根系的形成和發(fā)育是牧草產(chǎn)量的重要基礎(chǔ),該過(guò)程由若干基因參與調(diào)控。來(lái)源于動(dòng)物細(xì)胞的調(diào)節(jié)物質(zhì)ChIFN-ɑ能促進(jìn)植物根系形成和發(fā)育,但其在植物細(xì)胞中的作用機(jī)制尚不清楚。論文通過(guò)電鏡觀察、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序和熒光定量PCR等技術(shù),在對(duì)ChIFN-α和百脈根根系發(fā)育關(guān)系研究基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探究其在百脈根不定根形成和發(fā)育過(guò)程中的分子調(diào)控機(jī)制,以解析動(dòng)物細(xì)胞因子在植物細(xì)胞中的作用途徑,為植物生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控提供新的選擇途徑。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.轉(zhuǎn)ChIFN-α基因百脈根的鑒定分析。通過(guò)GUS組織化學(xué)活性檢測(cè)以及基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)目的基因,發(fā)現(xiàn)外源ChIFN-α基因穩(wěn)定存在于轉(zhuǎn)基因百脈根（TP）受體植物中。2.ChIFN-ɑ對(duì)百脈根不定根發(fā)育的影響。以野生型親本（WT）為對(duì)照,觀察比較轉(zhuǎn)ChIFN-α基因百脈根的不定根發(fā)育情況。發(fā)現(xiàn)在不定根形成及其發(fā)育初期的12d觀察期內(nèi),TP百脈根的不定根比WT提前3d出現(xiàn),發(fā)育較快,且不定根根毛數(shù)量多。ChIFN-ɑ基因表達(dá)促進(jìn)受體百脈根不定根的形成和發(fā)育。3.ChIFN-α介導(dǎo)的百脈根不定根發(fā)育分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。水培誘導(dǎo)不定根發(fā)育0d、3d、6d、9d和12d的轉(zhuǎn)錄水... 

【文章來(lái)源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)基因百脈根的遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)Fig.3-1：identificationoftransgenicLotusjaponicusGeneticstabilitybyGUShistochemicalstainingandPCR

貴州大學(xué) 2019 屆碩士學(xué)位論文2 ChIFN-α對(duì)百脈根不定根形成和發(fā)育的影響對(duì)百脈根不定根發(fā)育不同時(shí)期的水培觀察（圖 3-2）。發(fā)現(xiàn)：相對(duì)于野生型，轉(zhuǎn)ChIFN-α百脈根的不定根發(fā)育時(shí)間更短，在第 12d 時(shí)，轉(zhuǎn) ChIFN-α百脈根出現(xiàn)明顯根系，而同一時(shí)期的野生型還未出現(xiàn)根系。結(jié)果表明，ChIFN-α基因?qū)Π倜}根不定根發(fā)育具有促進(jìn)作用。對(duì)于 0d 的百脈根，發(fā)現(xiàn) WT 與 TP 斜切面無(wú)明顯差異；在 3d 時(shí)，WT 與 TP斜切面均出現(xiàn)輕微的褐化現(xiàn)象，但相對(duì)于 WT，TP 的褐化程度更低；在 6d 時(shí)，兩者均出現(xiàn)褐化程度加深的現(xiàn)象；在 9d 時(shí)，相對(duì)于 WT，發(fā)現(xiàn) TP 在斜切面附近出現(xiàn)綠色突起，而 WT 無(wú)此現(xiàn)象；在的 12d 時(shí)，發(fā)現(xiàn)在 TP 的綠色突起位置出現(xiàn)了不定根，而 WT 也開(kāi)始出現(xiàn)綠色突起。說(shuō)明 TP 相對(duì)于 WT，對(duì)于外界機(jī)械損傷的修復(fù)速度更快；同時(shí)，在不定根的發(fā)育時(shí)間上比 WT 快 3d 左右。

貴州大學(xué) 2019 屆碩士學(xué)位論文hIFN-ɑ對(duì)百脈根根毛發(fā)育的影響過(guò)掃描電鏡，觀察不定根水培發(fā)育 16d 的野生型和轉(zhuǎn)基因百脈根。發(fā)現(xiàn)野生兩組根的大小基本接近，且都出現(xiàn)了根毛。但是野生型百脈根的不定根上根育，而轉(zhuǎn)基因百脈根根毛發(fā)育的更快，出現(xiàn)了發(fā)育完全的根毛（圖 3-3D）百脈根根毛的數(shù)量要多于野生型。表明 ChIFN-α對(duì)于百脈根根系及根毛發(fā)育調(diào)控作用。A

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2951622