發(fā)布時間：2020-12-25 10:54

　　七葉皂苷為我國著名藥用植物娑羅子的主要活性成分,具有抗腫瘤、消炎、抗?jié)B出等功效,應用廣泛、需求量大。七葉皂苷主要來源于七葉樹的干燥種子。隨著野生七葉樹資源過度開發(fā)利用,加之生境破壞嚴重,使得七葉樹的野生資源越來越匱乏。本研究以秦巴山區(qū)七葉樹為試材,分析其內(nèi)生菌多樣性,初步建立秦巴山區(qū)七葉樹內(nèi)生菌種質(zhì)資源庫;篩選代謝產(chǎn)七葉皂苷的內(nèi)生菌,并分析其生物活性,為下一步利用微生物發(fā)酵法制備七葉皂苷奠定基礎;篩選具有轉化七葉皂苷為次生活性皂苷的微生物菌株,為七葉皂苷利用率提高提供新的思路。1、七葉樹內(nèi)生細菌的分離及生物活性研究利用組織勻漿法對七葉樹進行內(nèi)生細菌的分離,共獲得124株純培養(yǎng)菌株,初步鑒定出48株,分屬4個屬,優(yōu)勢類群為芽孢桿菌屬（Bacillus）。發(fā)酵后對提取物進行抑菌試驗,結果顯示48株內(nèi)生細菌具有不同程度的抑菌活性,其中WJ-51對四種靶標菌均具有抑制作用;對A₅₄₉細胞的增值也具有抑制作用。2、七葉樹內(nèi)生真菌的分離及生物活性研究利用組織培養(yǎng)法進行七葉樹內(nèi)生真菌的分離,共獲得168株純培養(yǎng)菌株,初步鑒定出44株,分屬5個門,20個屬,優(yōu)勢門為半知菌亞門（D... 

【文章來源】：陜西理工大學陜西省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

1株內(nèi)生細菌及其同源菌株基于16SrRNA基因序列構建的系統(tǒng)發(fā)育樹

+ + ++ +++ + + ++++ - + +++ +++ + + 8.00-13.00 mm；++：抑菌直徑為 13.00-18.00 mm；－：ameter 8.00-13.00 mm;++:Antibacterial diameter 13.00-18示，48 株細菌具有不同程度的抑菌活性，WJ61作用較好；WJ51、WJ24 對大腸桿菌的抑制作用球菌的抑制作用較好；WJ61、WJ47`、WJ87、W9、WJ64、WJ33、WJ24、WJ9 對四種靶標菌均的抑制作用強于其他菌株。類及生物活性研究定

圖 2-4 七葉皂苷標品和菌株 WJ51 提取物對 A549細胞增殖的抑制作用Fig.2-4 Inhibitory effect of extract of strain and standard of aescine on proliferation of2.4 小結與討論本研究主要對陜西省漢中市留壩縣紫柏山自然保護區(qū)七葉樹內(nèi)生細菌進行對單菌落進行統(tǒng)計，結合形態(tài)學特征與分子生物學鑒定方法，來確定七葉樹內(nèi)多樣性本研究共分離的到七葉樹內(nèi)生細菌 124 株，排重后篩選出內(nèi)生細菌 48 株個屬，分布最廣的類群是芽孢桿菌屬（Bacillus），通過對內(nèi)生細菌的生物活性析七葉樹內(nèi)生細菌的抑菌活性。以常見的四種病原菌作為靶標菌，采用濾紙片分離得到的 48 株內(nèi)生細菌進行抑菌活性檢測，抑菌結果顯示 48 株細菌具有不抑菌活性，WJ61、WJ51、WJ20 對枯草芽孢桿菌的抑制作用較好；WJ51、W桿菌的抑制作用較好；WJ57、WJ83、WJ89 對金黃色葡萄球菌的抑制作用較好

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]七葉樹內(nèi)生細菌的分離鑒定及生物活性研究[J]. 王嬌,解修超,鄧百萬,羅陽蘭,劉軍生.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2017(11)
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[6]中華七葉樹種子化學成分及生物活性研究進展[J]. 路強強,石新衛(wèi),胡浩,周軍輝,崔新愛.  西北藥學雜志. 2016(06)
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博士論文
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[3]土壤微生物轉化三七莖葉資源化利用的研究[D]. 韓穎.東北大學 2008

碩士論文
[1]人參中高極性人參皂苷類成分的研究[D]. 張佳音.吉林大學 2017
[2]陜西漢中古旱蓮內(nèi)生菌多樣性的研究[D]. 王菲.陜西理工學院 2016
[3]野生與養(yǎng)殖大鯢腸道微生物多樣性分析及產(chǎn)酶活性研究[D]. 劉棟.陜西理工學院 2016
[4]人參有效成分超臨界萃取法提取與純化的研究[D]. 劉鴻鋮.吉林農(nóng)業(yè)大學 2014
[5]芽孢桿菌A8對三七莖葉提取物的生物轉化作用研究[D]. 劉麗.東北大學 2013
[6]大豆耐鹽基因GmZnF1和GmPK6的耐逆功能研究[D]. 陳新.山東大學 2013
[7]商陸內(nèi)生菌促進甜高粱生長和重金屬土壤修復的研究[D]. 徐濤英.湖南大學 2011
[8]菌株TR-20對三七中人參皂苷轉化的研究及轉化產(chǎn)物的分離純化[D]. 王青.上海師范大學 2009
[9]三七總皂苷對急性心肌梗死后左室重構作用的研究[D]. 郭潔文.廣州中醫(yī)藥大學 2008
[10]三七皂苷轉化菌株的篩選及其轉化產(chǎn)物的分離純化與鑒定[D]. 田翠.上海師范大學 2008



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