本文選擇GmRACK1C、GmFBA6、GmbHLH、GmZFP、GmChiC、NAC4和NAC27等7個(gè)大豆馴化相關(guān)基因?yàn)檠芯繉?duì)象,在利用生物信息學(xué)方法分析這些基因上游啟動(dòng)子區(qū)域順式作用元件的基礎(chǔ)上,采用qRT-PCR方法系統(tǒng)研究在干旱、高鹽和ABA處理等非生物脅迫后大豆馴化相關(guān)基因的表達(dá)變化,重點(diǎn)采用CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)建大豆馴化相關(guān)基因敲除突變體以及擬南芥同源基因敲除突變體,并比較研究各種突變體及其野生型對(duì)不同非生物脅迫響應(yīng)的差異,以明確大豆馴化相關(guān)基因在大豆對(duì)非生物脅迫響應(yīng)中的可能作用。主要結(jié)果如下:1)順式作用元件分析發(fā)現(xiàn),本文研究的7個(gè)大豆馴化相關(guān)基因的啟動(dòng)子區(qū)域均含有與ABA、非生物脅迫及其他調(diào)控相關(guān)的順式作用元件,表明這些基因的表達(dá)有可能受非生物脅迫調(diào)控。qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn),GmbHLH、GmZFP、GmChiC、NAC4和NAC27等5個(gè)基因?qū)Ψ巧锩{迫比較敏感,其中GmbHLH和GmZFP等2個(gè)基因在干旱和高鹽脅迫后表達(dá)均明顯下調(diào),GmChiC、NAC4和NAC27等3個(gè)基因在干旱和高鹽脅迫后表達(dá)量明顯上調(diào)。2)采用CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)基因技術(shù)... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

在干旱、高鹽和ABA處理下大豆馴Fig.3.1Theexpressionofdomesticaticultivatedsoybeanunderdrought,highs注：A；GmRACK1C，B：GmFBA6，C：GmbHLH，D

AT3G15500-sgRNA1AT3G15500-sgRNA2AT2G22750-sgRNA1AT4G28890-sgRNA1 AT4G28890-sgRNA2AT4G19810-sgRNA1 AT4G19810-sgRNA2AT2G22750-sgRNA2

第 3 章 結(jié)果與分析有目的靶點(diǎn)序列的 CRISPR/Cas9 載體轉(zhuǎn)南芥，因?yàn)?CRISPR/Cas9 載體中含有潮進(jìn)行潮霉素鑒定，不具有潮霉素抗性的植株能夠正常生長(zhǎng)（圖 3.4）。提取具有潮霉素抗片段擴(kuò)增，電泳檢測(cè)結(jié)果顯示以水為模的陰性對(duì)照中沒(méi)有擴(kuò)增到潮霉素抗性基因轉(zhuǎn)化后的擬南芥植株 DNA 為模板擴(kuò)增到潮抗性基因的植株說(shuō)明載體成功轉(zhuǎn)入擬南芥

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2919942