發(fā)布時(shí)間：2021-03-22 21:43

　　本試驗(yàn)以20種東北地區(qū)主栽品種為試驗(yàn)材料,分別建立大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化再生體系和大豆愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化體系,對(duì)這些大豆品種的叢生芽再生率、抗性叢生芽率、子葉節(jié)GUS染色率,愈傷組織GUS染色率等指標(biāo)進(jìn)行比較和研究,旨在篩選出適合用于大豆遺傳轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的最有效的大豆品種,為東北地區(qū)大豆實(shí)驗(yàn)室建立優(yōu)良的大豆轉(zhuǎn)化體系和大豆再生體系,提供品種選擇上的理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。主要研究結(jié)果如下:1.鐵豐31、沈農(nóng)20、遼豆13、遼豆32、東豆17、黑農(nóng)59、黑農(nóng)60、南農(nóng)31,以上8個(gè)品種在兩種外植體的農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化試驗(yàn)中均表現(xiàn)出較高轉(zhuǎn)化效率。2.中黃35、沈農(nóng)8、遼豆50、東豆641、黑農(nóng)54、鐵豆81,以上6個(gè)品種,在兩種外植體的農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化試驗(yàn)中表現(xiàn)為低轉(zhuǎn)化效率。3.對(duì)比了不同品種的轉(zhuǎn)化效率表現(xiàn),發(fā)現(xiàn)中黃13、遼豆15、東豆9、鐵豆37、中黃56、沈農(nóng)22,這6個(gè)品種的轉(zhuǎn)化效率情況與其在試驗(yàn)中所選擇的外植體類型有關(guān)。4.中黃56、沈農(nóng)22這兩個(gè)品種,因其產(chǎn)生了嵌合體而呈現(xiàn)假陽(yáng)性,導(dǎo)致在子葉節(jié)中體現(xiàn)出較低的轉(zhuǎn)化率,而在愈傷組織的農(nóng)桿菌介導(dǎo)試驗(yàn)中表現(xiàn)出高轉(zhuǎn)化效率;中黃13、遼豆15、東豆9、鐵豆37,這4... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

質(zhì)粒pCAMBIA3301-1圖譜

圖 2 大豆種子的滅菌Fig.2 Sterilization of soybean seeds發(fā)的大豆種子，種臍向下接種至萌發(fā)培養(yǎng)基中萌發(fā)，每個(gè)子，在 26℃條件下，黑暗處萌發(fā) 16h。的獲得與侵染豆種子，用鑷子固定好，再用手術(shù)刀從兩片子葉中間切腋芽。在子葉節(jié)處，用刀輕劃 7 刀，切割前將刀片沾取放入含菌液的 CCM 液體培養(yǎng)基中，放入轉(zhuǎn)速為 126r/m蕩 30min。每個(gè)品種都重復(fù)上述步驟。

圖 3 子葉節(jié)的叢生芽誘導(dǎo)過(guò)程ig. 3 Cluster Bud induction process of Cotyledon nodes選培養(yǎng)基中加入篩選劑草甘膦 PPT（5mg/L），以含有芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基（SIM）的廣口培養(yǎng)瓶中，在暗 8h）培養(yǎng)，培養(yǎng) 10 天后，切去其多余的下后，統(tǒng)計(jì)抗性叢生芽誘導(dǎo)率。組織的獲得織的獲得，不同于子葉節(jié)的獲得，獲取愈傷組別置于條件相同的培養(yǎng)瓶中，萌發(fā) 5 天，26℃，待其下胚軸伸長(zhǎng)取下胚軸，用手術(shù)刀切成 1cS 培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng) 10 天，得到完整的

【參考文獻(xiàn)】：
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