014(01)
[9]基因定點突變技術(shù)簡介[J]. 胡文斌. 生物學(xué)教學(xué). 2013(12)
[10]TALEN靶向基因修飾新技術(shù)研究進展[J]. 靳玉珠,王世山,向華,王曉虎. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(19)
本文編號:3403610
【文章來源】:黑龍江大學(xué)黑龍江省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
DST基因結(jié)構(gòu)(引自Huang)
TALEN蛋白切割修復(fù)原理(引自張金脈)
空育131Figure2-1Kongyu131
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TALENs技術(shù)的研究進展及其應(yīng)用前景[J]. 唐宇,李麗莎,林峻. 生物工程學(xué)報. 2015(07)
[2]斑馬魚socs2的TALEN敲除及其敲除胚胎的生長研究[J]. 王華林,朱作言,孫永華. 水生生物學(xué)報. 2015(04)
[3]應(yīng)用TALEN技術(shù)敲除gata4基因建立斑馬魚先天性心臟病模型[J]. 劉靜,何嘉玲,暴國,李楠,王天奇,張長勇,孫德明. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2015(04)
[4]水稻葉綠體TALEN載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 方真,李丁,沈春修,夏玉梅,曹孟良. 雜交水稻. 2015(02)
[5]TALEN表達(dá)載體構(gòu)建技術(shù)研究進展[J]. 楊瀟. 西華大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(04)
[6]TALENs技術(shù)在基因功能研究中的應(yīng)用[J]. 應(yīng)春妹,陳藝升,鄭冰. 檢驗醫(yī)學(xué). 2014(05)
[7]“分子剪刀”TALEN技術(shù)簡介[J]. 麻智春. 生物學(xué)教學(xué). 2014(03)
[8]DNA剪刀——TALEN和CRISPR/Cas[J]. 倪培凌,劉暢,陳凌懿. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2014(01)
[9]基因定點突變技術(shù)簡介[J]. 胡文斌. 生物學(xué)教學(xué). 2013(12)
[10]TALEN靶向基因修飾新技術(shù)研究進展[J]. 靳玉珠,王世山,向華,王曉虎. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(19)
本文編號:3403610
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