王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞分化的影響及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-26 13:58
脂肪組織的發(fā)育包括脂肪細(xì)胞的增殖與分化,其生長各個(gè)階段受諸多內(nèi)外因子調(diào)控,如內(nèi)源性的胰島素以及外源環(huán)境。研究表明,從中草藥王不留行的種子中提取的黃酮類化合物王不留行黃酮苷(Vaccarin)可以促進(jìn)血管生成。此外,王不留行黃酮苷也參與了肝臟中葡萄糖及脂代謝紊亂等重要生物學(xué)過程的調(diào)控。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)脂肪細(xì)胞分化可以加速傷口愈合。王不留行黃酮苷是否調(diào)控脂肪細(xì)胞的增殖與分化,以及傷口的愈合目前尚不清楚。本研究利用王不留行黃酮苷處理3T3-L1脂肪細(xì)胞,探究其對(duì)3T3-L1細(xì)胞的增殖、遷移及分化的影響,闡明王不留行黃酮苷在脂肪細(xì)胞發(fā)育中的調(diào)控作用,并初步探討了其調(diào)控機(jī)制,解析了王不留行黃酮苷利用脂肪細(xì)胞的聚集促進(jìn)傷口愈合的機(jī)理。主要獲得以下結(jié)果:1.王不留行黃酮苷對(duì)3T3-Ll脂肪細(xì)胞增殖的影響。0、50、100μM王不留行黃酮苷處理3T3-L1細(xì)胞24 h,通過CCK-8試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比不同濃度的王不留行黃酮苷處理對(duì)細(xì)胞無毒副性(P>0.05);通過EdU染色發(fā)現(xiàn)100μM王不留行黃酮苷處理后與對(duì)照組相比,EdU陽性細(xì)胞率無顯著性差異(P>0.05),表明其對(duì)3T3-L...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 動(dòng)物脂質(zhì)沉積調(diào)控的重要性
1.2 天然產(chǎn)物調(diào)控動(dòng)物脂肪沉積
1.3 小分子藥物——王不留行黃酮苷的研究進(jìn)展
1.3.1 王不留行黃酮苷的鑒定及代謝
1.3.2 王不留行黃酮苷藥理學(xué)研究
1.4 王不留行作為中草藥飼料添加劑在養(yǎng)殖業(yè)中的研究
1.4.1 王不留行在哺乳動(dòng)物中的研究
1.5 GPR120 作為藥物發(fā)揮作用的靶點(diǎn)
1.5.1 GPR120 與糖脂代謝的關(guān)系
1.5.2 GPR120 與炎癥的關(guān)系
1.6 胰島素抵抗與肥胖有直接關(guān)系
1.7 脂肪細(xì)胞與傷口愈合
試驗(yàn)研究
前言
第二章 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞的增殖與遷移的作用
2.1 引言
2.2 材料與方法
2.2.1 細(xì)胞毒性檢測(cè)
2.2.2 細(xì)胞增殖檢測(cè)
2.2.3 細(xì)胞劃痕試驗(yàn)
2.2.4 數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞活力的檢測(cè)
2.3.2 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞增殖的影響
2.3.3 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞遷移的影響
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞分化的影響
3.1 引言
3.2 材料與方法
3.2.1 材料
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
3.2.3 RNA提取
3.2.4 RT-qPCR
3.2.5 總蛋白的提取、BCA測(cè)蛋白濃度、蛋白免疫印跡
3.2.6 GLUT4 免疫熒光染色
3.2.7 數(shù)據(jù)處理
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞分化的影響
3.3.2 王不留行黃酮苷對(duì)分化相關(guān)基因及蛋白的影響
3.3.3 王不留行黃酮苷促進(jìn)細(xì)胞分化的信號(hào)通路研究
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第四章 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠皮膚傷口愈合
4.1 引言
4.2 材料與方法
4.2.1 材料
4.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物處理
4.2.3 傷口皮膚H&E染色
4.2.4 傷口愈合相關(guān)基因檢測(cè)
4.2.5 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠傷口愈合
4.3.2 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠傷口愈合的潛在機(jī)制探究
4.4 討論
4.5 小結(jié)
結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及進(jìn)一步研究內(nèi)容
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
進(jìn)一步研究內(nèi)容
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]脂肪酸受體4在食欲調(diào)控中的研究進(jìn)展[J]. 陳虎,汪斌,田正志,周波,李志瓊. 生命科學(xué). 2018(07)
[2]負(fù)載王不留行黃酮苷納米纖維作為創(chuàng)傷敷料的研究[J]. 邱玉宇,蔡維維,邱麗穎,王清清,魏取福. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2017(03)
[3]胡柚皮黃酮對(duì)高脂血癥大鼠的降血脂作用研究[J]. 楊佩磊,蔣劍平,李全清,伍旭明,陳芝蕓. 中國中藥雜志. 2017(05)
[4]王不留行黃酮苷和葛根異黃酮對(duì)哺乳母豬泌乳性能及血清激素和抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 王芳芳,武洪志,刁華杰,王志龍,鄧曉敏,刁新平. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(12)
[5]飼糧添加王不留行與大豆異黃酮對(duì)泌乳母豬生產(chǎn)性能和抗氧化能力的影響[J]. 李德生,方正鋒,車煉強(qiáng),林燕,徐盛玉,程栩,吳德. 中國畜牧雜志. 2014(01)
[6]王不留行對(duì)奶牛乳蛋白合成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[J]. 孟海洋,孫曉旭,王立娜,林葉,袁肖寒,李慶章,高學(xué)軍. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(04)
[7]紫心甘薯黃酮提取物對(duì)糖尿病大鼠糖脂代謝的影響[J]. 姜慧芳,李向榮,唐超. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(04)
[8]HPLC測(cè)定王不留行中王不留行黃酮苷的含量[J]. 孟賀,陳玉平,秦文杰,唐曉晶,葉祖光. 中國中藥雜志. 2010(16)
[9]中藥對(duì)隱性乳房炎奶牛紅細(xì)胞免疫粘附功能的影響[J]. 王秋芳,張淼濤,效梅,時(shí)云娜,李永鵬,曹平. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2001(01)
碩士論文
[1]FGFR-1介導(dǎo)的王不留行黃酮苷促內(nèi)皮細(xì)胞增殖及血管生成的作用機(jī)制[D]. 王旭.江南大學(xué) 2017
[2]王不留行提取物對(duì)母兔哺乳性能的影響[D]. 林自如.西南大學(xué) 2017
[3]王不留行抗炎、鎮(zhèn)痛活性部位篩選及其作用機(jī)制研究[D]. 黨曉芬.陜西師范大學(xué) 2014
本文編號(hào):3052687
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 動(dòng)物脂質(zhì)沉積調(diào)控的重要性
1.2 天然產(chǎn)物調(diào)控動(dòng)物脂肪沉積
1.3 小分子藥物——王不留行黃酮苷的研究進(jìn)展
1.3.1 王不留行黃酮苷的鑒定及代謝
1.3.2 王不留行黃酮苷藥理學(xué)研究
1.4 王不留行作為中草藥飼料添加劑在養(yǎng)殖業(yè)中的研究
1.4.1 王不留行在哺乳動(dòng)物中的研究
1.5 GPR120 作為藥物發(fā)揮作用的靶點(diǎn)
1.5.1 GPR120 與糖脂代謝的關(guān)系
1.5.2 GPR120 與炎癥的關(guān)系
1.6 胰島素抵抗與肥胖有直接關(guān)系
1.7 脂肪細(xì)胞與傷口愈合
試驗(yàn)研究
前言
第二章 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞的增殖與遷移的作用
2.1 引言
2.2 材料與方法
2.2.1 細(xì)胞毒性檢測(cè)
2.2.2 細(xì)胞增殖檢測(cè)
2.2.3 細(xì)胞劃痕試驗(yàn)
2.2.4 數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞活力的檢測(cè)
2.3.2 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞增殖的影響
2.3.3 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞遷移的影響
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞分化的影響
3.1 引言
3.2 材料與方法
3.2.1 材料
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
3.2.3 RNA提取
3.2.4 RT-qPCR
3.2.5 總蛋白的提取、BCA測(cè)蛋白濃度、蛋白免疫印跡
3.2.6 GLUT4 免疫熒光染色
3.2.7 數(shù)據(jù)處理
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 王不留行黃酮苷對(duì)3T3-L1 細(xì)胞分化的影響
3.3.2 王不留行黃酮苷對(duì)分化相關(guān)基因及蛋白的影響
3.3.3 王不留行黃酮苷促進(jìn)細(xì)胞分化的信號(hào)通路研究
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第四章 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠皮膚傷口愈合
4.1 引言
4.2 材料與方法
4.2.1 材料
4.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物處理
4.2.3 傷口皮膚H&E染色
4.2.4 傷口愈合相關(guān)基因檢測(cè)
4.2.5 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠傷口愈合
4.3.2 王不留行黃酮苷促進(jìn)小鼠傷口愈合的潛在機(jī)制探究
4.4 討論
4.5 小結(jié)
結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及進(jìn)一步研究內(nèi)容
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
進(jìn)一步研究內(nèi)容
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]脂肪酸受體4在食欲調(diào)控中的研究進(jìn)展[J]. 陳虎,汪斌,田正志,周波,李志瓊. 生命科學(xué). 2018(07)
[2]負(fù)載王不留行黃酮苷納米纖維作為創(chuàng)傷敷料的研究[J]. 邱玉宇,蔡維維,邱麗穎,王清清,魏取福. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2017(03)
[3]胡柚皮黃酮對(duì)高脂血癥大鼠的降血脂作用研究[J]. 楊佩磊,蔣劍平,李全清,伍旭明,陳芝蕓. 中國中藥雜志. 2017(05)
[4]王不留行黃酮苷和葛根異黃酮對(duì)哺乳母豬泌乳性能及血清激素和抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 王芳芳,武洪志,刁華杰,王志龍,鄧曉敏,刁新平. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(12)
[5]飼糧添加王不留行與大豆異黃酮對(duì)泌乳母豬生產(chǎn)性能和抗氧化能力的影響[J]. 李德生,方正鋒,車煉強(qiáng),林燕,徐盛玉,程栩,吳德. 中國畜牧雜志. 2014(01)
[6]王不留行對(duì)奶牛乳蛋白合成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[J]. 孟海洋,孫曉旭,王立娜,林葉,袁肖寒,李慶章,高學(xué)軍. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(04)
[7]紫心甘薯黃酮提取物對(duì)糖尿病大鼠糖脂代謝的影響[J]. 姜慧芳,李向榮,唐超. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(04)
[8]HPLC測(cè)定王不留行中王不留行黃酮苷的含量[J]. 孟賀,陳玉平,秦文杰,唐曉晶,葉祖光. 中國中藥雜志. 2010(16)
[9]中藥對(duì)隱性乳房炎奶牛紅細(xì)胞免疫粘附功能的影響[J]. 王秋芳,張淼濤,效梅,時(shí)云娜,李永鵬,曹平. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2001(01)
碩士論文
[1]FGFR-1介導(dǎo)的王不留行黃酮苷促內(nèi)皮細(xì)胞增殖及血管生成的作用機(jī)制[D]. 王旭.江南大學(xué) 2017
[2]王不留行提取物對(duì)母兔哺乳性能的影響[D]. 林自如.西南大學(xué) 2017
[3]王不留行抗炎、鎮(zhèn)痛活性部位篩選及其作用機(jī)制研究[D]. 黨曉芬.陜西師范大學(xué) 2014
本文編號(hào):3052687
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