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葛分子標記與表型性狀關(guān)聯(lián)分析

發(fā)布時間:2020-05-17 19:36
【摘要】:葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)是用途廣泛、具有經(jīng)濟價值的豆科葛屬植物,隨著近些年來市場需求增加,優(yōu)良品種的選育是目前的首要任務(wù)。本試驗運用ISSR分子標記結(jié)合分析葛單株的表型性狀分析個體間的的差異,篩選品質(zhì)好、高產(chǎn)量的優(yōu)良植株,為提高葛根產(chǎn)量及相關(guān)農(nóng)藝性狀的分子標記輔助選擇育種等的研究提供一定的參考。本試驗分別從表型性狀及ISSR分子標記兩種方法對137份葛植物材料進行分析研究,為葛屬植物的種質(zhì)資源和新品種培育提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:本試驗選取25個表型性狀對137份葛單株進行田間調(diào)查及測定,研究結(jié)果表明,就16個形態(tài)學(xué)性狀差異明顯,變異系數(shù)的變異范圍在17.55%-174.04%之間,平均變異系數(shù)為71.31%。根冠比、地上部分鮮重、單根重等是137份葛單株形態(tài)學(xué)性狀主要的變異來源。5個生理指標中,蒸騰速率及相對葉綠素含量變異較為明顯,變化系數(shù)分別為59.41%和49.53%,平均變異系數(shù)為36.00%。葛單株的6個營養(yǎng)成分指標的變異均值為19.97%,變化范圍為9.42%-32.93%,其中P含量和Ca含量變異程度較大,變異系數(shù)分別為32.93%和28.16%。利用22條引物對137份葛單株進行ISSR-PCR擴增,采用瓊脂糖凝膠電泳對擴增的產(chǎn)物進行檢測,22條引物共擴增出62條條帶,其中多態(tài)性條帶共58條,多態(tài)性百分率為92.05%,平均每條引物擴增出2.64條。其中引物UBC826擴增出條帶最多,擴增條帶5條,多態(tài)性條帶5條,多態(tài)性100%;引物UBC829與UBC853兩條引物擴增出的條帶最少,都為1條,均有1條多態(tài)性條帶,多態(tài)性為100%。通過對22條引物進行PCR擴增,根據(jù)擴增的產(chǎn)物利用SPSS17.0軟件將137份葛單株不同時期的表型性狀進行方差及多重檢驗或T檢驗分析。結(jié)果表明137份葛單株的在不同生長期的性狀存在顯著差異或極顯著差異,存在差異的主要性狀有根冠比、地上部分鮮重、莖粗、節(jié)間長等。依據(jù)擴增結(jié)果分析性狀有差異的引物有USB810、USB827、USB829、USB836、USB840、USB846和USB851。莖粗(SD)、葉寬(LW)、分枝數(shù)(SN)以及地上部分鮮重(GFW)可以作為優(yōu)良植株的選擇依據(jù)。引物USB829與為莖徑(SD)性狀相關(guān)聯(lián),USB840與節(jié)間長(IL)和凈光合速率(Pn)這兩個性狀相關(guān)聯(lián),引物USB846與葉寬(LW)、相對葉綠素含量(SPAD)、根徑(RD)、粗灰分(Ash)及磷含量(P)性狀相關(guān)聯(lián)。
【圖文】:

引物


葛分子標記與表型性狀關(guān)聯(lián)分析2.95 ,證明提取的 DNA 樣品中蛋白質(zhì)等雜質(zhì)含量較少,符合分子試驗對 DNA濃度和純度的要求,可用作接下來的分子試驗。表 3-1 葛單株 DNA 提取檢測結(jié)果Table 3-1 Results of DNA Extraction and Detection of Kudzu260/280 260/230 DNA 含量1.87 2.95 92.3ng/uL3.4.2 引物的篩選合成的引物經(jīng)過 PCR 擴增反應(yīng),,通過瓊脂糖凝膠電泳對 100 條 ISSR 引物進行檢測,將反應(yīng)具有條帶的引物進行記錄。并從中挑選出多態(tài)性好的進行ISSR-PCR 反應(yīng)試驗。引物篩選的結(jié)果如表 3-2 所示。

引物


圖 3-2 引物 USB829 擴增結(jié)果Fig.3-2 Primer USB829 amplification results圖 3-3 引物 USB829 擴增結(jié)果Fig.3-3 Primer USB829 amplification results
【學(xué)位授予單位】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S567.19

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本文編號:2669071

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