GmLUX調(diào)控大豆生育期的分子功能驗(yàn)證
發(fā)布時(shí)間:2020-05-09 19:11
【摘要】:大豆[Glycine max L.Merr.]是重要的經(jīng)濟(jì)作物。大豆開(kāi)花期是產(chǎn)量的重要影響因素之一,解析開(kāi)花期相關(guān)基因的分子機(jī)制對(duì)于提高大豆產(chǎn)量具有非常重要的意義。在擬南芥等長(zhǎng)日照植物中已經(jīng)證明LUX可以與ELF3和ELF4形成蛋白復(fù)合物,參與生物鐘的調(diào)控進(jìn)而影響開(kāi)花期。前人研究表明J(GmELF3)結(jié)合到大豆開(kāi)花期核心調(diào)控因子E1基因啟動(dòng)子的GmLUX結(jié)合原件負(fù)調(diào)控E1基因轉(zhuǎn)錄表達(dá),從而影響生育期和產(chǎn)量,暗示J與GmLUX形成蛋白復(fù)合物。然而短日照植物大豆中關(guān)于GmlUX基因的功能及分子機(jī)制研究尚不完善。本研究利用基因敲除和過(guò)表達(dá)遺傳轉(zhuǎn)化獲得的轉(zhuǎn)基因株系以及大豆主要生育期基因的近等基因系鑒定了大豆中兩個(gè)GmLUX基因:GmLUX1和GmLUX2對(duì)開(kāi)花期的調(diào)控,酵母雙雜交技術(shù)驗(yàn)證GmLUX蛋白與J、GmELF4蛋白的相互作用。得到以下結(jié)果:1、短日照條件下,過(guò)表達(dá)GmLUX1、GmLUX2基因可以使E1基因表達(dá)量下降,FT2a、FT5a基因的表達(dá)量升高,開(kāi)花期提前。敲除GmLUX1、GmLUX2基因可以使E1基因的表達(dá)量升高,FT2a、FT5a基因的表達(dá)量下降,開(kāi)花期推遲。E3、E4能夠抑制GmLUX1和GmLUX2基因的表達(dá)。2、大豆中的兩個(gè)GmLUX基因GmLUX1和GmLUX2均與J(GmELF3)有直接相互作用,但GmLUX1和GmLUX2均不能與GmELF4直接相互作用。在大豆cDNA文庫(kù)中篩選到6個(gè)與GmLUX互作的蛋白,它們都是光系統(tǒng)n捕光色素蛋白復(fù)合體相關(guān)的蛋白,說(shuō)明GmLUXU GmLUX2可能參與光合作用。GmLUX基因分子功能的研究和作用機(jī)理的解析,能完善大豆開(kāi)花期分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò),對(duì)大豆分子輔助育種具有積極的意義。
【圖文】:
白連鎖圖并尋找生命活動(dòng)中例如代謝途徑上各環(huán)節(jié)的作用規(guī)律等。逡逑1.3本研究技術(shù)路線逡逑本研究的技術(shù)路線如下(圖1.1):逡逑基因克隆逡逑邐+邋t邋_邐I邐_邋,,邋I邐)逡逑基因功能驗(yàn)|邋G/r?LOX\人之間互作驗(yàn)證]邋|邐GmLUX互y蛋白的篩選逡逑過(guò)表達(dá)植株|邋敲除植株^邐邐邐逡逑|酵母雙雜交驗(yàn)證邐|邋GmLUX與大豆cDNA文庫(kù)酵母共逡逑邐^^邐逡逑檢pc開(kāi)花期性狀邐|逡逑Q-PCR分析:悇|光周^咖雌因功能和對(duì)大豆開(kāi)澊影響+邋|逡逑圖1.1技術(shù)路線逡逑Figure邋1.1邋Technical邋rout逡逑7逡逑
圖2.1大豆Cas9-GmLUX載體圖譜逡逑Fig邋2.1邋Cas9-GmLUX邋vector邋map逡逑
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S565.1
本文編號(hào):2656604
【圖文】:
白連鎖圖并尋找生命活動(dòng)中例如代謝途徑上各環(huán)節(jié)的作用規(guī)律等。逡逑1.3本研究技術(shù)路線逡逑本研究的技術(shù)路線如下(圖1.1):逡逑基因克隆逡逑邐+邋t邋_邐I邐_邋,,邋I邐)逡逑基因功能驗(yàn)|邋G/r?LOX\人之間互作驗(yàn)證]邋|邐GmLUX互y蛋白的篩選逡逑過(guò)表達(dá)植株|邋敲除植株^邐邐邐逡逑|酵母雙雜交驗(yàn)證邐|邋GmLUX與大豆cDNA文庫(kù)酵母共逡逑邐^^邐逡逑檢pc開(kāi)花期性狀邐|逡逑Q-PCR分析:悇|光周^咖雌因功能和對(duì)大豆開(kāi)澊影響+邋|逡逑圖1.1技術(shù)路線逡逑Figure邋1.1邋Technical邋rout逡逑7逡逑
圖2.1大豆Cas9-GmLUX載體圖譜逡逑Fig邋2.1邋Cas9-GmLUX邋vector邋map逡逑
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S565.1
【參考文獻(xiàn)】
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1 王翠艷;丁東風(fēng);于曉菊;閻瑞香;廖芳;趙磊;陳苗;李偉東;喬坤艷;劉菁;李明剛;;Floral dip法在大豆遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用研究[J];南開(kāi)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年01期
本文編號(hào):2656604
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