【摘要】：豬苓為多孔菌科真菌豬苓Polyporus umbellatus(Pers.)Fries的干燥菌核,其性平,味甘、淡,具利水滲濕之功效,用于水腫,淋濁,泄瀉,帶下和小便不利。隨著豬苓原藥材的需求與日俱增,人工栽培豬苓成為解決供需矛盾的關(guān)鍵。優(yōu)質(zhì)苓種是實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ),適宜接菌技術(shù)是提高苓種接菌率和藥材產(chǎn)量的關(guān)鍵。本研究廣泛收集河北省不同產(chǎn)地豬苓苓種材料12份,進(jìn)行了苓種質(zhì)量指標(biāo)及分級(jí)研究,探討了不同培養(yǎng)料配比、苓種處理方式及含水率、伴栽物比例、栽植穴大小、栽植坡度等對(duì)密環(huán)菌菌索生長狀況及苓種接菌率的影響,比較分析了不同采收年限的豬苓產(chǎn)量和質(zhì)量差異。主要研究結(jié)果如下:1確定了豬苓苓種活力、苓種切面黃藍(lán)度b*、苓種切面亮度L*和單苓鮮重4項(xiàng)質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo),k均值聚類法和標(biāo)準(zhǔn)差法相結(jié)合將豬苓苓種分為三個(gè)等級(jí)。一級(jí)苓種:苓種活力≥0.399mm/d,苓種切面亮度L*≥74.34,苓種切面黃藍(lán)度b*≤15.94;二級(jí)苓種:苓種活力≥0.248mm/d,苓種切面亮度L*≥65.33,苓種切面黃藍(lán)度b*≤20.34;三級(jí)苓種:苓種活力≥0.164mm/d,苓種切面亮度L*≥53.95,苓種切面黃藍(lán)度b*≤24.74。各級(jí)苓種的單苓鮮重均不低于10.0g。2不同培養(yǎng)料(腐殖土、濕樹葉)配比的蜜環(huán)菌材質(zhì)量差異顯著。各處理的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以A1處理的最高67分,其次為A2和A3處理的66分。各處理的密環(huán)菌侵染率差異顯著,以A2處理的最高97.33%,A1處理的次之92.00%。各處理的每袋蜜環(huán)菌菌索鮮重及干重、多糖含量及積累量均差異顯著,鮮重及干重均以A2處理的最大,分別為6.278g、2.537g,A1處理的次之,分別為6.099g、2.335g;多糖含量及積累量均以A1處理的最高,分別為61.18mg/g、140.77mg,A2處理的次之,分別為40.99mg/g、104.77mg。3不同苓種處理方式及含水率、伴栽物比例、栽植穴大小、栽植坡度的苓種接菌率均差異顯著。不同苓種處理方式的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以B3處理的最高65分,苓種接菌率以B3處理的最高63.67%,其次為B1處理的62.00%,且兩者差異不顯著。不同含水率苓種的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以C3處理的最高65分,苓種接菌率以C2處理的最高68.33%。不同伴栽物比例的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以D3處理的最高79分,苓種接菌率亦以D3處理的最高88.67%;不同栽植穴長度的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以E2處理的最高64分,苓種接菌率亦以E2處理的最高73.00%。不同栽植穴深度的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分以F2處理的最高69分,苓種接菌率亦以F2處理的最高66.00%。不同栽植坡度的蜜環(huán)菌菌索生長狀況總評(píng)分,G4和G5處理的均為72分最高,苓種接菌率以G4處理的最高73.67%,G5處理的次之70.33%,且兩者差異不顯著。4不同采收年限的豬苓鮮重及干重均差異顯著,單穴豬苓鮮重和干重均以4年生的最高,分別為3.787kg、2.035kg,3.5年生的次之,分別為3.334kg、1.412kg,豬苓鮮重及干重表現(xiàn)為4年生3.5年生4.5年生3年生2.5年生。不同采收年限的豬苓總灰分、酸不溶性灰分、水分、多糖、粗蛋白、粗纖維、粗脂肪、麥角甾醇等指標(biāo)含量及麥角甾醇積累量均差異顯著,總灰分含量以4年生的最低8.017%,酸不溶性灰分含量以3年生的最低0.437%,水分含量以4.5年生的最低11.518%;豬苓多糖、麥角甾醇含量和麥角甾醇積累量均以4年生的最高,分別為1.864%、0.153%、0.311kg/穴,粗蛋白、粗纖維、粗脂肪等含量均以3.5年生的最高,分別為1.959%、27.978%、1.959%。各采收年限的豬苓中,Mn、Zn、K含量以3.5年生的最高,分別為7.660mg/kg、26.543mg/kg、717.535mg/kg,Fe、Na、Mg含量以4年生的最高,分別為356.169mg/kg、257.806mg/kg、50.672mg/kg,Ca元素以4.5年生的含量最高2295.551mg/kg;Cu、Cd、Pb含量均以2.5年生的最低,分別為4.167mg/kg、0.032mg/kg、0.191mg/kg。各采收年限的豬苓中,氨基酸種類以4年生的最多13種,氨基酸總含量以4年生的最高9.134%。結(jié)論:確定了4項(xiàng)豬苓苓種質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo),將豬苓苓種質(zhì)量分為三級(jí)。確定了豬苓適宜接菌技術(shù):蜜環(huán)菌材培養(yǎng)的適宜濕樹葉比例為75%~100%,選擇含水率30%~40%苓種,較大的苓種可從離層處掰斷;栽植穴長度為45cm,深度為20cm;伴栽的腐殖土和濕樹葉比例為1:3;栽植坡度為30°~40°;適宜采收年限為3.5~4年。
【圖文】：

圖 2-2 豬苓麥角甾醇對(duì)照品（A）和供試品（B）色譜圖Fig2-2 Chromatograms of ergosterol standards (A) and test sample(B)（3）水分、酸不溶性灰分及總灰分測(cè)定：參照 2015 年版《中國藥典》一部中操作進(jìn)行，每份樣品重復(fù) 3 次，以平均值表示測(cè)定結(jié)果。（4）多糖含量測(cè)定：參照 2.2.2.2 項(xiàng)測(cè)定。（5）粗蛋白測(cè)定：參照微量凱氏定氮法[105]（6）粗脂肪測(cè)定：參照索氏提取法[106]（7）粗纖維測(cè)定：參照重量法[107]（8）微量元素測(cè)定：采用火焰原子吸收光譜法測(cè)定[108]，方法如下樣品處理 準(zhǔn)確稱取 0.500g 豬苓樣品，置于圓底燒瓶（100mL）中，，加入 25mL硝酸和高氯酸（體積比為 4∶1），放置于電熱套加熱，直至瓶有白色煙霧出現(xiàn)，調(diào)高溫度，加熱至消解液澄清透明，置于室溫下冷卻，滴加 H2O2（5 滴），消解液全部轉(zhuǎn)移至 50mL 容量瓶中，用去離子水定容，震蕩搖勻后備用，每樣品重復(fù) 3 次。儀器條件 各元素的儀器測(cè)定工作條件見表 2-4。

21圖 2-3 氨基酸混合對(duì)照品(A）及供試品（B）中氨基酸色譜圖Fig.2-3 Chromatograms ofAAmixed standards (A)and test sample (B)
【學(xué)位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S567.3

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本文編號(hào)：2607153