馬鈴薯栽培種遺傳背景狹窄,且與野生種之間有性雜交不親和,通過體細胞雜交可以克服有性雜交不親和的障礙,為馬鈴薯育種創(chuàng)造新的種質(zhì)資源。本實驗室前期通過體細胞融合技術獲得了一批馬鈴薯栽培種（AC142）與不結(jié)薯野生種S.etuberosum（ETB）的體細胞雜種,通過體細胞雜交能將S.etuberosum的豐富病毒抗性轉(zhuǎn)移至雜種后代中,為了將來能夠更好地在生產(chǎn)上利用這批體細胞雜種,本實驗對這批體細胞雜種的結(jié)薯性狀從細胞水平及分子水平進行了研究,結(jié)果如下:1.對這些體細胞雜種進行田間結(jié)薯特性鑒定,四倍體體細胞雜種結(jié)薯表型介于栽培種與野生種之間,但六倍體體細胞雜種在結(jié)薯特性上表現(xiàn)了明顯的分離,有完全不結(jié)薯的基因型,也有薯重顯著高于親本的基因型。為了研究六倍體體細胞雜種的結(jié)薯特性是否與其親本基因組組成不同有關,對部分結(jié)薯優(yōu)良的體細胞雜種及完全不結(jié)薯的體細胞雜種進行了基因組原位雜交（GISH）驗證,雜交結(jié)果顯示結(jié)薯基因型的染色體組成為“AAAAEE”,不結(jié)薯基因型的染色體組成為“AAEEEE”,通過原位雜交結(jié)果驗證了六倍體體細胞雜種結(jié)薯特性隨著其親本基因組組成比例改變而變化。2.為了從基因表達水平驗... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

體細胞雜種結(jié)薯特性

圖 2 雙探針 GISH 鑒定馬鈴薯種間體細胞雜種染色體組成a–1，b–1 和 c–1 分別為六倍體體細胞雜種 EA18-1、EA49-1、EA5-1 的中期染色體制片；a–2，b–2 和c–2 采用 S. etuberosum 基因組探針分別與體細胞雜種 EA18-1、EA49-1、EA5-1 開展 GISH 的結(jié)果；a–3，b–3 和 c–3 采用 S. tuberosum 基因組探針分別與體細胞雜種 EA18-1、EA49-1、EA5-1 開展 GISH 的結(jié)果；a–4，b–4 和 c–4 體細胞雜種 EA18-1、EA49-1、EA5-1 雙探針 GISH 的結(jié)果。綠色為來自 S. etuberosum基因組探針的信號，橙紅色為來自 S. tuberosum 基因組探針的雜交信號。Bars=5 μm。Figure 2 Identification of the chromosome compositions in interspecific somatic hybrids ofpotato by double probe GISHa–1, b–1 和 c–1 Metaphase chromosomes of hexaploid hybrids EA49-1, EA18-1, EA5-1; a–2, b–2 和 c–2GISH performed in hexaploid somatic hybrid EA49-1, EA18-1 and EA5-1 using S. etuberosum genomic probe; a–3, b–3 和 c–3 GISH performed in hexaploid somatic hybrid EA49-1, EA18-1 and EA5-1 using S. tuberosumgenomic probe; a–4, b–4 和 c–4 Double probe GISH of hexaploid somatic hybrid EA49-1, EA18-1 and EA5-1.Green colors denote signals from genomic probe of S. etuberosum. Orange red colors denote signals from genomicprobe of S. tuberosum. Bars=5 μm.

.3 體細胞雜種試管薯誘導.3.1 體細胞雜種結(jié)薯表型前人已有研究試管薯發(fā)育與大田基本一致，但大田結(jié)薯受諸多環(huán)境因素影致表型不夠穩(wěn)定，而試管薯處于控制的組培條件下，能夠提供理想的生長發(fā)境。選取了田間結(jié)薯實驗中典型的結(jié)薯六倍體體細胞雜種及典型的不結(jié)薯六體細胞雜種以及親本 AC142 和 ETB 進行離體誘導結(jié)薯表型觀察，結(jié)果表明結(jié)薯表型與離體誘導結(jié)薯表型一致，但體細胞雜種結(jié)薯時間滯后于親本，二親本 AC142 于接種后第六周開始結(jié)薯（圖 3A），而此時結(jié)薯體細胞雜種尚薯（圖 3B、圖 3C），直至接種第 11 周結(jié)薯體細胞雜種才全部出現(xiàn)結(jié)薯（圖 4C）。二倍體親本 ETB 及不結(jié)薯體細胞雜種在組培條件下一直未結(jié)薯（圖 3 3E、圖 3F、圖 4D、圖 4E、圖 4F）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]馬鈴薯塊莖發(fā)育機理及其基因表達[J]. 柳俊,謝從華.  植物學通報. 2001(05)
[2]基因組原位雜交技術及其在植物遠緣雜種染色體分析中的應用[J]. 于卓,云錦鳳.  內(nèi)蒙古林學院學報. 1998(02)

博士論文
[1]馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）試管塊莖形成的QTL定位及遺傳分析[D]. 周俊.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]馬鈴薯與茄子原生質(zhì)體融合創(chuàng)制新資源研究[D]. 喻艷.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[3]光誘導的馬鈴薯試管薯形成相關基因轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 單建偉.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[4]茄屬種及其種間體細胞雜種的染色體特征分析[D]. 何禮.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[5]同化物在木薯塊根韌皮部卸載的細胞學路徑[D]. 潘坤.海南大學 2012
[6]基于COSII標記的Solanum section Petota野生多倍體馬鈴薯的系統(tǒng)發(fā)育研究[D]. 蔡丹英.浙江大學 2011

碩士論文
[1]馬鈴薯兩個種間體細胞雜種創(chuàng)制與結(jié)薯特性研究[D]. 靳姣姣.華中農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]馬鈴薯薯形相關基因序列分析及光敏色素影響塊莖形成初步研究[D]. 沈云龍.華中農(nóng)業(yè)大學 2013



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