【摘要】：中藥白芷Angelica dahurica[Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan]是衛(wèi)生部首批公布的藥食兩用名單中藥材之一,也是傳統(tǒng)美白運(yùn)用最多的一味藥材,本實(shí)驗(yàn)在前期課題組選育的白芷品種基礎(chǔ)上,更加系統(tǒng)地進(jìn)行白芷優(yōu)良種質(zhì)資源的篩選,以得到抽薹率較低的白芷品種。進(jìn)而結(jié)合白芷傳統(tǒng)應(yīng)用對(duì)其美白護(hù)膚成分進(jìn)行科學(xué)挖掘,為更好地開(kāi)發(fā)白芷在美容化妝品中的應(yīng)用提供參考。主要研究結(jié)果如下:1.不同采收部位川白芷種子對(duì)早薹影響以“川芷2號(hào)”不同部位的種子為材料,進(jìn)行種子萌發(fā)等生理生化指標(biāo)的測(cè)定。其中側(cè)頂種子含有較高的可溶性糖和可溶性蛋白,發(fā)芽率較高(78.33%),表明種子中充足的可溶性糖和可溶性蛋白為其萌發(fā)提供了必需的條件。不同部位種子的發(fā)芽率與其碳氮比成反比,植株早薹率與其種子碳氮比成正比。綜合來(lái)看,側(cè)頂種子千粒重最大為3.12g,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,種子活力指數(shù)達(dá)到88.16%,含水量最低11.20%,早薹率較低,因此確定白芷留種采收部位以側(cè)頂種子為最好。2.不同采收時(shí)期川白芷對(duì)早薹影響對(duì)不同采收期(成熟度一致)“川芷2號(hào)”種子來(lái)說(shuō),采收時(shí)間越晚,其種子碳氮比和發(fā)芽率越低。子代株高和莖粗隨母本種子成熟期的延后呈先增后降的趨勢(shì),以當(dāng)年6月28日采收的種子最高。子代葉片碳氮比與母本種子采收期呈一定相關(guān)關(guān)系,母本種子采收越晚,其子代葉片碳氮比越低,早薹率也較低。值得注意的是母本種子不同采收期對(duì)子代產(chǎn)量和品質(zhì)也有一定影響,以6月28日成熟的種子后代產(chǎn)量最高,根形最優(yōu),異歐前胡素最高,歐前胡素含量居中。3.外源糖處理對(duì)川白芷生長(zhǎng)及抽薹的影響通過(guò)不同濃度的外源糖處理“川芷2號(hào)”幼苗發(fā)現(xiàn),外源糖處理在早期可以提高內(nèi)源可溶性糖含量,但長(zhǎng)期處理后則影響不大,甚至?xí)䦟?dǎo)致可溶性糖含量下降。外源糖處理未能導(dǎo)致白芷早薹,但對(duì)植株生長(zhǎng)有較大促進(jìn)作用,可顯著提高白芷株高和產(chǎn)量等,糖處理后期,淀粉含量隨糖濃度的增加呈現(xiàn)降低的趨勢(shì),但總體含量均高于空白對(duì)照。4.不同抽薹品性川白芷轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析對(duì)“川芷2號(hào)”不同抽薹特性(同一時(shí)期早期抽薹和未抽薹兩份材料)葉片進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,著重對(duì)早期抽薹白芷和未抽薹白芷材料中進(jìn)行差異基因分析,結(jié)果顯示在早薹材料中一個(gè)MADS盒子基因及FUL基因的表達(dá)水平較高,也具有一些與糖相關(guān)的基因,推測(cè)與早薹相關(guān)。5.川白芷水提液提取方式優(yōu)化及美白活性成分分析以“川芷2號(hào)”干燥根為實(shí)驗(yàn)材料,選取不同溶劑進(jìn)行提取,考察不同提取溶劑對(duì)酪氨酸酶的抑制活性。結(jié)果表明相同濃度的白芷水提液與醇提液相比,具有更高的酪氨酸酶抑制活性,且存在一定的濃度效應(yīng),其抑制率與水提液濃度成正比;通過(guò)人體美白功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)可知,涂抹白芷水提液兩周后L值有逐漸升高的趨勢(shì),△E_(ab)在第二周達(dá)到顯著差異,第三周達(dá)到極顯著差異,相同濃度的水提液比曲酸美白效果更好;通過(guò)液相條件檢測(cè),發(fā)現(xiàn)水提液中兩種呋喃性香豆素幾乎檢測(cè)不出,而相對(duì)應(yīng)的醇提液中含量較高。進(jìn)一步說(shuō)明水提物所含光敏性物質(zhì)少,結(jié)合人體試驗(yàn)表明白芷水提液可直接作用于皮膚,對(duì)人體皮膚無(wú)過(guò)敏作用。選擇提取時(shí)間、溫度、料液比等因素,以酪氨酸酶抑制率為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行試驗(yàn),采用Box-Behnken方法優(yōu)化影響酪氨酸酶的主要因素,進(jìn)行3因素3水平的試驗(yàn)設(shè)計(jì),以對(duì)酪氨酸酶的抑制率為評(píng)價(jià)指標(biāo),建立影響酪氨酸酶抑制率的二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型,最后得到白芷美白活性部位最佳的提取條件為:溫度30℃,水料比為25 mL/g、提取時(shí)間為30 min。最優(yōu)條件下提取部位對(duì)酪氨酸酶的抑制率為24.20%。考慮到白芷水提部位含有較多多糖成分,在去除多糖前后,對(duì)提取液進(jìn)行酪氨酸酶活性檢測(cè),發(fā)現(xiàn)兩者對(duì)酪氨酸酶抑制率的IC_(50)差異不大,分別為35.36 mg/mL和32.23 mg/mL,表明白芷水提物中多糖的存在對(duì)酪氨酸酶抑制活性貢獻(xiàn)不大,其活性物質(zhì)主要存在于去除多糖后的活性部位里面。采用不同極性的有機(jī)溶劑按極性從小到大的順序,對(duì)響應(yīng)面優(yōu)化后的提取液進(jìn)行萃取,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到膏狀物,再用蒸餾水溶解,依次等比稀釋,所得到的乙酸乙酯相的IC_(50)最小,為9.58 mg/mL,表明白芷美白活性部位存在于乙酸乙酯部位。6.采用分子對(duì)接技術(shù)預(yù)測(cè)有效美白成分采用分子對(duì)接技術(shù),將文獻(xiàn)所報(bào)道的白芷有效化學(xué)成分分別與酪氨酸酶進(jìn)行對(duì)接實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)5-甲氧基-8-羥基補(bǔ)骨脂與酪氨酸酶的結(jié)合力最強(qiáng),氧化前胡素次之。5-甲氧基-8羥基補(bǔ)骨脂與酪胺氨酸酶的作用力有與HIS-263有π-π共軛作用,和Cu離子有絡(luò)合作用,在HIS-61、HIS-296有氫鍵作用,這幾個(gè)作用位點(diǎn)與曲酸的相同。其中氧化前胡素與酪氨酸酶之間的作用力是氫鍵與π-π共軛,與曲酸具有作用相同的氨基酸殘基的位點(diǎn)ASN-260,VAL-283,推測(cè)白芷中起美白作用的物質(zhì)可能是5-甲氧基-8-羥基補(bǔ)骨脂及氧化前胡素。綜上,本文系統(tǒng)研究了碳氮比與抽薹率之間的關(guān)系,經(jīng)過(guò)試驗(yàn)表明,在白芷中,不同采收部位的種子以及不同采收時(shí)期的種子,其碳氮比直接關(guān)系到白芷的抽薹率,這一結(jié)果為碳氮比指導(dǎo)生產(chǎn)奠定一定的理論基礎(chǔ)。另外探究了提取溶劑對(duì)美白效果的影響,確定了水提液效果更好,活性部位在乙酸乙酯層,為以后白芷重返化妝品市場(chǎng)作鋪墊。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S567.239
【圖文】：

2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.1 不同采收部位種子形態(tài)特征鑒定結(jié)果三份材料的形態(tài)特征如圖 1 所示，三年生正常抽薹白芷側(cè)頂種子，具翅雙懸圓形至卵圓形，扁平，長(zhǎng) 5-8 mm，寬 4.5-6 mm，厚 0.7-1.6 mm，種子顏色為淡黃色，兩端呈鈍圓形，基部有的帶小果柄，背面有明顯的 5 條縱棱，3 條背棱，展成翅，翅翼顏色較淺，連接光滑平坦。對(duì)三類(lèi)種子進(jìn)行形態(tài)組織學(xué)研究，可發(fā)生正常抽薹的側(cè)頂白芷（側(cè)頂白芷）種子分果偏短，三年生正常抽薹頂花白芷種花白芷）和早期兩年抽薹開(kāi)花的白芷種子（公白芷）分果偏長(zhǎng)；從分果寬度來(lái)看種子和頂花種子較寬，公白芷種子頂花較窄；頂花白芷與側(cè)頂白芷種翅比例偏大芷種翅比例偏小。種子稱(chēng)取的重量在 1.329 g-3.547 g 之間，其中，頂花種子的千高，而公白芷種子的千粒重顯著低于頂花及側(cè)頂種子（表 1）。

濃度外源糖對(duì)內(nèi)源糖、可溶性蛋白含量及 C/N 比影響（處理 1 周后） of different concentrations of exogenous sugars on endogenous sugars, solublecontent and C/N ratio（After treated one week））可知，在處理一周后，葉片中的可溶性糖的含量隨著濃度的增處理中的可溶性糖含量與對(duì)照差異不明顯，0.1%S 中的蔗糖含量3（SP）可知，各濃度條件處理下的可溶性蛋白與對(duì)照之間無(wú)明顯知，隨著外源糖處理濃度的增加，C/N 比增加，2.5%S 與對(duì)照差）可知，隨著外源糖處理下，可溶性淀粉的含量都顯著高于對(duì)照下降的趨勢(shì)。

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本文編號(hào)：2738473