白及通常以其假鱗莖為主要入藥部位。本研究通過內(nèi)生真菌誘導(dǎo)子與白及組培苗共生處理,以提升白及目標物質(zhì)產(chǎn)量和人工種植植株中的有效成分含量。研究通過測定內(nèi)生真菌誘導(dǎo)子與白及苗共生后的植株生長性狀、總酚含量、總多糖含量,篩選出一株最能促生及提高活性物質(zhì)的菌株。分別將該菌株的菌絲體、發(fā)酵液、菌絲體中分離出的蛋白質(zhì)和多糖提取液與白及苗進行共生培養(yǎng),進一步探究白及體內(nèi)信號分子和次生代謝關(guān)鍵酶的調(diào)控,以及總酚含量的相關(guān)性。主要結(jié)果如下:(1)通過內(nèi)生真菌誘導(dǎo)子與白及組培苗共生,得到菌株1-N2誘導(dǎo)子處理后的白及苗單株鮮重增長量為其中最大值2.45 g,鱗莖的總酚含量為4.59 mg/g,鱗莖的總多糖含量為12.42%,因此篩選出內(nèi)生真菌1-N2誘導(dǎo)子可有效促進白及新芽和根系生長。(2)內(nèi)生真菌1-N2的菌絲體和發(fā)酵液分別與白及組培苗共生后,在2組處理的信號分子含量變化的過程中,除水楊酸外,H2O2和NO的含量出現(xiàn)最大值時間一致。發(fā)酵液處理的樣品中,3種次生代謝關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羥化酶活性的最大表達時間分別為第20天、第12天、第4天;菌絲體處理樣品中的3種關(guān)鍵酶活性均在第16天發(fā)生明顯表達,可能為平行關(guān)系。菌絲體作用后的白及苗總酚含量高于發(fā)酵液處理的,菌絲體處理的樣品在第16天時總酚含量最高,為4.55 mg/g,與關(guān)鍵酶活性的表達產(chǎn)生對應(yīng)關(guān)系,則說明第16天為誘導(dǎo)菌絲體處理組的白及總酚含量的最佳時期。3種次生代謝關(guān)鍵酶在與菌絲體處理的白及組培苗總酚含量變化方面也有明顯相關(guān)性。(3)內(nèi)生真菌1-N2菌絲體中分離出的蛋白質(zhì)和多糖提取液分別與白及苗共生培養(yǎng)后,2組處理的信號分子含量出現(xiàn)最大值的先后順序完全一致,均為先H2O2、再NO、后SA。加入蛋白質(zhì)處理的樣品中,3種次生代謝關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羥化酶活性的最大表達時間分別為第20天、第12天、第8天;多糖提取液處理的樣品中3種關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羥化酶活性的最大表達時間分別為第16天、第16天、第8天。多糖提取液處理的樣品在第16天時總酚含量最高為4.26 mg/g,并高于蛋白質(zhì)處理組,說明誘導(dǎo)多糖提取液處理組的白及總酚的最佳時間為第16天。
【學(xué)位單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S567.239
【部分圖文】：

３．７０±０．１０ｍｇ／ｇ、４．２７±０．１１ｍｇ／ｇ、４．４１±０．１６ｍｇ、４．１６±０．１３ｍｇ?和?４．５９±０．１２ｍｇ／ｇ，??對照的白及組培苗總酚含量為３．６６±０．１５ｍｇ／ｇ。本試驗的１０種真菌誘導(dǎo)子處理的白及??組培苗的總酚含量，均大于空白對照組。經(jīng)單因素方差分析得知，如圖３－３，?８種處理??的樣品總酚含量與ＣＫ差異極顯著（Ｐ＜０．０１），其中組間１－Ｎ２和３－Ｇ７之間差異不顯著，??１－Ｎ２比３－Ｇ６處理的樣品總酚含量多０．３２ｍｇ／ｇ；處理１－Ｎ２與１－Ｂ１、１－Ｇ３、１－Ｇ４、１－Ｇ５、??３－Ｇ６、２－Ｇ１?之間差異顯著（Ｐ＜０．０５），處理?１－Ｎ２?與?１－Ｂ１、１－Ｇ４、１－Ｇ５、３－Ｇ６、２－Ｇ１?之??間差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；?１－Ｇ５與１－Ｇ４之間差異顯著，與１－Ｇ３之間差異極顯著；１－Ｂ１??與１－Ｇ３、１－Ｇ４、３－Ｇ６、３－Ｇ７均差異顯著，１－Ｂ１與ＣＫ差異極顯著，但總酚含量僅為ＣＫ??的１．１倍，相對于其他與ＣＫ差異極顯著的處理，樣品含量較低；處理１－Ｂ４、３－Ｇ２與??ＣＫ在０．０５水平上組間差異不顯著
【參考文獻】

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本文編號：2846072