【摘要】：選題依據(jù):黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus Bge.var.mongholicus.Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge的干燥根。隨著全民保健意識的提高,市場對黃芪的需求量迅速增長,野生黃芪資源已經(jīng)不能滿足市場需求,人工種植黃芪得到了大規(guī)模的發(fā)展。保證藥材的質(zhì)量與中醫(yī)臨床用藥安全有效的關(guān)鍵是確保藥材質(zhì)量的穩(wěn)定與均一,藥材中的化學(xué)成分是發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ),易受到物種、產(chǎn)地、生態(tài)環(huán)境、生長方式等多種因素的影響而發(fā)生變異。但是,只有當(dāng)藥材的化學(xué)成分發(fā)生變異而引起藥效變化時,藥材才會被分類使用。而諸多影響因素中,種植方式引起的成分變化比物種與產(chǎn)地所造成的影響更大~([2])。目前,市場上流通的商品黃芪主要為蒙古黃芪,蒙古黃芪的主要產(chǎn)地為山西、內(nèi)蒙古、陜西、甘肅等地。而甘肅主要以移栽蒙古黃芪為主,山西、內(nèi)蒙古則以仿野生為主。仿野生蒙古黃芪一般生長年限可達5-6年以上,而移栽蒙古黃芪生長年限一般為2年。有研究表明二者在外觀性狀,化學(xué)成分含量,藥效上均出現(xiàn)了差異。根據(jù)中心法則可知,決定外觀性狀與化學(xué)成分含量的是遺傳物質(zhì)DNA,因此我們采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對不同生長方式及年限的蒙古黃芪進行遺傳多樣性研究,試圖尋找與生長方式、年限相關(guān)的DNA條帶,為后續(xù)研究黃芪次生代謝產(chǎn)物的相關(guān)性建立基礎(chǔ)。目的:本研究在山西恒山山脈周邊的相近氣候下,選取了1-6年仿野生蒙古黃芪與1-2年移栽蒙古黃芪�？疾焱簧L方式下不同生長年限以及同一生長年限下不同生長方式對蒙古黃芪DNA遺傳多樣性的影響。并且尋找與生長方式,年限相關(guān)的DNA條帶,為后續(xù)研究與黃芪的次生代謝產(chǎn)物的相關(guān)性基礎(chǔ)。方法:利用ISSR標(biāo)記技術(shù)進行黃芪條帶擴增,通過POPGENE 1.32、NTsys-pc軟件構(gòu)建蒙古黃芪的遺傳圖譜,通過SPSS相關(guān)性分析,找出與生長方式、生長年限相關(guān)的DNA條帶。結(jié)果:通過對1-6年生蒙古黃芪遺傳多樣性指數(shù)P=58,PPB=98.31%,Ne=1.7178,He=0.3954,I=0.5738,Ht=0.3954,及1-2年生移栽蒙古黃芪的遺傳多樣性指數(shù)有Na=1.9180,Ne=1.6039,He=0.3471,I=0.5126,P=56,PPB=91.8%,Ht=0.3471分析,表明蒙古黃芪具有豐富的遺傳多樣性,且仿野生蒙古黃芪的遺傳多樣性水平高于移栽蒙古黃芪。1-6年生蒙古黃芪在遺傳相似系數(shù)為0.612時聚為3類,Ⅰ聚集了不同年限的黃芪;Ⅱ聚集了部分1,3,4年生的黃芪;Ⅲ聚集了4,6年生的部分黃芪。1-2年生移栽蒙古黃芪在遺傳相似系數(shù)為0.601時聚為2類,Ⅰ類中1年生,2年生各占一半;Ⅱ類中大體呈1年生,2年生黃芪先各自聚為一類,然后在聚為一大類。利用SPSS相關(guān)性分析,找到2個與生長年限相關(guān)的ISSR條帶,855-3*,827-4*,與生長方式相關(guān)的條帶2個,為840-2*,866-3*。結(jié)論:本文通過ISSR技術(shù)對蒙古黃芪進行了遺傳多樣性分析,發(fā)現(xiàn)蒙古黃芪具有豐富的遺傳多樣性,且仿野生蒙古黃芪的遺傳多樣性水平高于有在蒙古黃芪的遺傳多樣性水平。不同生長方式的蒙古黃芪聚類整體呈現(xiàn)先以生長方式仿野生,移栽聚,然后以生長年限聚。通過相關(guān)性分析分別找出與生長方式、年限相關(guān)的差異條帶各2個,為后續(xù)與次級代謝產(chǎn)物的相關(guān)性提供幫助。
【圖文】：

第三章 1-6 年生仿野生蒙古黃芪的 ISSR 遺傳多樣性分析條帶進行聚類分析，并且構(gòu)建樹狀聚類圖。采用 SPSS 軟件分別對 ISSR 分子標(biāo)記的 01 矩陣數(shù)據(jù)進行生長方式，，生長年限的相關(guān)性分析，找出二者相關(guān)的條帶。3.3 實驗結(jié)果3.3.1 蒙古黃芪的 DNA 提取結(jié)果本實驗共提取蒙古黃芪樣本 162 個 DNA，所有樣品均用 1%的瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，結(jié)果顯示條帶清晰、明亮。圖 3.1 為部分蒙古黃芪樣本所提取的 DNA瓊脂糖凝膠檢測結(jié)果。

-6年生仿野生蒙古黃芪聚類圖
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S567.239

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本文編號：2657326