發(fā)布時(shí)間：2021-03-11 08:32

　　本文在已建立的人參和三七不定根培養(yǎng)體系的基礎(chǔ)上,針對(duì)培養(yǎng)物中皂苷含量偏低以及皂苷合成下游途徑不清楚等科學(xué)問題,進(jìn)行了誘導(dǎo)子的作用研究和基因UGTPgX的功能驗(yàn)證。本文首先考察了米曲霉、黃曲霉、黑曲霉的菌體粗提物以及菌體發(fā)酵液對(duì)人參不定根生長和人參皂苷積累的影響。發(fā)現(xiàn)濃度為200 mg·L^-1黑曲霉菌體粗提物可以顯著提高不定根中人參皂苷的含量(29.90±4.67mg·g^-1),是對(duì)照組的3.52倍。為了研究黑曲霉菌體粗提物中起誘導(dǎo)作用的主要成分,考察了菌體蛋白和菌體多糖對(duì)人參皂苷含量的影響,結(jié)果顯示當(dāng)菌體蛋白濃度為100 mg·L^-1時(shí),人參皂苷的含量達(dá)到最大值為20.37±0.98 mg·g^-1,是空白組的2.83倍。因此我們又考察了不同分子蛋白片段對(duì)人參皂苷含量的影響,發(fā)現(xiàn)150 mg·L^-1大于30 kDa的蛋白片段使人參皂苷的含量達(dá)到最大18.78±0.55 mg·g^-1,為空白組的1.90倍。隨后對(duì)人參不定根中人參皂苷種類以及誘導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了考察,... 

【文章來源】：天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

誘導(dǎo)子作用機(jī)制Figure1-1Themechanismoftheelicitor

第 2 章 誘導(dǎo)子對(duì)人參不定根作用的研究47圖2-5 大于30 kDa的蛋白片段對(duì)人參不定根中 ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) 的積累Figure 2-5 Accumulation of ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) in adventitious roots of P.ginseng as affected by protein fragment more than 30 kDaconcentrations. Data represent mean values ±SE of three replicates; each experiment wasrepeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple range test at P ≤ 0.05.為了研究大于 30 kDa 的蛋白片段是如何提高人參不定根中皂苷含量的，我們對(duì)大于 30 kDa 的蛋白片段的誘導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了研究。主要是通過考察蛋白作為誘導(dǎo)子作用不同時(shí)間對(duì)信號(hào)分子積累、抗性基因表達(dá)的影響。當(dāng)大于30 kDa蛋白片段作為誘導(dǎo)子作用于人參不定根時(shí)，發(fā)現(xiàn)鈣離子（Ca2+）、磷脂酶（PLA2）、過氧化氫（H2O2）、一氧化氮（NO）、乙烯（ET）、脫落酸（ABA）、水楊酸（SA）和茉莉酸（JA）的含量在短時(shí)間內(nèi)迅速得到積累。并且從圖2-5中可以看出當(dāng)大于30 kDa蛋白片段作為誘導(dǎo)子作用12 h時(shí)，Ca2+

[158]。圖2-6 大于30 kDa的蛋白片段對(duì)人參不定根中抗性基因表達(dá)的影響, PAL (a), PR10 (b)Figure 2-6 The effect of protein fragment more than 30 kDa on the expression levels of defensegenes in adventitious roots of P.ginseng. Data represent mean values ±SE of three replicates;each experiment was repeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple rangetest at P ≤ 0.05.2.4.3.3 A.niger 大于 30KD 菌蛋白作用不同時(shí)間對(duì)人參皂苷代謝途徑中功能基因表達(dá)量以及人參皂苷含量的影響

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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