發(fā)布時間：2021-12-18 09:04

　　植物通過光合作用而再生,資源十分豐富。植物是良好的制造沼氣和乙醇的原料,而木質(zhì)素難于被降解,這是制約利用植物生產(chǎn)沼氣和乙醇產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸問題。本文研究構(gòu)建和應(yīng)用含木質(zhì)素酶系（木質(zhì)素過氧化物酶、錳過氧化物酶和漆酶）基因工程菌降解植物的木質(zhì)素。應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增白腐真菌的木質(zhì)素過氧化物酶基因和錳過氧化物酶基因,PCR擴(kuò)增枯草芽孢桿菌的漆酶基因。分別構(gòu)建含木質(zhì)素過氧化物酶基因的表達(dá)載體、含錳過氧化物酶基因的表達(dá)載體和含漆酶基因的表達(dá)載體。用電轉(zhuǎn)化的方法,分別將以上構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化畢赤酵母、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母,獲得含木質(zhì)素過氧化物酶基因的畢赤酵母工程菌、含錳過氧化物酶基因的畢赤酵母工程菌；含木質(zhì)素過氧化物酶基因的釀酒酵母工程菌、含錳過氧化物酶基因的釀酒酵母工程菌、含漆酶基因的釀酒酵母工程菌；含木質(zhì)素過氧化物酶基因的枯草芽孢桿菌工程菌、含錳過氧化物酶基因的枯草芽孢桿菌工程菌和含漆酶基因的枯草芽孢桿菌工程菌。將含木質(zhì)素過氧化物酶基因的工程菌進(jìn)行發(fā)酵,用發(fā)酵產(chǎn)物測定木質(zhì)素過氧化物酶活性,其酶活性分別是：97U/ml發(fā)酵液（畢赤酵母工程菌）,57.4U/ml（枯草芽孢桿菌工程菌）,43.4U/... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

圖２－１３?ｐＧＡＰＧ－ｍ叩的ＰＣＲ鑒定??Ｆｉｇ．?２－１３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｐＧＡＰＧ－ｍｎｐ?ｂｙ?ＰＣＲ??

圖２－１３?ｐＧＡＰＧ－ｍ叩的ＰＣＲ鑒定??Ｆｉｇ．?２－１３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｐＧＡＰＧ－ｍｎｐ?ｂｙ?ＰＣＲ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]真菌漆酶的研究進(jìn)展及其應(yīng)用前景[J]. 周雪婷,張躍華,羅志文,潘亭如,繆天琳.  農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2012(09)
[2]三種白腐菌對木質(zhì)纖維素降解規(guī)律的初步研究[J]. 賀新生,楊朝惠,趙春花,王曉琴.  纖維素科學(xué)與技術(shù). 2012(01)
[3]幾種化學(xué)物質(zhì)對稻草秸稈酶解糖化的影響[J]. 任天寶,尹雙耀,馬孝琴,張玲玲,蘇堯,宋安東.  農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報. 2012(01)
[4]木質(zhì)素降解菌株產(chǎn)木質(zhì)素降解酶的研究[J]. 燕紅,張曉甜,劉明.  黑龍江大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報. 2011(06)
[5]我國秸稈沼氣預(yù)處理技術(shù)的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 焦翔翔,靳紅燕,王明明.  中國沼氣. 2011(01)
[6]秸稈原料預(yù)處理方法研究進(jìn)展[J]. 孫然,冷云偉,趙蘭,任恒星,王心強(qiáng).  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[7]木質(zhì)纖維素生產(chǎn)燃料乙醇預(yù)處理技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 王敏,王倩,吳榮榮.  衡水學(xué)院學(xué)報. 2010(04)
[8]中國沼氣產(chǎn)業(yè)發(fā)展的回顧與展望[J]. 李景明,薛梅.  可再生能源. 2010(03)
[9]巴斯德畢赤酵母基因表達(dá)系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 諶井岡,張寶善.  陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(02)
[10]生物法降解秸稈木質(zhì)素研究進(jìn)展[J]. 彭曉光,楊林娥,張磊.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2010(01)

博士論文
[1]生物預(yù)處理玉米秸稈厭氧干發(fā)酵特性及沼渣基質(zhì)利用的研究[D]. 趙玲.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]木質(zhì)素過氧化物酶基因lipH2的克隆與異源表達(dá)特性研究[D]. 王瑋.清華大學(xué) 2009
[3]枯草桿菌新型表達(dá)系統(tǒng)和遺傳操作體系的建立及應(yīng)用[D]. 張曉舟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]粗糙脈孢菌漆酶基因的克隆、定點誘變及其在畢赤酵母中的表達(dá)[D]. 諶斌.江南大學(xué) 2006

碩士論文
[1]化學(xué)氧化法裂解木質(zhì)素[D]. 趙磊.北京化工大學(xué) 2012
[2]木質(zhì)素降解動力學(xué)及其反應(yīng)機(jī)理的研究[D]. 龔岳.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]漆酶基因克隆、工程菌構(gòu)建及生產(chǎn)重組酶研究[D]. 楊穗珊.海南大學(xué) 2011
[4]棉稈沼氣發(fā)酵過程優(yōu)化及微生物群落分子多樣性研究[D]. 王江麗.華中科技大學(xué) 2008



本文編號：3542075