蛋白質(zhì)組學(xué)是連接基因組學(xué)、遺傳學(xué)和生理學(xué)的一門學(xué)科,目前已成為研究生物科學(xué)各個領(lǐng)域的必不可少的學(xué)科。在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,蛋白質(zhì)的提取、分離及低豐度蛋白的富集等步驟直接影響后續(xù)的蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果。低豐度蛋白質(zhì)是植物體中重要的活性物質(zhì),參與新陳代謝、轉(zhuǎn)錄和翻譯等多種生理及病理過程,低豐度蛋白的富集對植物蛋白質(zhì)組學(xué)的研究具有重要意義。高豐度蛋白與低豐度蛋白之間的動態(tài)范圍可達到12個數(shù)量級,導(dǎo)致了對低豐度蛋白質(zhì)檢測困難。組合肽配體庫技術(shù)是一種新型的富集低豐度蛋白的方法,能夠?qū)崿F(xiàn)在降低高豐度蛋白質(zhì)豐度的同時富集低豐度蛋白質(zhì),目前已被應(yīng)用于各領(lǐng)域的蛋白質(zhì)組學(xué)研究中。本論文對水稻葉片蛋白質(zhì)組提取、分離與富集技術(shù)進行研究,為水稻蛋白質(zhì)組研究提供了技術(shù)支撐,為深入研究水稻蛋白質(zhì)組提供了理論基礎(chǔ)。1、確立了酚法提取、二維液相色譜分離水稻葉片蛋白質(zhì)組的方法。此提取方法為后續(xù)蛋白質(zhì)的富集研究提供了技術(shù)支撐。比較了水稻葉片蛋白質(zhì)提取方法(酚法、十二烷基硫酸鈉法(SDS法)和三氯乙酸/丙酮法(TCA/丙酮法))、液相色譜分離系統(tǒng)(一維液相色譜與二維液相色譜)對蛋白質(zhì)鑒定數(shù)量的影響。結(jié)果表明:二維液相色譜條件下,酚法... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗流程示意圖

學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 基于酚法提取和二維液相分離的水稻蛋白質(zhì)組譜系統(tǒng)提供的峰容量和分辨率難以滿足高效分離的要求(李篤信, 2011)，而二維液對肽段混合物進行 2 次分離，大大提高了系統(tǒng)分辨率和峰容量(李曉龍, 2010 ; 劉效的降低了樣品的復(fù)雜程度，有利于低豐度蛋白的檢測(Kilambi et al, 2016 ; 劉

14(a) (b) (c)圖 2.3 不同提取方法提取的蛋白質(zhì)在一維液相色譜和二維液相色譜條件下鑒定到的蛋白質(zhì)數(shù)目比較注：(a)、(b)、(c) 分別代表酚法、SDS 法和 TCA/丙酮法；小圓代表一維液相色譜，大圓代表二維液相色譜Fig. 2.3 Comparison of the number of proteins separated by 1D LC and 2D LC following extraction with threedifferent methodsNote: (a)、(b)、(c) represent phenol method, SDS method and TCA/acetone method respectively; smaller circle represents 1-D LC(one-dimensional liquid chromatography), larger circle represents 2-D LC (two-dimensional liquid chromatography)


本文編號：2948849